Download PDF
ads:
UFRRJ
INSTITUTO DE VETERINÁRIA
CURSO DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS VETERINÁRIAS
PARASITOLOGIA VETERINÁRIA
DISSERTAÇÃO
Morfologia e Biologia de Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806)
(Acari: Ixodidae) Submetido ao Regulador
de Crescimento de Artrópodes
Fluazuron
Raquel Moreira Pires dos Santos Melo
2007
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
ads:
Livros Grátis
http://www.livrosgratis.com.br
Milhares de livros grátis para download.
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO
INSTITUTO DE VETERINÁRIA
CURSO DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS VETERINÁRIAS
PARASITOLOGIA VETERINÁRIA
MORFOLOGIA E BIOLOGIA DE Rhipicephalus sanguineus
(LATREILLE, 1806) (ACARI: IXODIDAE) SUBMETIDO AO
REGULADOR DE CRESCIMENTO DE ARTRÓPODES FLUAZURON
RAQUEL MOREIRA PIRES DOS SANTOS MELO
Sob a orientação do Professor
Kátia Maria Famadas
e Co-orientação do Professor
Fabio Barbour Scott
Seropédica, RJ
Fevereiro de 2007
Dissertação submetida como
requisito parcial para obtenção do
grau de Mestre em Ciências, no
Curso de Pós-graduação em
Ciências Veterinárias, Área de
Concentração em Parasitologia
Veterinária.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
ads:
UFRRJ / Biblioteca Central / Divisão de Processamentos Técnicos
636.9322696
M528m
T
Melo, Raquel Moreira Pires dos Santos,
1981-
Morfologia e biologia de Rhipicephalus
sanguineus
(Latreille) (Acari: Ixodidae)
Pires dos Santos Melo. – 2007.
43 f. : il.
Orientadora: Kátia Maria Famadas.
Dissertação (mestrado) – Universidade
Federal Rural do Rio de Janeiro,
Instituto de Veterinária.
Bibliografia: f. 33-40.
1. Coelho - Parasito - Teses. 2.
Coelho – Parasito – Controle - Teses. 3.
Coelho – Parasito – Morfologia – Teses.
4. Artrópode – Crescimento – Teses. I.
Famadas, Kátia Maria, 1961- II.
Universidade Federal Rural do Rio de
Janeiro. Instituto de Veterinária. III.
Título.
Bibliotecário: _______________________________ Data: ___/___/______
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
Aos meus pais
Georges e Janete
Ao meu irmão Gabriel e ao Michel
Pelo apoio, incentivo, carinho e
compreensão em todas as situações e
Aos meus amigos
Pelo companheirismo que tiveram comigo
Dedico
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
AGRADECIMENTOS
A Professora KÁTIA MARIA FAMADAS pela amizade e orientação neste estudo.
Ao Professor FABIO BARBOUR SCOTT, pela oportunidade, amizade e orientação
desde o início das minhas atividades acadêmicas ainda no primeiro período da graduação e
pela co-orientação e auxílio durante mais essa etapa.
.Ao curso de Pós-graduação em Ciências Veterinárias, bem como o corpo docente
pelo aprendizado e apoio durante a realização deste trabalho.
Ao Professor do Colégio Técnico da UFRRJ e Amigo ALENCAR VICENTE
BARBINOTO pelo incentivo e confiança que sempre me foram dispensados.
A minha mãe, figura sempre presente em todos os momentos de minha vida,
familiares pais, e à MICHEL ALVES DA SILVA por todo apoio e carinho.
Aos amigos de laboratório e pesquisa, JULIO ISRAEL FERNANDES, GUILHERME
GOMES VEROCAI, FRANCISCO DE ASSIS RIBEIRO, LUIZ EDUARDO ROLAND
TAVARES, FELIPE DELORME AZEVEDO e às amigas THAÍS RIBEIRO CORREIA,
CLARISSA PIMENTEL DE SOUZA, ISABELLA VILHENA FREIRE MARTINS,
KATHERINA COUMENDOUROS, VANESSA PAULINO DA CRUZ, THALITA
TRIVISOL LEAL E RAFHAELA LOPES CONCEIÇÃO pelo apoio, incentivo e amizade.
Aos amigos do Curso de Pós-graduação, aos técnicos do Laboratório, JOSÉ
CLAUDIO ANDRADE e ADEMIR MUNIZ DE ARAÚJO.
Às amigas do Alojamento F4-204, pelos momentos, felizes e tristes pelos quais
passamos juntas.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e à
Fundação de Amparo à Pesquisa do Rio de Janeiro (FAPERJ) pelo apoio financeiro na
modalidade de bolsista de mestrado e iniciação científica.
Aos animais que participaram da parte experimental, pois sem eles todo o trabalho não
teria sido realizado e a todos aqueles que de alguma forma contribuíram para a realização
deste trabalho.
Muito obrigada!
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
BIOGRAFIA
Raquel Moreira Pires dos Santos Melo, filha de Georges Freitas Machado de Melo e
Janete Moreira Pires dos Santos Melo, nascida em 11 de março de 1981, no município de São
Paulo, Estado de São Paulo.
Cursou o primário no Jardim Escola Morada do Campo, o ensino fundamental nas
Escolas Municipais Narcisa Amália e Rosária Trotta, todos localizados no município do Rio
de Janeiro, o ensino médio no Colégio Técnico da Universidade Federal Rural do Rio de
Janeiro, localizado no município de Seropédica, Estado do Rio de Janeiro.
No ano de 1999 ingressou no Curso de Licenciatura em Ciências Agrícolas da
Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, prestou novo vestibular e no ano de 2001
ingressou no curso de Zootecnia da mesma Instituição, diplomando-se em março de 2005.
Foi estagiária do Laboratório de Desenvolvimento de Produtos Parasiticidas, Instituto
de Veterinária desta mesma instituição no período de outubro de 1999 a agosto de 2001. Foi
bolsista de iniciação científica do PIBIC/CNPq, no período de agosto de 2001 a fevereiro de
2005, ambas atividades sob orientação do professor Fábio Barbour Scott.
Foi aprovada no processo de seleção para o curso de Pós-graduação em Ciências
Veterinárias, área de concentração Parasitologia Veterinária, do Instituto de Veterinária desta
instituição em 2005, sob a orientação da professora Dr. Kátia Maria Famadas e co-orientação
do professor Dr. Fabio Barbour Scott. Foi bolsista de Pós-graduação do Conselho Nacional de
Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) no período de março de 2005 a fevereiro
de 2006 e bolsista nota 10 da Fundação de Amparo á Pesquisa do Rio de Janeiro (FAPERJ)
no período de março de 2006 a fevereiro de 2007.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
RESUMO
MELO, Raquel Moreira Pires dos Santos. Morfologia e biologia de Rhipicephalus
sanguineus (Latreille, 1806) (Ixodidae) submetido ao regulador de crescimento de
artrópodes fluazuron. Seropédica: UFRRJ, 2007. 43 p. (Dissertação, Mestrado em Ciências
Veterinárias, Parasitologia Veterinária).
A realização deste estudo teve como objetivo acompanhar a morfologia e biologia de
Rhipicephalus sanguineus submetidos ao regulador de crescimento de artrópodes (AGR’s),
fluazuron, (FZN) em coelhos. O trabalho foi realizado nas dependências dos Laboratórios de
Desenvolvimento de Produtos Parasiticidas (LDPP) e de Morfofisiologia de Ácaros (LMA),
ambos pertencentes ao Departamento de Parasitologia Animal do Instituto de Veterinária da
Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ), localizada no município de Seropédica
(latitude 22º44'38" sul, longitude 43º42'27" oeste). Os reguladores de crescimento representam
uma nova categoria que vem sendo empregada amplamente no controle de ectoparasitos de
pequenos animais. Este grupo químico não apresenta efeito “knockdown”, atua de forma lenta
e gradual interferindo no seu crescimento e desenvolvimento. Os AGR’s foram divididos de
acordo com o seu mecanismo de ação, em análogos do hormônio juvenil, benzoilfenil uréias -
atuando na inibição da síntese de quitina e inibidores da deposição de quitina, derivados da
triazina e da pirimidina. O FZN foi o primeiro regulador de crescimento a ser registrado para o
controle de carrapatos ixodídeos O experimento foi dividido em 4 etapas, sendo que em cada
uma delas utilizados 10 coelhos, divididos em grupos controle e tratado. Na etapa I (fase de
larva) os coelhos foram infestados com larvas de R. sanguineus na razão de 2500
larvas/coelho. Na etapa II (fase de ninfa), na razão de 200 ninfas/coelho. Na etapa III (adultos),
os coelhos foram infestados com 25 machos e 25 fêmeas/coelho. Na etapa IV, os coelhos
foram infestados com 2500 larvas oriundas das teleóginas recuperadas na etapa III. A dose de
FZN aplicada sob a forma “pour-on” em todas as etapas foi de 10mg/kg. As experimentações
durante a fase parasitária foram realizadas em condições ambientais, no período de agosto a
novembro de 2006, e da fase não parasitária em condições controladas de laboratório (27 ± 1
ºC e 80 ± 10% UR, em escotofase). Foram analisados parâmetros de fase parasitária e não
parasitária, para larvas, ninfas e adultos. O FZN causou alterações na biologia de R. sanguineus
tais como: aumento no período de pré-postura, diminuição no peso da massa de ovos, aumento
no período de incubação dos ovos, diminuição do índice de eficiência reprodutiva, inibição do
processo de ecdise entre os estágios de larva para ninfa e de ninfa para adulto, eficácia na
inibição da reprodução das fêmeas e todos os estágios recuperados do grupo tratado tinham
tegumento sensível, corpo elíptico e comportamento letárgico. Conclui-se que o fluazuron
empregado na dose de 10mg/kg de peso corporal em coelhos promoveu alterações morfologias,
biológicas e comportamentais em R. sanguineus que indicam a possibilidade de emprego deste
AGR no controle desse carrapato, com a particularidade na redução da taxa de reinfestação.
Entretanto novos estudos necessitam ser realizados visando a eficácia do fluazuron no controle
de R. sanguineus quando empregado em cães. O uso de coelhos foi um teste preliminar para
indicar ou não a atividade do fluazuron sobre o carrapato R. sanguineus.
Palavras chave: Rhipicephalus sanguineus, benzoilfeniluréia, controle
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
ABSTRACT
MELO, Raquel Moreira Pires dos Santos. Morphology and biology of Rhipicephalus
sanguineus (Latreille, 1806) (Ixodidae) submitted the arthropods growth regulator
fluazuron Seropédica: UFRRJ, 2007. 43 p. (Dissertation, Master Science in Veterinary
Science, Veterinary Parasitology).
The purpose of this study is to follow up the morphology and biology of Rhipicephalus
sanguineus after being submitted to the arthropods growth regulator fluazuron on rabbits.
This study took place in the dependence of the Laboratories of Development of Parasiticides
Products (LDPP) and Acari Morfophisiology (LAM), both part of the Department of Animal
Parasitology of Veterinary Institute of Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
(UFRRJ), in Seropédica, (22º44'38"S, 43º42'27"W). The growth regulators represents a new
category that has been employed as ectoparasiticide on pets. This chemical group do not
presents a knockdown effect, but does act slowly and gradually interfering on parasite’s
growth and development. The AGRs are classified as per their mechanism of action. The first
group is a juvenile hormone analogue, benzoilphenil-urea – inhibiting the chitin synthesis.
The second are the inhibitors of deposition of chitin, triazin’s and pyrimidin’s derived. The
FZN was the first growth regulator registered for ixodides tick’s control. Four phases were
analyzed; each one using ten rabbits divided in control and treated. At phase I (larvae stage),
the animals were infested with R. sanguineus larvae on the ratio of 2500 larvae/rabbit. At
phase II (nymph stage), with the ratio of 200 nymphs/rabbit. At phase III (adults), the animals
were infested with 25 males and 25 females/rabbit. At phase IV, the infestation was done with
2500 larvae from engorged female ticks recovered on phase III. Fluazuron was applied as a
pour on formulation on each phase using 10mg/kg. The experimentations during the parasitic
phase had been carried through in ambient conditions, the period of August the November of
2006, and of the not parasitic phase in controlled conditions of laboratory (27 ± 1 ºC and 80 ±
10% UR, in escotofase). Parasitic and not parasitic stages of larvae, nymphs and adults were
evaluated in different parameters. The FZN changed the biology of Rhipicephalus sanguineus,
such as: increasing the pre-posture period; reducing the weight of eggs mass; increasing the
incubation period of eggs; reducing the rate of reproductive efficiency, inhibiting the ecdyse
process from larvae to nymph and from nymph to adult, efficacy in the inhibition of female
reproduction and all recovered specimen from all the stages in the treated group showed
sensible tegument, elliptical body and lethargic behavior. It is concluded that fluazuron
employed in the dose of 10mg/kg of corporal weight in rabbits promoted alterations
morphologies, biological and mannering in R. sanguineus that they indicate the possibility of
job of this AGR in the control of this carrapato, with the particularitity in the reduction of the
reinfestação tax. However new studies need to be carried through aiming at the effectiveness
of fluazuron in the control of R. sanguineus when used in dogs. The use of rabbits was a
preliminary test to indicate or not it activity of fluazuron on sanguineus carrapato R.
sanguineus.
Key words: Rhipicephalus sanguineus, bezoilphenil-urea, control.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Fluxograma das etapas experimentais para avaliação da morfologia, biologia e
eficácia do regulador de crescimento de artrópodes, fluazuron, sobre Rhipicephalus
sanguineus utilizando-se coelhos mestiços (Califórnia X Nova Zelândia) como hospedeiro
experimental. ..........................................................................................................................15
Figura 2. Cronograma das etapas de preparo dos coelhos, e infestação dos coelhos mestiços
(Califórnia X Nova Zelândia) com Rhipicephalus sanguineus do grupo controle. ..................15
Figura 3. Cronograma das etapas de tratamento com o regulador de crescimento de
artrópodes, fluazuron (FZN), preparo e infestação dos coelhos mestiços (Califórnia X Nova
Zelândia) com Rhipicephalus sanguineus do grupo tratado. ..................................................16
Figura 4. Protótipo em madeira composto por assoalho e três paredes medindo 50 cm de
altura, ângulo de 90° e com marcação a cada 5 cm, para avaliar comportamento das fêmeas
ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus quanto ao geotropismo negativo. ..........................17
Figura 5. Círculos concêntricos com raios de 25, 50, 75 e 100 cm em piso de cerâmica, para
acompanhamento da dispersão horizontal, das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus
sanguineus. ............................................................................................................................18
Figura 6. Microscopia óptica (100x) de ovo de Rhipicephalus sanguineus do grupo controle
com 11 dias de incubação em umidade relativa de 80% e temperatura 27± 1°C, demonstrando
a presença de saco retal (Sr) e túbulos de malpighi (Tm). .......................................................24
Figura 7. Aspecto dorsal de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos
tratado com fluazuron e controle. ...........................................................................................25
Figura 8. Dispersão horizontal das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus do
grupo controle. .......................................................................................................................27
Figura 9. Dispersão horizontal das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus do
grupo fluazuron. .....................................................................................................................27
Figura 10. Dispersão vertical das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos
grupos tratado com fluazuron e controle. ................................................................................28
Figura 11. Ninfas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos tratado com
fluazuron (F) e Controle (C), após alimentação em coelhos. ...................................................29
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Período parasitário e porcentagem de recuperação de fêmeas de Rhipicephalus
sanguineus coletadas de coelhos infestados artificialmente com 25 casais, nos grupos controle
e tratado com fluazuron (FZN)................................................................................................19
Tabela 2. Peso das fêmeas ingurgitadas, períodos de pré-postura e postura, peso da massa de
ovos, índice de eficiência reprodutiva (IER), eficiência reprodutiva (ER) e eficácia do
fluazuron (FZN) na inibição da reprodução de Rhipicephalus sanguineus coletados de coelhos
infestados artificialmente e mantidas a 27 ºC e 80 ± 10% de UR e escotofase. ........................21
Tabela 3. Percentual de ovos de Rhipicephalus sanguineus com saco retal nos grupos
controle e fluazuron de acordo com os dias de incubação. ......................................................22
Tabela 4. Período de embriogênese e percentual de eclosão de larvas de Rhipicephalus
sanguineus nos grupos controle e fluazuron (FZN). ................................................................22
Tabela 6. Número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus que sofreram
alterações na sua morfologia após a alimentação, assim como o qui-quadrado com correção de
Yates e o valor de “p” dos grupos controle e fluazuron............................................................25
Tabela 7. Número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos controle e
fluazuron que atingiram o raio de 100 centímetros em piso de cerâmica em diferentes tomadas
de tempo e seus respectivos qui-quadrado com correção de Yates e valor de “p”. ...................26
Tabela 8. Número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus que atingiram a
altura de 50 cm no tempo de 60 minutos. ...............................................................................28
Tabela 9. Período e percentual de ecdise e eficácia do fluazuron na inibição da ecdise de
larvas de Ranguineus sanguineus coletadas de coelhos infestados artificialmente e mantidas a
27 ºC e 80 ± 10% de UR e escotofase, no grupos controle, tratados com fluazuron e ainda
larvas oriundas de teleóginas tratadas (LOTT). .......................................................................29
Tabela 10. Número de larvas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus com alterações na
sua morfologia após a alimentação, assim como o qui-quadrado com correção de Yates e o
valor de “p” dos grupos controle e fluazuron. .........................................................................30
Tabela 11. Período parasitário e percentual de recuperação de ninfas ingurgitadas de
Rhipicephalus sanguineus, coletadas de coelhos infestados artificialmente com 200 ninfas
cada. ......................................................................................................................................31
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
Tabela 12. Período, percentual de ecdise e eficácia do fluazuron na inibição da ecdise de
ninfas Rhipicephalus sanguineus coletadas em coelhos infestados artificialmente e mantidas a
27 ºC e 80 ± 10% de UR e escotofase. ....................................................................................31
Tabela 13. Número de ninfas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos controle
e tratado com fluazuron que sofreram alterações na sua morfologia após a alimentação em
coelhos, assim como o qui-quadrado com correção de Yates e o valor de “p”. ........................32
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
SUMÁRIO
1 INTRODUÇÃO .................................................................................................................. 1
2 REVISÃO DE LITERATURA........................................................................................... 2
2.1 Parâmetros Biológicos de Fase Parasitária e Não Parasitária de Rhipicephalus sanguineus 2
2.1.1 No Brasil ........................................................................................................................ 2
2.1.2 Em outros países ............................................................................................................ 3
2.2 Avaliação de Carrapaticidas .............................................................................................. 6
2.3 Embriogênese .................................................................................................................... 7
2.4 Metabolismo de Quitina....................................................................................................10
2.5 Novas Moléculas para o Controle de Artrópodes ..............................................................11
2.5.1 Análogos do hormônio juvenil .......................................................................................12
2.5.2 Inibidores da Síntese de Quitina .....................................................................................13
3 MATERIAL E MÉTODOS...............................................................................................14
3.1 Localização e Condições da Experimentação ....................................................................14
3.2 Origem e Manutenção Ixodídeos.......................................................................................14
3.3 Hospedeiros .....................................................................................................................14
3.4 Delineamento Experimental .............................................................................................14
3.5 Procedimentos ..................................................................................................................15
3.6 Parâmetros Analisados .....................................................................................................17
3.7 Análise Estatística ............................................................................................................18
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO ......................................................................................19
4.1 Etapa Experimental I - Adultos de Rhipicephalus sanguineus Alimentados em Coelhos
Tratados com Fluazuron .........................................................................................................19
4.1.1 Fase parasitária das fêmeas de Rhipicephalus sanguineus ..............................................19
4.1.2 Fase não parasitária de fêmeas de Rhipicephalus sanguineus .........................................19
4.1.3 Embriogênese e eclosão de larvas de Rhipicephalus sanguineus ....................................21
4.1.4 Alterações morfológicas e de comportamento das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus
sanguineus .............................................................................................................................24
4.1.5 Alterações no deslocamento horizontal das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus
sanguineus .............................................................................................................................26
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
4.1.6 Alterações do geotropismo negativo das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus
sanguineus..............................................................................................................................28
4.2. Etapas Experimentais II e III - Larvas de R. sanguineus Alimentadas em Coelhos
Tratados com Fluazuron e Larvas Oriundas de Teleóginas Alimentadas em Coelhos Tratados
com Fluazuron (LOTT) ..........................................................................................................29
4.2.1.Parâmetros biológicos da fase parasitária e não parasitária de Rhipicephalus sanguineus29
4.2.2 Alterações morfológicas em larvas de Rhipicephalus sanguineus...................................30
4.3. Etapa Experimental IV - Ninfas de Rhipicephalus. sanguineus Alimentados em Coelhos
Tratados com Fluazuron..........................................................................................................30
4.3.1 Fase parasitária de ninfas de Rhipicephalus sanguineus .................................................30
4.3.2 Fase não parasitária de ninfas de Rhipicephalus sanguineus ..........................................31
4.3.3 Alterações morfológicas em ninfas de Rhipicephalus sanguineus ..................................32
5 CONCLUSÕES..................................................................................................................33
6 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS .............................................................................34
ANEXOS...............................................................................................................................41
A- Dados da literatura sobre os parâmetros biológicos da fase não parasitária de
Rhipicephalus sanguineus alimentados em coelhos. Valores dos períodos expressos em dias..41
B- Dados da literatura sobre os parâmetros biológicos da fase parasitária de Rhipicephalus
sanguineus alimentados em coelhos. Valores dos períodos expressos em dias. .......................42
C- Definição e fórmulas dos parâmetros biológicos analisados de larvas, de ninfas e de
adultos sob a temperatura de 27 ± 1°C e U.R. de 80 ± 10% e do ciclo parasitário desenvolvido
em coelhos, realizados para os grupos controle e tratado. .......................................................43
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
1
1 INTRODUÇÃO
O carrapato ixodídeo Rhipicephalus sanguineus Latreille, 1806, comumente
conhecido como “carrapato dos canis” ou “carrapato marrom dos cães”, é cosmopolita e
provavelmente a mais prevalente das espécies de ixodídeos em cães. É um ixodídeo
amplamente distribuído nas Américas, Europa, África, Ásia e Austrália. O cão é considerado
o hospedeiro natural de R. sangüineus, mas essa espécie já foi relatada parasitando gatos,
coelhos, camelos, bovinos, cabras, cavalos, ovelhas, morcegos, répteis, pássaros e humanos.
A presença das formas imaturas de R. sanguineus alimentando-se no homem é mais
freqüente do que previamente se supunha.
Espécie de importância médico veterinária, R. sanguineus pode transmitir
patógenos, tais como Babesia canis e Ehrlichia canis para os cães e Richettsia conori para
humanos. Além dos danos causados pela espoliação sanguínea e lesões cutâneas, assim
como o desconforto causado pelo parasitismo, este carrapato quando em infestações maciças
pode causar anemia e anorexia, predispondo seus hospedeiros ao aparecimento de outras
doenças devido a toxinas imunossupressoras presentes em sua saliva, irritação gerando
alterações metabólicas e comportamentais, predispondo o cão à formação de miíases e de
abscessos.
Por mais de um século, o controle químico, pelo uso de acaricidas, tem sido a
principal forma de controle dos carrapatos. No entanto, o uso indiscriminado dessas
substâncias tem determinado um grave quadro de resistência, de ordem genética, dos
carrapatos em relação às drogas. Vale destacar que a resistência tem se desenvolvido cada
vez mais rápido, de tal forma que a vida útil dos produtos para determinadas espécies de
carrapatos foi reduzida, em média, para quatro a cinco anos.
Dentre as substâncias químicas até então empregadas, destacam-se os
organofosforados, as amidinas, piretróides, fenilpirazoles e as lactonas macrocíclicas. No
entanto, no mercado, novas substâncias conhecidas como reguladores de crescimento de
artrópodes (AGRs) já estão sendo empregadas no controle de insetos, como Ctenocephalides
felis felis com a vantagem de serem consideradas de baixo impacto ambiental. Têm sido
utilizadas associadas à uma substância adulticida. No entanto, pouco se conhece sobre a
utilização dos AGRs associados ou não com substâncias adulticidas no controle dos
carrapatos, como R. sanguineus e ainda qual impacto determina sobre o ciclo desse ixodídeo.
O mercado conhecido atualmente por “pet” é muito exigente, e dá preferência a
produtos que controlem o carrapato no animal e no ambiente sem conseqüências para os
animais, seu dono, e ainda, de baixa contaminação ambiental. Tais exigências serviram de
motivação para testar o fluazuron, um inibidor da síntese de quitina que é seguro para
mamíferos, visto que essas espécies não possuem receptores para síntese de quitina e ainda
atende a questão do baixo impacto ambiental.
Assim, através da infestação experimental em coelhos tratados com o inibidor do
crescimento de artrópodes fluazuron avaliou-se a biologia das fases parasitária e de vida
livre de R. sanguineus, para verificar se esse AGR pode causar alterações morfológicas,
biológicas e de comportamento em R. sanguineus de maneira a possibilitar seu emprego para
fins de controle.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
2
2 REVISÃO DE LITERATURA
São escassos os trabalhos existentes na literatura a respeito das possíveis alterações
que os produtos empregados no controle de carrapatos possam causar na sua morfologia e
biologia, tal como na embriogênese. A maioria dos trabalhos publicados sobre R. sanguineus
se referem a sua distribuição geográfica (HOOGSTRAAL, 1956; RODRIGUES et al., 2001),
hospedeiros (BECHARA et al., 1995; LABRUNA; PEREIRA, 2001), transmissão de agentes
patogênicos (MASSARD; FONSECA, 2004), controle, na sua grande maioria químico
(BICALHO et al., 2001; SANT’ANNA et al.,2002) e resistência (INOKUMA et al., 1997;
MILLER et al., 2001). A biologia de R. sanguineus tem sido objeto de estudos por vários
autores de diferentes países (SARTOR et al., 1996; BELLATO; DAEMON, 1997; SANTOS
- SILVA; FILIPE, 1998), a maior parte dos estudos envolve o desenvolvimento desse
ixodídeo em diferentes condições térmicas.
2.1 Parâmetros Biológicos de Fase Parasitária e Não Parasitária de Rhipicephalus
sanguineus
2.1.1 No Brasil
Cunha (1978), desenvolveu no estado do Rio de Janeiro, estudos sobre a toxicidade
de Boophilus microplus, Haemophysalis leporis-palustris, Amblyomma cajennense e
Rhipicephalus sanguineus, carrapatos comumente encontrados no Brasil e alguns parâmetros
biológicos foram analisados. Coelhos foram infestados sucessivamente com larvas, ninfas e
adultos de R. sanguineus e mantidos à temperatura ambiente. O período de jejum variou de
23 a 92 dias para larvas, de sete a 56 dias para ninfas e de 42 a 165 dias para adultos, e o
período de alimentação para larvas, ninfas e adultos variou de dois a sete dias, de quatro a
oito e de seis a 19 dias respectivamente. Observou ainda, que as infestações sucessivas com
larvas, ou uma primeira exposição com adultos seguida de exposição com larvas, demonstrou
que os hospedeiros tinham adquirido imunidade, como foi revelado pela baixa produção de
larvas. Contudo, esta imunidade não interferiu no ingurgitamento das ninfas, mas parece ter
aumentado o grau de resistência como foi observado pela morte de todas as ninfas.
Coelho (1993) estudou no estado do Rio de Janeiro três gerações de R sanguineus
obtidas a partir de infestações em coelhos sem infestação prévia por ixodídeos e observou
que a média geral do índice de eficiência reprodutiva da primeira geração foi 64,50%, da
segunda 62,83% e da terceira 65,24%. A média geral do índice de eficiência nutricional na
primeira geração foi de 79,22%, na segunda 79,00% e na terceira 77,32. Observou ainda, que
nos primeiros sete dias foram ovipostos 89,54% do total de ovos na primeira geração,
81,33% na segunda e 89,13% na terceira. O autor verificou que a duração do período de pré-
postura foi maior e o percentual de eclosão foi menor para R. sanguineus obtidos de
hospedeiros reinfestados. Constatou, ainda, que o desempenho biológico das fêmeas
provenientes de coelhos foi superior ao das provenientes de cães.
Sartor (1994) desenvolveu uma pesquisa no Rio de Janeiro com o objetivo de estudar
aspectos do ciclo parasitário e não parasitário de larvas e ninfas e do ciclo parasitário de
fêmeas de R. sanguineus em coelhos sem infestação prévia e em coelhos e cães infestados
sucessivamente. Concluiu que em coelhos sem infestação prévia, o ciclo parasitário foi de 17
dias e o não parasitário de 27 dias e em coelhos com sucessivas infestações, o ciclo foi de
aproximadamente 21 dias e o não parasitário de 28 dias. Afirmou ainda que a população
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
3
estudada adaptou-se com sucesso a coelhos, os quais podem ser utilizados como hospedeiros
alternativos, ao contrário do observado para cães e que para manutenção de colônia de R.
sanguineus, o coelho pode ser utilizado por até uma infestação seqüencial por larvas, ninfas e
adultos.
Bellato (1995) estudou no estado do Rio de Janeiro o efeito de três temperaturas de
manutenção da fase não parasitária sobre a duração do período parasitário e percentual de
recuperação de larvas, ninfas e fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus. O autor reportou que à
temperatura de 27º C, ± 1 e umidade relativa de 80 ± 10% verificaram período de muda para
larvas e ninfas de sete a 10 dias e 11 a 13 dias, respectivamente; já os percentuais de ecdise
foram de 80 a 100 para ambas. Os períodos parasitários e percentuais de recuperação de
larvas, ninfas e fêmeas ingurgitadas foram de três a oito dias, 44,8 a 88,4%; quatro a oito
dias, 83,0 a 96,5% e sete a 18 dias, 66,7 a 93,3% respectivamente. Os parâmetros de fase não
parasitária das fêmeas foram os seguintes: peso inicial de 128,5 a 236,0; o período de pré-
postura de dois a quatro dias; período de postura de nove a 18 dias; peso da massa de ovos de
67,4 a 156,0 mg e índice de eficiência reprodutiva 50,9 a 67,6. Os parâmetros biológicos
referentes à incubação dos ovos, período de eclosão e percentual de eclosão foram de 18 a 20
dias; sete a 12 dias e 99,0% respectivamente.
Sartor et al. (1996), realizou estudos com larvas, ninfas e adultos a partir de uma
segunda geração de R. sanguineus mantida em coelhos sob condições controladas em estufa
incubadora tipo B.O.D. regulada a 27 ± 1ºC, umidade relativa superior a 80% e escotofase. O
autor observou período parasitário médio para larvas, ninfas e fêmeas de 3,70; 5,20 e 8,80
dias, respectivamente, enquanto, os percentuais de recuperação dos instares ingurgitados
foram de 48,06; 46,40 e 65%. O peso médio de fêmeas foi de 166,02 mg. Os períodos médios
de pré-ecdise e ecdise foram de 8,40 e 2,40 dias para larvas e 13,80 e 2,40 para ninfas, com
percentuais de ecdise de 92,07 e 97,04%, respectivamente.
Santos - Silva e Filipe (1998) determinaram os períodos decorrentes de cada fase do
ciclo evolutivo de algumas espécies de ixodídeos da fauna nacional entre elas R. sanguineus.
Durante o período não parasitário os ixodídeos foram mantidos a uma temperatura média de
24 ºC, fotoperíodo de 16:00 e 8:00 horas (luz-escuro) e umidade relativa de 80 a 85%. Eles
reportaram para larvas, ninfas e adultos períodos de pré-alimentação de 24, cinco e 12 dias;
período de alimentação de quatro a cinco dias, seis a oito dias e oito dias, respectivamente. O
período de ecdise para larvas foi de 10 a 11 dias e para ninfas foi de 12 dias. O período de
pré-oviposição foi de quatro dias e de oviposição variou entre oito e 10 dias. Os períodos de
pré-eclosão e eclosão das larvas foram de oito e três respectivamente.
2.1.2 Em outros países
Christophers, 1907 (apud NUTTALL, 1915) analisou na Índia os períodos
parasitários e não parasitários de R. sanguineus, alimentados em coelho e cobaias. Observou
que o período de alimentação, para larvas, ninfas e adultos, foi de três a quatro dias, de cinco
dias e de uma semana ou mais, respectivamente. O período de ecdise variou de oito a nove
dias para larvas provenientes de coelhos e nove a dez dias para larvas provenientes de
cobaias, enquanto, para ninfas, este período variou em torno de 15 dias.
Um estudo desenvolvido por Nuttall (1915), em Cambridge nos EUA sobre a biologia
de R. sanguineus em condições de laboratório, utilizou como hospedeiro para larvas cão e
coelho; para ninfas , cão, chacal e ouriço e para adultos, cão e chacal. Os hospedeiros foram
mantidos em diferentes temperaturas. Assim, com larvas, a temperatura variou de 6,5 a 20º C
e com ninfas, de 8 a 18º C. As observações com fêmeas foram insuficientes, segundo o autor,
para se chegar a alguma conclusão, porém à temperatura de 1,5 a 5,0º C, a maioria
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
4
desprendeu-se do hospedeiro no oitavo dia, fato esse também observado em regiões mais
quentes da Índia. Observou que o período de alimentação para larvas em cães variou de três a
oito dias (moda no dia quatro), para ninfas, de três a 11 dias (moda no dia quatro), e para
fêmeas, de sete a 21 dias, enquanto no ouriço, as ninfas permaneceram se alimentando por 10
a 17 dias. O autor concluiu que o período parasitário está mais na dependência do hospedeiro
do que na temperatura de 30 ºC foi de cinco a oito dias as provenientes de cães, de sete dias
as de chacal e de nove dias as de coelho (porém não citou a temperatura) enquanto a ecdise
das ninfas variou de 11 a 12 dias (cão e chacal) também a 30º C. Quanto à sobrevivência em
jejum, observou, para larvas, um período de 53 dias, para ninfas, até, 97 dias e, para adultos,
até 596 dias. O ciclo biológico completou-se em 63 dias.
Feldman-Muhsam (1964) ao realizar um estudo em Jerusalém, Israel, citou que a
susceptibilidade dos hospedeiros de laboratório ao R. sanguineus pode ser medida pelos
seguintes critérios: percentagem de carrapatos que se alimentam ativamente e o local
preferido sobre o hospedeiro; duração da alimentação; percentagem dos que se alimentam e
mudam e a duração do período de pré-ecdise. Ele pesquisou em Jerusalém a capacidade de R.
sanguineus parasitar coelhos, roedores do gênero Meriones e ratos brancos e constatou que a
duração do período de alimentação variou conforme o hospedeiro. Para larvas, este período
foi de cinco a seis dias em coelhos, um a três dias em Meriones e de quatro a cinco dias em
ratos brancos, enquanto que para ninfas o período variou de cinco a seis dias em coelhos,
quatro a oito dias em Meriones e de quatro a seis dias em ratos brancos. O período de pré-
ecdise larval foi em média de 8,8 dias em coelhos 7,9 dias em Meriones e média de 9,9 dias
em ratos brancos, enquanto o período de ecdise ninfal variou de 16,3 a 17,3 dias em ratos
brancos e de 17,8 a 18,3 dias em Meriones. Este período não foi citado para coelhos, mas,
segundo o autor foi menor que dos outros hospedeiros. Ressaltou também que 12 a 98% de
larvas que se alimentaram em ratos brancos ingurgitaram e um percentual de 87,2% e 68%
das larvas alimentadas em coelhos e ratos brancos, respectivamente realizaram a ecdise,
enquanto que um percentual de 91, 37% e de 86, 9% de ninfas alimentadas em ratos brancos
e Meriones realizaram a ecdise. O autor sugeriu que os menores períodos parasitários larval e
ninfal observados em roedores do gênero Meriones estariam relacionados com o pequeno
número de infestações (no máximo duas vezes), enquanto, em coelhos e ratos brancos, por
terem sido infestados várias vezes, os períodos prolongaram-se, relacionando este fato à
possível resposta imunológica do hospedeiro.
Srivastava e Varma (1964), utilizando R. sanguineus oriundos de cães, verificaram a
biologia deste ixodídeo por quatro gerações, em Madras. Utilizaram ratos, cobaios e coelhos
como hospedeiro para larvas, de quatro a sete dias de idade e para ninfas, com uma semana
de idade. Os adultos se alimentaram somente em coelhos. Todos os estágios, na fase não
parasitária, ficaram em temperaturas de 25 ºC e 29 ºC e umidade relativa de 80%. O período
de alimentação das larvas variou de dois a seis dias. Ninfas alimentadas em cobaios tiveram
um período de alimentação de quatro a oito dias, enquanto que em coelhos este período foi
de quatro a 10 dias. Fêmeas alimentadas em coelhos tiveram um período parasitário de sete a
15 dias. Os períodos de ecdise variaram conforme a temperatura. Assim, para larvas mantidas
a 25 ºC, o período médio de muda foi de 12,9 dias enquanto a 29º C foi em média 7,8 dias.
Para as ninfas, a 25º C, foi em média 17,7 dias e, a 29º C em média 11,7 dias. Concluíram
então, para larvas, que a variação do período de ingurgitamento estava relacionado com a
idade, e que as larvas com menos de sete dias não e fixaram no rato. Com respeito às ninfas,
relataram que elas tiveram um melhor desempenho quando alimentadas em coelhos, pois
70% ou mais ingurgitaram e realizaram muda para adulto, do que quando alimentadas em
cobaios, onde 50% ingurgitaram, e destes, só 46 a 54% mudaram para adulto. Os autores
afirmaram que a fase não parasitária parece sofrer influência dos hospedeiros, pois 46 a 54%
das ninfas alimentadas em cobaias mudaram para adultos, já em coelhos nem todas.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
5
Nagar (1968), a partir de fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus em coelhos e
mantidas em temperatura de 25 ± 5 ºC e umidade relativa de 80%, constatou que a
percentagem média de perda de peso durante o período de pré-oviposição foi de 8 ± 3,5%. As
fêmeas perderam 74,55 ± 3,9% do peso inicial durante o curso de oviposição. O autor
enfatizou que o potencial de postura dos carrapatos está diretamente relacionado com sua
capacidade de ingestão de sangue, também, afirmou que os nutrientes ingeridos são
utilizados para produção do material dos ovos e a taxa a que isto ocorre pode depender do
metabolismo de cada espécie de carrapato, além das variações individuais dentro da mesma
espécie.
Hadani et al. (1969), realizaram um ensaio com larvas e ninfas de R. sanguineus
alimentadas em roedores do gênero Meriones e com adultos em coelhos, porém não citaram a
origem dos ixodídeos. Os diferentes instares foram mantidos em estufas incubadoras a
temperatura de 28º C e 80% de umidade relativa. Consideraram que o período de alimentação
variou de dois a oito, três a sete e de sete a 18 dias para larvas, ninfas e adultos
respectivamente, enquanto o período de ecdise variou de seis a 11 dias para larvas e de 14 a
18 dias para ninfas.
Paul et al. (1970) conduziram em Kanpur na India analises sobre a biologia de R.
sanguineus em uma sala com temperatura e umidade relativa de 27 ± 1º C e 70 ± 5%
respectivamente, utilizando, como hospedeiros coelhos infestados com todos os instares deste
ixodídeo. Verificaram que o período de alimentação para larvas variou de dois a seis dias
(3,8 dias), para ninfas cinco a oito dias (5,3 dias) e de quatro a nove dias para adultos (7,4
dias), e os períodos de pré-ecdise e ecdise larval variam de um a cinco dias (2,3 dias) e de
três a nove dias (5,2 dias) respectivamente, enquanto que os ninfais variaram de seis a oito
dias (4,1 dias) e de sete a vinte dias (12,5 dias). Averiguaram que o peso médio das fêmeas
ingurgitadas variou de 132 a 245 mg.
Nassar et al. (1971) utilizando R. sanguineus provenientes de cães, estudaram por
quatro sucessivas gerações a biologia deste ixodídeo em Alexandria no Egito, em diferentes
combinações de temperatura e de umidade relativa, empregando coelhos como hospedeiro.
Observaram que o período de alimentação para larvas foi precariamente afetado pela
temperatura. À temperatura de 28,3º C e 68,2% de U.R., o período foi de 4,3 ± 0,11 dias e à
temperatura de 24,5º C e 68,2% de U.R., foi de 4,66 ± 0,06 dias, enquanto que os períodos de
pré-ecdise e de ecdise foram amplamente afetados pela temperatura (5,87 ± 0,07 dias a 28,3º
C e 68,2% de U.R. 21,3 ± 0,22 dias a 23,3º C e 60,3% de U.R.). Para ninfas, o efeito da
temperatura na duração do período de alimentação foi semelhante ao que ocorreu com larvas
(4,70 ± 0,13 dias a 28,3º C e 5,90 ± 0,12 dias a 21,7º C e 60,5% de U.R.). A duração dos
períodos de pré-ecdise e de ecdise, contudo, foi comprometida pelas diferentes condições de
laboratório (14,5 ± 0,45 dias a 28,3º C e 68,2% de U.R. e 24,3 ± 0,50 dias a 21,7º C e 60,5%
de U.R.). Para fêmeas, a duração do período de alimentação variou de 11 a 14 dias com
média de 13,3 ± 0,49 dias a 27º C e 72,9% de U.R., ressaltando que estes dados foram
obtidos na quarta geração. Verificaram que o peso médio das fêmeas ingurgitadas foi de
256,9 mg.
Sardey e Rao (1973) realizaram avaliações em Bombay na India sobre o período de
ingurgitamento de R. sanguineus, utilizando filhotes de cães, cobaias e coelhos mantidos a
temperatura de 28 a 32º C e 78 a 82% de U.R., temperatura ambiente. Identificaram que o
período de ingurgitamento das larvas foi de quatro a seis dias, três a quatro dias e dois a sete
dias quando alimentadas em filhotes de cães, cobaias e coelhos respectivamente, este período
para ninfas, variou de quatro a cinco dias, três a cinco dias e de quatro a nove dias para os
mesmos hospedeiros, enquanto para adultos alimentados em filhotes de cão e em coelhos,
este período foi de cinco a nove dias e de sete a 13 dias respectivamente. Concluíram que,
quando a temperatura foi baixa e a umidade alta, o período de sobrevivência aumentou.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
6
Fujisaki et al. (1976) em testes realizados no Japão com R. sanguineus alimentados
em coelhos, à temperatura de 25º C e de umidade relativa elevada, conferiram que a duração
do período de alimentação das larvas, ninfas e adultos variou de quatro a seis dias, cinco a
seis dias e de sete a 14 dias respectivamente e do período de ecdise variou de 13 a 20 dias,
com média de 14 dias para larvas e de 11 a 14 dias para ninfas. Também verificaram que o
peso médio de fêmeas ingurgitadas foi de 162 mg ± 0,87 mg.
Fahmy et al. (1977) ao realizarem um estudo do Egito bafirmaram que os períodos de
alimentação de todos os estágios de desenvolvimento, quando mantidos em temperatura
ambiente, foram menores no verão em relação ao inverno.
Mahadev (1977) realizou estudos sobre biologia de uma cepa de R. sanguineus na
Índia. Para o estudo da fase parasitária, empregou como hospedeiros, coelhos, camundongos
e ratos domésticos para larvas e ninfas enquanto que, para adultos, somente coelhos, Para a
fase não parasitária, utilizou temperatura ambiente de 25 a 30º C e umidade relativa de 90 a
100%. Observou que a duração dos períodos de alimentação e de ecdise para larvas foi de
três a sete dias e de 10 a 13 dias respectivamente. Para ninfas, estes períodos foram de quatro
a cinco dias e de 10 a 17 dias respectivamente, e para fêmeas, o período de alimentação foi
de nove a 16 dias.
Saleh et al. (1978) pesquisaram em Alexandria, no Egito o efeito de diferentes
temperaturas nas fases parasitárias e não parasitárias de R. sanguineus, tendo somente
coelhos como hospedeiro. Consideraram que para larvas, o período médio de ingurgitamento
foi de 2,0 dias a 29º C e o de ecdise 6,6 dias a 34º C. Para ninfas, o período de
ingurgitamento foi em média de 3,0 dias a 29º C e o período de ecdise a 29º C foi em média
de 18,6 dias. Com relação aos adultos, o período de ingurgitamento foi em média de 8,2 dias
a 34 ± 1º C.
Hafez e Bassal (1980) pesquisaram no Egito a oviposição de R. sanguineus
alimentados em coelhos, com as fêmeas sendo mantidas a 30º C e 75% de U.R. Constataram
que o pico da oviposição ocorreu 1,5 dias após o começo da mesma. Diferentes fêmeas
mostraram um mesmo comportamento na percentagem diária de postura em diferentes
temperaturas, indicando, segundo os autores, que o peso e a quantidade de ovos não afetaram
o ritmo de oviposição.
Koch e Tuck (1986) concluíram, ao trabalhar com várias temperaturas constantes e
combinações destas com umidades constantes, que somente as larvas mantidas em altas
temperaturas, 35º C, e baixa umidade, 35%, retardaram o período de muda e, dentro da
mesma temperatura, altas umidades relativas favoreceram a sobrevivência de ninfas e
adultos. Contudo, os autores sustentaram que a umidade relativa pouco interferiu na duração
do ciclo e a tolerância às condições de alta temperatura e baixa umidade pode ser a razão da
distribuição cosmopolita desse parasita.
Um resumo com os resultados reportados pelos autores supracitados referentes as
fases não parasitária e parasitárias de R. sanguineus alimentados em coelhos encontram-se
nos Anexos A e B respectivamente.
2.2 Avaliação de Carrapaticidas
Fernandes et al. (2006) avaliou a eficácia do Triatox® (Shering) no controle de
fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus. Os carrapatos foram coletados de cães da raça Beagle
mantidos nas dependências do Laboratório de Desenvolvimento de Produtos Parasiticidas,
Departamento de Parasitologia Animal/Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Foram
selecionadas 80 fêmeas livres de alterações morfológicas, lavadas, pesadas e distribuídas de
maneira uniforme, em virtude de seu peso, em quatro grupos: o primeiro grupo foi imerso em
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
7
solução fisiológica por 5 minutos – grupo controle. O segundo grupo foi imerso em solução
preparada contendo a metade da concentração comercial por igual período. O terceiro grupo
foi tratado na dose comercial (250ppm) e o último grupo com o dobro da dose comercial. O
peso médio das teleóginas foi de 2,120; 2,277; 2,050 e 2,034 respectivamente. Ao final do
período de observação, as fêmeas do grupo controle realizaram uma postura média de 1,4 g,
enquanto nos grupos tratados, independente da concentração, não realizaram postura.
Concluiu-se que o Amitraz® nas diferentes dosagens foi eficaz no controle de R. sanguineus,
inibindo a postura das fêmeas tratadas.
Melo et al., (2006) determinaram a eficácia do etoxazole em uma formulação “strip-
on” 17% no controle de R. sanguineus em coelhos nas dependências da Universidade Federal
Rural do Rio de Janeiro. O etoxazole é um inseticida e acaricida empregado na agricultura
membro da classe dos difenil oxazolinas, atua interferindo na biosíntese de quitina. Foram
utilizados dez coelhos, cinco pertencentes ao grupo tratado, que receberam 17mg de
etoxazole por quilo de peso vivo e os demais como grupo controle, sem tratamento. Quarenta
e oito horas após o tratamento cada coelho foi infestado com 25 casais de R. sanguineus. O
percentual de controle obtido foi de 100%.
2.3 Embriogênese
Não foram encontrados relatos na literatura a respeito da embriogênese relacionada ao
uso de quimioterápicos no controle de carrapatos. A embriogênese já foi estuda sob
diferentes umidades relativas sob condições controladas de laboratório. A grande maioria das
pesquisas foi realizada, tendo a temperatura e as demais fases evolutivas da vida dos
carrapatos como pontos-chave (SANTOS, 1999).
Travassos e Vallejo-Freire (1944) ao estudarem a criação artificial de Amblyomma
cajennense, observaram a presença de uma mancha branca, que anos mais tarde foram
citadas por Dipeolu
(1984) e por Sonenshine (1991) como sendo possivelmente, o depósito
de guanina no saco retal das larvas em formação, sendo caracterizado como ponto de
embrionamento. Travassos e Vallejo-Freire (1944) verificaram que de 30 e 50% UR os ovos
tornavam-se ressecados entre o nono e o décimo dias de incubação, começando a murchar e a
perder as características de ovos viáveis. A partir de então, a estrutura esbranquiçada não
mais era observada. Em 70% UR, embora a mancha esbranquiçada tenha continuado, o que
indicou o desenvolvimento embrionário, a eclosão foi prejudicada, pois somente 9,1% das
larvas eclodiram. A mancha branca mencionada por tais autores são os produtos do processo
metabólico dos embriões, depositados no saco retal juntamente com produtos nitrogenados,
originando o composto nitrogenado chamado guanina (C
5
H
5
ON
5
). A guanina é o produto
final do metabolismo do nitrogênio nos ovos e demais fases evolutivas dos carrapatos. Assim
como em outros aracnídeos, a guanina tem uma solubilidade muito baixa, precipitando ainda
quando em baixas concentrações. Assim, a guanina presente no saco retal e nos túbulos de
Malpighi, é uma suspensão ou uma massa cristalina esbranquiçada, que requer pouca água.
Durante a embriogênese ou qualquer outra fase em que o carrapato não receba água
suficiente do ambiente para suprir sua demanda, a baixa solubilidade da guanina assegura a
sua acumulação progressiva no saco retal e nos túbulos de Malpighi, prevenindo a sua
concentração na hemolinfa, o que é tóxico para o organismo do carrapato. Os cristais de
guanina são brancos e intensamente refringentes sob a luz polarizada (BALASHOV, 1968).
A partir da hidrólise da fração protéica da casca dos ovos de R. sanguineus, Jaskoski
e Butler (1971) determinaram a composição bioquímica da casca. Identificando os amino-
ácidos lisina, arginina, ácido aspártico, serina, glicina, ácido glutâmico, alanina, treonina,
valina, tirosina, isoleucina e leucina.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
8
Dipeolu (1984) avaliou o desenvolvimento embrionário de R. sanguineus e de
Haemaphisalis leachi leachi, a partir de ovos do terceiro dia de postura de fêmeas
ingurgitadas. Utilizou o terceiro dia de postura, pois segundo o autor, o pico de oviposição
estaria entre o terceiro e o quarto dias de postura.
Aeschlimann e Hess
(1984) realizaram estudos sobre os ovos de Ornithodoros
moubata, classificando todas as etapas do desenvolvimento embrionário deste argasídeo, e
afirmaram, que as observações sobre a embriogênese realizada para esta espécie de carrapato,
pode ser representativa para a maioria dos acarinos. O processo de embriogênese em
carrapatos é semelhante àqueles encontrados em outros aracnídeos, especialmente em Aranae
(SONENSHINE, 1991). Seguindo a fertilização, que diferentemente de outros artrópodes é
externa ao corpo da fêmea ingurgitada, inicia-se a fase da clivagem, segmentação e divisão
do futuro embrião. A estrutura da maioria dos ovos dos acarinos é centrolécita, ou seja, o
núcleo central ou zigoto, está rodeado por uma pequena ilha de citoplasma não vitelínico no
meio de uma grande massa de vitelo
(AESCHLIMANN,
1958).
A clivagem é caracterizada por inúmeras divisões do núcleo central, resultando em
vários núcleos menores , que através de seus filiópodos, migram em direção ao periplasma.
Estes pequenos núcleos com seus halos citoplasmáticos formam uma camada mononuclear
ao redor do periplasma, denominada periblástula.
Acredita-se que a membrana vitelínica
assuma papel na formação da membrana das células da periblástula, porém o seu destino
ainda é desconhecido. Alguns nucléolos remanescentes da clivagem do núcleo central ainda
permanecem na blastocele, assumindo provavelmente o papel de vitelófagos. No decorrer do
desenvolvimento, estas estruturas fariam parte da formação do epitélio digestivo durante a
organogênese. Posteriormente a clivagem, inicia-se a gastrulação e a metamerização. A parte
ventral do futuro embrião é caracterizada pelo aparecimento de um disco germinativo, o qual
caracteriza a fase de gastrulação e que dará origem ao telson (porção caudal). Este disco
forma-se a partir de uma agregação de células da periblástula que proliferam na gema como
um corpo em formato de tubo. Este disco, denominado cumulus primitivo, migra para trás,
estabelecendo o eixo de simetria bilateral e é o centro primitivo da produção de células endo-
mesodermais.
Inicia-se então, a formação das camadas endo e mesoderma a partir da
agregação destas células em formato de tubo, e também da camada ectoderma, a partir de
células da periblástula, rodeando a superfície do embrião (AESCHLIMANN; HESS,
1984).
Logo após a formação da gástrula, os metâmeros embrionários aparecem, sendo uma
característica geral do plano dos aracnídeos (SONENSHINE, 1991). A metamerização inicia-
se após o aparecimento dos três primeiros metâmeros (AESCHLIMANN; HESS,
1984).
Na
porção anterior, os metâmeros dão origem ao acron, aos pedipalpos, as quelíceras e as patas.
Na porção posterior, a banda germinativa divide-se em cinco segmentos opistosomais, além
de um telson terminal. O telson é meramente um disco, cuja função é agir como zona de
crescimento para segmentos opistosomais.
Segundo Aeschlimann e Hess
(1984), há a separação
da banda germinativa em
Ornithodorus moubata em duas partes bilaterais, bem delimitadas através de um sulco
neural. Os gânglios nervosos também se formam neste momento, ganhando um arranjo ao
longo do eixo Antero-posterior, dentro do sulco neural. Os gânglios são: cerebral, queliceral,
pedipalpo, patas e abdominais. De acordo com Woolley (1988), ocorre também a formação
de uma área ventricular a partir da banda germinativa, no qual será a região de formação do
coração. O passo seguinte da embriogênse segundo,
seria a blastoquinese, que semelhante a
outros animais, ocorre a partir da contração da banda germinativa ao longo de seu próprio
eixo, eliminando assim, o sulco ventral. Isso faz com que o gânglio ventral, já formado
previamente, contraia-se e forme um único singânglio que será o sistema nervoso central do
artrópode, localizado antero-ventralmente. Ocorre, concomitantemente, uma forte contração
do embrião, acompanhada por fortes pulsações. A blastoquinese gradualmente elimina a
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
9
metamerização elementar expressa anteriormente. Logo, à medida que o desenvolvimento é
completado, as quelíceras, os pedipalpos e os três primeiros pares de patas surgem e crescem
em direção a linha média ventral. O quarto par de patas também aparece, entretanto, como
simples botões que involuem a medida que se aproxima o momento da eclosão. O
gnatossoma diferencia-se a partir do acron e do estomódeo, através de projeções e rotações
das quelíceras e dos palpos. Acredita-se que o hipostômio surja a partir da combinação e
fusão dos dois lábios do estomódeo. Posteriormente, o proctódeo invagina em direção ao
telson, diferenciando-se em uma estrutura denominada saco retal que servirá para o acúmulo
dos metabólitos excretados pelo embrião (SONENSHINE, 1991). Segue-se a evaginação do
saco retal, dando origem aos túbulos de Malpighi. Estas duas estruturas são funcionais no
embrião, já que gradualmente se completam com cristais de guanina, caracterizando o ponto
de embrionamento, o qual
pode ser visto a microscopia óptica ou até mesmo a olho
desarmado, como uma massa esbranquiçada (DIPEOLU, 1984; SONENSHINE, 1991).
Ao estudarem as camadas da casca dos ovos dos carrapatos,
Lees e Beament (1948),
verificaram que os ovócitos secundários dos ixodídeos recebem uma primeira camada
lipídica incompleta, durante a sua passagem através do vestíbulo da vagina ou através das
secreções das glândulas do lobo acessório. De acordo com estes autores e Dipeolu
(1984),
existem ainda três camadas distintas nos ovos recém depositados: a membrana interna da
casca, uma camada incompleta de grânulos com propriedades redutoras e a camada mais
externa com uma cobertura de cera que é aplicada através do órgão de Gené. Existiria ainda,
segundo os autores, a formação de uma quarta camada mais interna (membrana interna) que
é secretada pelo embrião após o ovo ter sido incubado por um período de 2 a 3 dias.
Lees e Beament (1948) demonstraram que a eficiência da camada de cera protetora,
conferida pelo órgão de Gené, e que reveste os ovos dos carrapatos, é espécie-específica.
Essa capa lipídica tem real importância sobre a embriogênese e conseqüentemente, sobre a
eclodibilidade larval, pois oferece uma proteção contra a perda de água. Os ovos recém
ovipostos sem o contato subseqüente com o órgão de Gené, são altamente permeáveis à água
e dessecam rapidamente em meio árido. Ao extrair essa capa de cera, utilizando-se solventes
e detergentes, os autores verificaram que os ovos tendem a perder a agregação, tendendo a
rolar, diminuindo a viabilidade e impedindo o desenvolvimento do embrião. Existem
diferenças entre as espécies com relação à permeabilidade, principalmente devido à espessura
da camada de cera. Logo, algumas espécies são mais susceptíveis à dessecação do que outras.
Ainda, os autores mencionam que os ovos dos argasídeos são, em geral, mais resistentes a
dessecação do que os ovos dos ixodídeos.
Lancaster e McMillan (1955) avaliaram os efeitos da umidade relativa sobre
Amblyomma americanum. Em estudos conduzidos em laboratório, verificaram a ocorrência
normal de postura e de eclosão das larvas nas umidades de 73 e 91%, ao passo que as
umidades de 7, 25 e 47% impossibilitam a oviposição. Estes baixos percentuais de umidade
foram considerados deletérios, já que não houve oviposição. Já em 69% UR, a oviposição foi
observada, no entanto não houve eclosão neste percentual. Sonenshine e Tigner (1969)
conduziram estudos sobre a oviposição e a eclodibilidade larval de Dermacentor variabilis e
de Amblyomma americanum em relação ao déficit de umidade, avaliando o grau de
dessecação dos ovos quando estes eram submetidos a diferentes teores de umidade. Além
disso, os autores correlacionaram a viabilidade dos ovos com a exposição a diferentes
percentuais de UR (45, 56, 65, 76, 86 e 95%) e temperatura constante de 27
o
C. A produção
média dos ovos de D. variabilis nas dadas umidades relativas e em temperatura de 27
o
C
variou de 4097 a 6713 (5379 ± 31) ovos, enquanto para A. americanum, a produção de ovos
variou entre 4056 e 8188 (6436 ± 30,3). O pico de oviposição teve seu início no 3
º
dia para
D. variabilis e no 4
º
dia para A. americanum, independendo do percentual de umidade
relativa. Verificaram ainda, que o percentual de eclodibilidade das larvas de D. variabilis foi
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
10
de 94,5% em 95% UR, 82% em 85% UR, 59,2% em 65% UR, 1,1% em 55% UR e em 45%
UR não houve eclosão, apontando então, o efeito de um baixo percentual de umidade relativa
sobre a embriogênese. Para A. americanum, o percentual de eclosão larval em 95% UR foi
84,9%; em 85% UR, 77,5%; em 65% UR, 15,4% e em 55 e 45% UR não foi verificada a
eclosão de larvas. Os autores concluíram que a oviposição não foi influenciada, porém, a
perda de água dos ovos foi proporcional à diminuição da umidade, e que os ovos de D.
variabilis desidratam mais do que os ovos de A. americanum quando submetidos aos mesmos
percentuais de UR.
Buczek (2000) estudou os efeitos de umidade relativa elevada (90%UR) sobre o
desenvolvimento embrionário de Hyalomma marginatum marginatum a uma temperatura de
25 ºC. Sob essas condições, graves distúrbios ocorreram durante a embriogênese. Segundo o
autor, o estresse relacionado à umidade desfavorável atuando durante o processo embrionário
trouxe como conseqüências patogênicas um índice de 18% de mortalidade embrionária, 0.2%
de eclosão de larvas mal-formadas e o desenvolvimento de larvas com anormalidades
morfológicas em 6,9% das larvas. Dentre as alterações decorridas da exposição a umidades
desfavoráveis, temos a dessecação e a quebra dos ovos; o atraso no período de eclosão; larvas
inertes cujas patas não são liberadas das cascas; redução, atrofia ou não formação das
quelíceras e do hipostômio; desenvolvimento de dentes adicionais no hipostômio;
deformações na base do gnatossoma; fusão de coxas e trocânteres; alterações na forma e
tamanho de segmentos das pernas; posição anormal do ânus, dentre outras. Os tipos de
anomalias ocorridos em H. marginatum marginatum mostraram que os embriões durante a
formação do blastoderma, metamerização da banda germinativa e a contração da banda são
os períodos mais susceptíveis a serem afetados pela umidade,
já que a alteração cronológica
na banda germinativa causa as mudanças no material embrionário. Logo, as anomalias
acompanharam alterações na estrutura dos apêndices de locomoção e as alterações no
gnatossoma também apresentaram real importância, já que a fixação no hospedeiro durante a
alimentação pode ficar comprometida.
Carvalho (2005) ao acompanhar o desenvolvimento embrionário de R. sanguineus em diferentes
umidades relativas através do uso de dessecadores mantidos a temperatura ambiente, observou que a 70% UR, o
saco retal esteve presente em 3,91% dos ovos com 10 dias de incubação. Neste tratamento, o saco retal e as
pernas formadas, puderam ser observados em 100% dos ovos a partir dos 20º e 21º dias de incubação, e a
eclosão larval a partir do 22º dia.
2.4 Metabolismo de Quitina
A quitina é um hidrocarboneto importante na composição do exoesqueleto dos
artrópodes e da casca dos ovos dos nematódeos, mas não está presente nos vertebrados. A
quitina está sempre associada a proteínas, formando um complexo, a proporção entre elas
bem como a natureza de interação entre esses dois componentes é de importância para as
propriedades mecânicas da cutícula e da membrana peritrófica (SPINDLER et al., 1990).
A síntese de quitina ocorre durante a embriogênese, ecdise e ingurgitamento de todos
os instares. Ao empregar um regulador de crescimento de artrópodes a potência dos ductos
salivares é comprometida, causando um desequilibrio na hemolinfa (KEMP et al., 1990). O
efeito é tal que as fêmeas de B. microplus que se alimentam em bovinos tratados apresentam
diminuição na postura, que resulta em ovos não viáveis, os carrapatos imaturos morrem, visto
que eles são incapazes de realizar a muda para o próximo instar (BULL et al., 1996).
A degradação da quitina tem uma importante atuação na ecdise periódica dos
artrópodes. Um considerável número de enzimas que degradam quitina, em uma variedade de
artrópodes, especialmente insetos têm sido caracterizadas e classificadas, de acordo com a
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
11
sua atividade enzimática em exo e endoquitinases (SPLINDLER, 1983; KRAMER et al.,
1985; CHEN, 1987;).
As quitinases são alvos no desenvolvimento de um novo agente quimioterápico contra
parasitos ao qual os vertebrados não sejam susceptíveis. São desejáveis que tais compostos
sejam altamente seletivos, eficazes e de baixa toxicidade para os vertebrados e para o meio
ambiente (SPINDLER et al., 1990).
Considerando a ocorrência de quitina e síntese de quitina no reino animal, a pesquisa
“bio-racional” por reguladores de crescimento que interfiram no desenvolvimento dos
parasitos que possuem quitina é praticada.
A degradação e a síntese da quitina são controladas através de hormônios, os
ecdesteróides. Após aplicação de ecdesteróides, a degradação de quitina aumenta, visto que a
síntese de quitina pode aumentar ou diminuir, dependendo da espécie, do tecido e o modo de
aplicação. Ecdesteróides utilizados em altas concentrações podem causar alterações na
formação da cutícula que podem ocasionar efeitos letais durante a próxima muda
(SPLINDLER, 1983 apud SPINDLER et al., 1990; KRAMER et al., 1985; CHEN, 1987).
Mesmo sendo pouco tóxico para vertebrados os ecdesteróides não são comercialmente
usados como inseticidas ou nematodicida por causa do alto custo, da necessidade de altas
concentrações e devido a sua alta solubilidade e rápida degradação, excreção e taxa
metabólica nos animais.
Progressos consideráveis foram conseguidos no controle de vários parasitos
artrópodes com outros compostos inseticidas convencionais (a maioria neurotóxicos),
incluindo inibidores da síntese e degradação de quitina, análogos do hormônio juvenil
Retnankaran (apud SPINDLER et al., 1990) e hormônios da muda Spindler-Barth (apud
SPINDLER et al., 1990); Spindler (apud SPINDLER et al., 1990), assim como os feromônios
Baker (apud SPINDLER et al., 1990); (HANSELL, 1985).
2.5 Novas Moléculas para o Controle de Artrópodes
Para o tratamento e controle de R. sanguineus, existem diversos produtos químicos
que apresentam eficácia comprovada, como é o caso dos organofosforados, as amidinas,
piretróides e os fenilpirazoles (SANT’ANNA et al. 2002). Scott et al. (2002) acrescentam a
esta relação as lactonas macrocíclicas. A maioria das drogas empregadas no controle de
insetos, atuam no sistema nervoso, podendo causar resistência cruzada com outros produtos.
Como conseqüência, chegou-se a drogas mais específicas empregadas principalmente no
controle de artrópodes, que são os reguladores de crescimento dos artrópodes (COOP et al,
2002).
Os reguladores de crescimento representam uma nova categoria que vem sendo
empregada amplamente no controle de ectoparasitos de pequenos animais. Este grupo
químico não apresenta efeito “knockdown”, atua de forma lenta e gradual interferindo no seu
crescimento e desenvolvimento (TAYLOR, 2001). Os AGR’s foram divididos de acordo
com o seu mecanismo de ação em: análogos do hormônio juvenil dos insetos, benzoilfenil
uréias - atuando na inibição da síntese de quitina e inibidores da deposição de quitina,
derivados da triazina e da pirimidina (GRAF, 1993).
As drogas provenientes deste grupo são muito seguras para os mamíferos, pois os
mesmos não apresentam hormônios juvenis e estruturas quitinosas ou ainda, receptores para
estas moléculas (BOWMAN, 2003). Estas moléculas vêm sendo amplamente empregadas no
controle de pulgas em cães e gatos, sendo que sua eficiência em carrapatos permanece muito
discutida (ZENNER et al. 2004).
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
12
Da Glória (1988), realizou um ensaio onde empregou AGR’s no controle de B.
microplus em infestações artificiais em bovinos. Dois compostos codificados mostraram
elevados níveis de atividade. Foram observadas alterações morfológicas em teleóginas
despendidas após o sétimo dia do tratamento, consistindo em redução no tamanho e
abaulamento do corpo dos espécimes. Os compostos causaram redução na eclodibilidade das
larvas, com redução de até 60% três dias pós-tratamento, até o 13º dia o percentual de
eclosão foi zero.
2.5.1 Análogos do hormônio juvenil
Os análogos do hormônio juvenil são absorvidos pela cutícula do inseto e previnem a
ativação de seqüências genéticas que determinam o desenvolvimento de órgãos e tecidos dos
insetos imaturos (SCOTT et al., 2002).
As principais substâncias deste grupamento destinadas ao controle de insetos são:
hidroprene, metoprene, piriproxifen e fenoxycarb (CORREIA, 2003). Estas drogas vêm
sendo empregadas no controle de diversos artrópodes, contudo existem poucos trabalhos na
literatura destacando o emprego destas substâncias no controle de carrapatos, especialmente a
espécie R. sanguineus.
O Piriproxifen é um inibidor de crescimento de insetos que está sendo utilizado para o
combate às pulgas, e que tem diferentes apresentações comerciais (PALMA et al., 1993;
JACOBS et al, 1996; KAWADA; HIRANO, 1996; MEOLA et al., 1996; MAYNARD et al,
2001; BOWMAN, 2003; STANENECK et al, 2003).
O piriproxifen atua nas pulgas, inibindo o desenvolvimento de ovos, larvas e pupas
oriundas de animais medicados (JACOBS et al., 1996). Segundo o mesmo autor, as pulgas
podem absorver o produto tanto por contato direto, bem como através do repasto, quando
ingerem o sangue de animal tratado.
Tell et al. (1996) utilizaram em fêmeas ingurgitadas e em ovos de A. americanum
diferentes doses e períodos de exposições do inibidor de desenvolvimento piriproxifen. O
produto não afetou o número de fêmeas que realizaram a postura e sim, o número de ovos
colocados, que decresceu com o aumento da dose e o tempo de exposição. Verificaram
também que os ovos das fêmeas tratadas apresentavam coloração e aspecto diferentes, evento
este não observado quando o produto foi empregado diretamente nos ovos.
Donahue et al. (1997) empregaram o piriproxifen nas concentrações 4,0; 8,0; 16,0
µg/cm
2
em testes in vitro no tratamento de larvas e ninfas ingurgitadas de A. americanum.
Nas larvas ingurgitadas tratadas foi observada uma diminuição da ecdise de 35,9 a 68,4% e
alteração da defecação pós-ecdise. As ninfas que realizaram muda apresentavam-se com
comportamento letárgico. O efeito do produto foi mínimo ou nenhum na ecdise quando
empregado em ninfas ingurgitadas, entretanto os adultos apresentaram-se letárgicos e com
alteração nos metabólitos. Os autores acreditam que os adultos oriundos de ninfas
ingurgitadas tratadas demonstrariam diminuição na capacidade de fixação, alimentação e
reprodução.
Fernandes (2005) para controle de R. sanguineus empregou um tratamento em cães
com d-fenotrina associado ao piriproxifen, na formulação spray, observando uma eficácia
média de 80,7 % ao longo de 17 dias.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
13
2.5.2 Inibidores da Síntese de Quitina
Os inibidores da síntese de quitina também são conhecidos como inibidores do
desenvolvimento de insetos, atuando no desenvolvimento normal da cutícula e outras
estruturas quitinosas (SCOTT et al., 2002).
Dentre as drogas pertencentes a este grupamento químico, encontram-se o
diflubenzuron, lufenuron, flufenoxuron, triflumuron e fluazuron que vem sendo bastante
empregado no controle de pulgas nos animais domésticos (CORREIA, 2003).
MacDonald (1995) destacou o uso do lufenuron no controle de diversos artrópodes de
importância médico-veterinária, como baratas, moscas, pulgas e carrapatos. A droga deve ser
administrada por via oral, logo após a alimentação, podendo ser mais bem absorvida no trato
digestório, atingindo a corrente sanguínea em poucas horas.
Davis (1999) na Califórnia, ao administrarem o lufenuron oralmente na alimentação
de esquilos, através de ração contendo 15mg de lufenuron, no auxilio do controle de pulgas,
após quatro tratamentos consecutivos, obtiveram uma eficácia de até 96%.
O fluazuron (FZN) foi o primeiro regulador de crescimento a ser registrado para o
controle de carrapatos ixodídeos (BULL et al; 1996) Um efeito secundário deste benzoilfenil-
uréia é a ação nas glândulas salivares das fêmeas de carrapato. O desenvolvimento das
células excretórias é comprometido, causando um desequilíbrio na hemolinfa. O FZN
apresenta alta especificidade, baixas quantidades inibiram a formação de quitina em B.
microplus, possivelmente através da inibição de enzimas específicas no processo de muda
(KEMP et al., 1990). Nos últimos anos o FZN tem sido utilizado na Austrália, África do Sul
e América Latina, no controle estratégico do Boophilus spp.
Foi constatado em literatura que o FZN a 1,5 mg/kg de PV, proporcionou uma
eficácia satisfatória no controle de B. microplus por até 12 semanas, apresentando o
inconveniente de um período residual longo, que foi verificado pela presença de resíduos
deste AGR na carne e no leite dos animais, depois de longo período após o tratamento
(BULL et al, 1996).
Citroni et al. (1999) observaram alta eficácia do FZN no controle de B. microplus de
origem Argentina, quando empregada a dose de 2,5 mg/kg de PV, a persistência foi de
aproximadamente 60 dias.
Slowik et al., (2000) utilizaram ração para o roedor Neotoma fuscipes na Califórnia
contendo 40mg de fluazuron no controle de pulgas e carrapatos, os resultados em dois meses
de experimentação sugeriram que a aplicação de um programa mensal de fornecimento dessa
ração em um pequeno período foi efetivo na redução de pulgas, mas o mesmo não ocorreu
para carrapatos.
O emprego desta molécula, em ensaios recentes, no controle de Ixodes e
Dermacentor, não deram bons resultados (TAYLOR, 2001; ZENNER et al., 2004). Até o
presente momento não foi reportado na literatura o emprego desta molécula no controle de R.
sanguineus.
Kryger et al., (2005) realizaram um estudo para determinar o efeito da associação de
fluazuron 3mg/kg de PV, “pour on” com ivermectina 200µg/kg de PV, solução injetável
utilizada no controle de B. microplus sobre a comunidade de besouros coprófagos na África
do Sul. Os autores não observaram efeito das drogas administradas sobre essa comunidade
durante todo o ano de observação. Estudos desse tipo sustentam a idéia de que o impacto
ecotoxocológico de drogas antiparasitárias dependem de fatores tais como condições
climáticas, intervalos entre os tratamentos e proporção de animais tratados.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
14
3 MATERIAL E MÉTODOS
3.1 Localização e Condições da Experimentação
O trabalho foi realizado nas dependências do Laboratório de Desenvolvimento de
Produtos Parasiticidas (LDPP) e Morfofisiologia de Ácaros (LMA), ambos pertencentes ao
Departamento de Parasitologia Animal do Instituto de Veterinária da Universidade Federal
Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ), localizada no município de Seropédica a latitude 22º44'38"
sul, longitude 43º42'27" oeste e altitude de 26 metros.
As experimentações durante a fase parasitária foram realizadas em condições
ambientais, no período de agosto a novembro de 2006, e da fase não parasitária em condições
controladas de laboratório (27 ± 1 ºC e 80 ± 10% UR, em escotofase).
3.2 Origem e Manutenção Ixodídeos
Os ixodídeos foram provenientes da quinta geração de uma colônia de R. sanguineus
mantida nas dependências do LDPP utilizando coelhos mestiços Oryctologus cuniculus (L.,
1758) como hospedeiros, conforme metodologia proposta por Neitz (1971). Os carrapatos
utilizados nas infestações tinham de 15 a 20 dias de jejum.
3.3 Hospedeiros
Foram utilizados 40 coelhos mestiços (Califórnia X Nova Zelândia), de ambos os
sexos, com idade entre 50 a 70 dias com peso entre 1,0 e 1,5 Kg, adquiridos do Colégio
Técnico da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (CTUR), sem contato prévio com
carrapatos e produtos carrapaticidas. Durante todo o período experimental os animais foram
mantidos em gaiolas recebendo água e ração comercial para coelhos ad libitum.
3.4 Delineamento Experimental
O experimento foi dividido em quatro etapas (I, II, II e IV), sendo que em cada uma
delas utilizados 10 coelhos (4 x 10), divididos em grupos controle e tratado (5 x 5).
Na etapa I (adultos), os coelhos foram infestados com 25 casais/coelho.
Na etapa II (fase de larva) os coelhos foram infestados com larvas de R. sanguineus na
razão de 2300 larvas/coelho.
Na etapa III, os coelhos foram infestados com 2300 larvas oriundas das fêmeas
ingurgitadas recuperadas na etapa I.
Na etapa IV (fase de ninfa), coelhos ninfas na razão de 200 ninfas/coelho.
A dose de fluazuron (FZN) aplicada sob a forma “pour-on” em todas as etapas foi de
10mg/kg de PV.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
15
Grupo Controle
5 X 2300
Morfologia
Grupo Tratado
5 X 2300
Larvas (II)
N= 2300
Grupo Controle
5 X 200
Morfologia
Grupo Tratado
5 X 200
Ninfas (IV)
N= 200
Grupo Controle
5 X 25
Postura
Embriogênese
Larvas
Fêmeas ingurgitadas
Grupo Tratado
5 X 25
Machos e Fêmas (I)
N= 25 casais
Colônia
Rhipicephalus sanguineus
5
ª
Geração
Comportamento
Geotropismo negativo
Dispersão horizontal
Morfologia
Morfologia
Larvas (III)
N = 2300
Infestação
Figura 1. Fluxograma das etapas experimentais para avaliação da morfologia, biologia e
eficácia do regulador de crescimento de artrópodes, fluazuron, sobre Rhipicephalus sanguineus
utilizando-se coelhos mestiços (Califórnia X Nova Zelândia) como hospedeiro experimental.
3.5 Procedimentos
Considerou-se dia zero experimental, quando o tratamento com fluazuron foi realizado,
aplicando-se a dose acima descrita sobre a linha dorsal dos coelhos do grupo tratado.
No dia +1 foi realizado o manejo dos animais para corte das unhas, colocação dos
capuzes de pano, fixados com cola apropriada, seguindo a metodologia proposta por Neitz,
1971. No dia subseqüente os coelhos foram infestados com os exemplares de R. sanguineus,
conforme descrito para cada etapa (Figuras 2).
Figura 2. Cronograma das etapas de preparo dos coelhos, e infestação dos coelhos mestiços
(Califórnia X Nova Zelândia) com Rhipicephalus sanguineus do grupo controle.
Dia +1
Corte das unhas e
colocação de capuz
nos coelhos
Dia +2
Infestação dos
coelhos com
R. sanguineus
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
16
Figura 3. Cronograma das etapas de tratamento com o regulador de crescimento de artrópodes,
fluazuron (FZN), preparo e infestação dos coelhos mestiços (Califórnia X Nova Zelândia) com
Rhipicephalus sanguineus do grupo tratado.
Em todas as etapas foram realizadas observações diárias e os espécimes recuperados
foram avaliados quanto a sua integridade morfológica, quantificados, pesados e mantidos
posteriormente em câmara climatizada tipo B.O.D, em temperatura de 2 ± 1
o
C e umidade
relativa de 80 ± 10% em escotofase.
Para manutenção na câmara, as fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus foram
acondicionadas em placas de Petri descartáveis, enquanto os demais estágios foram alocados
em seringas descartáveis com a extremidade do canhão cortada, onde se utilizou algodão para
vedar as seringas.
As posturas obtidas a partir das fêmeas ingurgitadas recuperadas na etapa I foram
pesadas e alocadas e seringas de 10 ml, para posterior análise dos parâmetros relacionados a
essa etapa.
Para avaliação da produção e da embriogênese, quanto ao grupo controle a cada dia
subseqüente, foi coletada uma alíquota de 10 mg de ovos de cada tratamento até a eclosão da
primeira larva ou até que fosse constatada a inviabilidade dos ovos, através do seu aspecto
escuro e ressecado. Como as posturas do grupo controle foram poucas e espaçdas, as alíquotas
de 10 mg foram coletadas de acordo com a desponibilidade de postura, respeitando-se o dia de
embriogênese para fixação das amostra. As alíquotas diárias foram alocadas em tubos tipo
“Ependorf” e fixadas em álcool 70%. Posteriormente os ovos de R. Sanguineus foram
previamente fixados, clarificados em lactofenol e novamente retornados para o álcool 70%,
para posterior observação em microscópio óptico (CARVALHO, 2005).
Utilizou-se como ponto-chave de observação, a estrutura do saco retal, primeira
estrutura resultante do desenvolvimento embrionário visível à microscopia óptica
(TRAVASSOS; VALLEJO-FREIRE, 1944; DIPEOLU, 1984). Para o exame do saco retal ao
microscopio óptico, os ovos foram montados temporariamente com álcool 70%, em lâmina
escavada coberta por lamínula.
Da geração F
1
das fêmeas dos grupos tratado e controle uma amostra de 50 larvas foi
fixada em álcool 70° GL para posterior exame da morfologia, e 11500 larvas de R. sanguineus
foram utilizadas para infestar coelhos (2300 larvas X 5 coelhos) para avaliar a capacidade de
fixação e alimentação.
Larvas e ninfas recuperadas nas etapas I e II respectivamente, após ecdise, tiveram o
percentual de ecdise determinado e uma amostra com 50 exemplares de cada estágio foi
avaliada quanto ao aspecto morfológico.
A capacidade de dispersão horizontal e vertical de teleóginas dos dois grupos foi
aferida.
Dia +1
Corte das unhas e
colocação de
capuz nos coelhos
Dia 0
Aplicação de
10 mg de FNZ
Dia +2
Infestação dos
coelhos com
R. sanguineus
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
17
3.6 Parâmetros Analisados
Os parâmetros biológicos analisados de larvas, de ninfas e de adultos sob a temperatura
de 27 ± 1°C e U.R. de 80 ± 10% e do ciclo parasitário desenvolvido em coelhos foram
realizados para os grupos controle e tratado levando-se em consideração o peso inicial da
fêmea ingurgitada, o peso da postura, o índice de eficiência reprodutiva, a eficácia na inibição
da ecdise, a eficiência reprodutiva, a eficácia do produto; o período de pré-oviposição, o
período de oviposição, o período de incubação dos ovos, o período de eclosão, o período
parasitário, o percentual de recuperação, o período de muda, o percentual de ecdise e o
percentual de eclosão. As definições dos parâmetros biológicos analisados, assim como as
fórmilas utilizadas encontram-se disponíveis no Anexo C.
Para avaliar a morfologia das larvas, das ninfas e adultos utilizou-se 10 indivíduos de
cada amostra, totalizando 50 exemplares para cada grupo, o critério adotado foi qualitativo,
apresentar ou não algum tipo de alteração na conformação dos apêndices. O aspecto do
tegumento, como coloração e consistência e formato do idiossoma foram levados em
consideração, assim como a ocorrência ou não de teratogenia.
O comportamento das fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus quanto ao geotropismo
negativo foi avaliado através de um protótipo em madeira composto por assoalho e três paredes
medindo 50 cm de altura, ângulo de 90° e com marcação a cada 5 cm, (Figura 3). As teleóginas
foram liberadas no assoalho e após 60 minutos foi quantificado o número de teleóginas que
atingiram a altura máxima de 50 cm.
Figura 4. Protótipo em madeira composto por assoalho e três paredes medindo 50 cm de
altura, ângulo de 90° e com marcação a cada 5 cm, para avaliar comportamento das fêmeas
ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus quanto ao geotropismo negativo.
Para acompanhamento da dispersão horizontal das fêmeas ingurgitadas, foram feitos
círculos concêntricos com raios de 25, 50, 75 e 100 cm em piso de cerâmica (Figura 4), após
50
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
18
liberação das unidades experimentais no centro do círculo de menor diâmetro o número de
fêmeas ingurgitadas que atingiram o maior raio foi quantificado nos tempos de 10, 15, 20 e 30
minutos através de um cronômetro digital.
Utilizou-se 30 exemplares para ambos os grupos baseado no número máximo de fêmeas
recuperadas no grupo tratado com fluazuron.
Figura 5. Círculos concêntricos com raios de 25, 50, 75 e 100 cm em piso de cerâmica, para
acompanhamento da dispersão horizontal, das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus
sanguineus.
3.7 Análise Estatística
Quando se trabalhou com três tratamentos foi realizada a Análise de Variância
(ANOVA), seguida pelo teste de Tukey quando necessário. O qui-quadrado com correção de
Yates foi empregado para análise morfológica de todos os estágios, deslocamento e
geotropismo das fêmeas ingurgitadas. Para análise dos demais parâmetros os valores brutos
foram transformados em log natural e posteriormente o Teste t foi aplicado. Padronizou-se p <
0,05 para todas as análises. Foi utilizado o programa BioEstat 4.0.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
19
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO
4.1 Etapa Experimental I - Adultos de Rhipicephalus sanguineus Alimentados em
Coelhos Tratados com Fluazuron
4.1.1 Fase parasitária das fêmeas de Rhipicephalus sanguineus
Os parâmetros biológicos da fase parasitária de fêmeas de R, sanguineus podem ser
vistos na Tabela 1.
O período parasitário de fêmeas nos grupos controle e fluazuron não diferiram
estatisticamente. As médias encontradas foram similares aos valores reportados por
Christophers (1907), de sete dias; Srivastava; Varma (1964), sete a 15 dias; Hadani et al.
(1969), sete a 18 dias; Paul et al. (1970), quatro a nove dias; Nassar et al (1971), 11 a 14 dias;
Sardey; Rao (1973), sete a 13 dias; Fujisaki et al. (1976), sete a 14 dias; Mahadev (1977),
nove a 16 dias; Saleh et al. (1978), seis a 19 dias; Sartor (1996), média de 8,8 dias; Bellato
(1995) sete a 18 dias e Santos-Silva; Filipe (1998), que observou 8 dias. Os autores
supracitados trabalharam em condições de temperatura e umidade relativa próximas das
usadas no presente estudo e utilizaram coelhos sem infestações prévias.
As médias do percentual de recuperação das fêmeas ingurgitadas dos grupos controle e
FZN não diferiram estatisticamente entre si. Sartor (1994) relatou um percentual médio de
recuperação de 78,66%, Bellato (1995), observou taxa de recuperação de 82,67%, bem
semelhante ao valor do grupo controle do presente estudo. Ambos os autores encontraram
valores de recuperação superiores ao do grupo tratado.
Tabela 1. Período parasitário e porcentagem de recuperação de fêmeas de Rhipicephalus
sanguineus coletadas de coelhos infestados artificialmente com 25 casais, nos grupos controle
e tratado com fluazuron (FZN).
Grupos
Parâmetros Medidas de Tendência
Central
Controle FZN
Período Parasitário
(dias)
Amplitude de Variação
Média
7 – 11
9
a
7 – 13
10
a
Recuperação (%)
Amplitude de Variação
Média
64,0 - 100
82,40
a
40,0 – 80,0
63,20
a
Médias seguidas de letras iguais não diferem entre si ao nível de 95%.
4.1.2 Fase não parasitária de fêmeas de Rhipicephalus sanguineus
Os parâmetros biológicos da fase não parasitária de fêmeas de R. sanguineus dos
grupos controle e tratado com fluazuron podem ser vistos na Tabela 2.
O peso inicial das fêmeas ingurgitadas em ambos os grupos não apresentou diferença
estatística significativa entre si. As Fêmeas se alimentaram com sucesso nos dois grupos,
atingindo médias de peso semelhantes às encontrados por Fujisaki et al. (1976), que observou
uma média de peso inicial de fêmeas de 162mg.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
20
Houve diferença significativa entre as médias dos períodos de pré-postura, as fêmeas
ingurgitadas do grupo FZN demoram mais para iniciar a postura. Entretanto o período de
postura foi bem próximo entre os dois grupos, não diferindo estatisticamente (Tabela 2).
O peso da massa de ovos variou entre os tratamentos, as médias foram diferentes
estatisticamente. Bellato (1995) observou que o peso da massa de ovos variou de 64 a 156mg,
ao trabalhar com carrapatos de primeira geração, este fato pode justificar a superioridade dessa
média de peso de postura quando comparada a do grupo controle do presente estudo que
utilizou ixodídeos de quinta geração. O grupo FZN apresentou peso da massa de ovos
reduzido, indo ao encontro à Bull et al. (1996) que afirmaram que o efeito do FZN é tal que as
fêmeas de B. microplus que se alimentam no gado tratado, realizam pouca postura.
O índice de eficiência reprodutiva (IER) apresentou médias significativamente
diferentes entre si, a maioria das fêmeas ingurgitadas do grupo FZN não realizaram postura, o
que resultou em um IER baixo. O valor do IER encontrado no grupo controle foi semelhante
aos encontrados por Coelho (1993) e Bellato (1995), de 64,50 e entre 50,90 e 67,60%,
respectivamente. Entretanto o grupo tratado apresentou um IER de 8,2%
A eficácia do fluazuron no controle da reprodução de R. sanguineus foi de 86,07%.
Outros autores também obtiveram sucesso no controle desse ixodídeo ao empregar moléculas
distintas, Fernandes et al. (2006) ao realizar um teste de imersão avaliou a eficácia amitraz no
controle reprodutivo de fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus em concentrações que
variaram de 125 a 500 ppm. O resultado foi de 100% de eficácia do amitraz no controle
reprodutivo de fêmeas ingurgitadas de R. sanguineus para todas as concentrações. Melo et
al., (2006) ao empregar etoxazole em uma formulação “strip-on” 17% em coelhos para
determinar a eficácia do mesmo no controle reprodutivo de teleóginas de R. sanguineus em
coelhos observou uma eficácia de 100%.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
21
Tabela 2. Peso das fêmeas ingurgitadas, períodos de pré-postura e postura, peso da massa de
ovos, índice de eficiência reprodutiva (IER), eficiência reprodutiva (ER) e eficácia do
fluazuron (FZN) na inibição da reprodução de Rhipicephalus sanguineus coletados de coelhos
infestados artificialmente e mantidas a 27 ºC e 80 ± 10% de UR e escotofase.
Grupos Parâmetros Medidas de Tendência
Central
Controle FZN
Peso inicial da fêmea
(mg)
Amplitude Variação
Média
79 – 244
148,34
a
48 – 244
106,2
a
Período de pré-postura
(dias)
Amplitude deVariação
Média
1 -3
1,8
a
2 – 4
3,0
b
Período de postura
(dias)
Amplitude de Variação
Média
8 – 15
11,4
a
8 -12
10
a
Peso da massa de ovos
(mg)
Amplitude de Variação
Média
95 – 114
105,6
a
0 – 17
11
b
IER (%)
Amplitude de Variação
Média
59 – 75
68,40%
a
4 – 13
8,20%
b
ER
Média 1338330,86 186440,68
Eficácia do FZN (%)
-
86,07
Médias seguidas de letras iguais não diferem entre si ao nível de 95%.
4.1.3 Embriogênese e eclosão de larvas de Rhipicephalus sanguineus
Nas tabelas 3 e 4 encontram-se os percentuais de ovos com saco retal nos grupos
controle e fluazuron de acordo com os dias de incubação e o percentual de larvas eclodidas,
respectivamente.
O desenvolvimento do saco retal foi mais tardio no grupo FZN, mas não interferiu, no
desenvolvimento dos ovos. Entretanto é importante ressaltar que embora não tenha sido
observado alterações no desenvolvimento embrionário dos ovos, o FZN mostrou-se eficaz na
inibição do processo de postura, reduzindo consideravelmente o número de ovos postos por
fêmeas ingurgitadas oriundas do grupo tratado. O grupo fluazuron apresentou valores
discrepante no dia +24 o percentual de saco retal dos ovos foi de 56,75 e no dia +25 foi de
100%. O esperado era o percentual de ovos com presença de saco retal aumentar
discretamente como no grupo controle até chegar a 100%, tal resultado do grupo tratado pode
ter sido em função da coleta de ovos para formação das amostras diárias. Como poucas
fêmeas ingurgitadas do grupo fluazuron realizaram postura, as amostras não foi separada em
um mesmo dia como foi realizado para o grupo controle.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
22
Tabela 3. Percentual de ovos de Rhipicephalus sanguineus com saco retal nos grupos
controle e fluazuron de acordo com os dias de incubação.
Percentual de ovos com Saco Retal (%)
Dias de
Incubação
Controle FZN
+1
0 0
+2 0 0
+3
0 0
+4
0 0
+5
0 0
+6
0 0
+7
3,3 0
+8
86,75 0
+9
74,52 50,95
+10
93,49 67,18
+11
87,91 56,62
+12
94,12 72,00
+13 91,85 65,12
+14
91,91 97,77
+15
89,24 87,59
+16
86,74 66,38
+17
89,71 86,71
+18
78,98 62,50
+19
94,38 62,35
+20
99,44 51,05
+21
95,89 57,84
+22 96,91 51,93
+23
100,00 56,75
+24
Larvas 56,75
+25
Larvas 100,00
+26
Larvas Larvas
Tabela 4. Período de embriogênese e percentual de eclosão de larvas de Rhipicephalus
sanguineus nos grupos controle e fluazuron (FZN).
Percentual de Larvas eclodidas (%)
Período de
embriogênese (dias)
Controle FZN
+23
66,22 0
+24
100,00 41,73
+25
100,00 89,93
+26
- 100,00
Período de incubação, período e porcentagem de eclosão de larvas de Rhipicephalus
sanguineus alimentadas em coelhos infestados artificialmente e mantidas a 27 ºC e 80 ± 10%
de UR e escotofase estão presentes na tabela 5.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
23
O período de incubação dos dois grupos não apresentou diferença estatística entre si,
mas valores observados estão dentro dos limites encontrados por outros autores. Mahadev
(1977) observaram período de incubação para R. sanguineus variando entre 18 e 25 dias a 25 -
30ºC e 90 – 100% de UR; Coelho (1993) trabalhando com temperatura de 27 ± 1°C e 80 ±
10% de UR, reportou período de incubação entre 15 e 25 dias. O FZN não interferiu no período
de incubação dos ovos, embora observou-se um retardamento no período de desenvolvimento
embrionário.
O período de eclosão não diferiu entre os grupos, os valores obtidos foram superiores
ao encontrado por Paul et al. (1970) e Sartor (1994), reportaram médias inferiores 5,20 e 2,5
dias respectivamente. Bellato (1995) observou variação semelhante a do presente estudo 7 a 10
dias, com média 8,01.
O percentual de eclosão foi elevado, os grupos não apresentaram diferença estatística
entre si. Sartor (1994) e Bellato (1995) relataram média de percentual de eclosão de 93,36 e
97%, respectivamente, resultados estes semelhantes ao do presente estudo. O regulador de
crescimento de artrópodes fluazuron não interferiu no desenvolvimento embrionário dos ovos
de R. sanguineus não impedindo o elevado percentual de eclosão de larvas no grupo tratado.
Tabela 5. Período de incubação, período e percentagem de eclosão de larvas de Rhipicephalus
sanguineus alimentadas em coelhos infestados artificialmente, grupos controle e tratado com
fluazuron (FZN),e posteriormente mantidas a 27 ºC e 80 ± 10% de UR e escotofase.
Grupos
Parâmetros Medidas de Tendência
Central
Controle FZN
Período de incubação
(dias)
Amplitude de Variação
Média
23 – 24
23,8
a
24 – 26
25,2
a
Período de eclosão
(dias)
Amplitude de Variação
Média
7 – 12
9,5
a
7 – 12
9,5
a
Eclosão
(%)
Amplitude de Variação
Média
95 – 100
94
a
80 – 100
90
a
Médias seguidas de letras iguais não diferem entre si ao nível de 95%.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
24
Figura 6. Microscopia óptica (100x) de ovo de Rhipicephalus sanguineus do grupo controle
com 11 dias de incubação em umidade relativa de 80% e temperatura 27± 1°C, demonstrando
a presença de saco retal (Sr) e túbulos de malpighi (Tm).
4.1.4 Alterações morfológicas e de comportamento das fêmeas ingurgitadas de
Rhipicephalus sanguineus
O número de fêmeas ingurgitadas que sofreram alterações na sua morfologia após a
alimentação, assim como o qui-quadrado com correção de Yates e o valor de “p” dos grupos
controle e fluazuron estão dispostos na tabela 6.
Fêmeas de R. sanguineus ingurgitadas pertencentes ao grupo tratado com FZN
apresentaram tamanho reduzido, formato elíptico, abaulamento do idiossoma, tegumento
friável de modo que rompiam-se com facilidade; em contraposição, no grupo controle não foi
observado nenhum tipo de anomalia em relação a morfologia, coloração e consistência do
tegumento, os sulcos dorsais e ventrais não estavam bem definidos nos espécimes do grupo
FZN (figuras 6 e 7). Houve diferença significativa entre os dois grupos. De acordo com
(KEMP et al., 1990) quando a síntese de quitina é comprometida a potência dos ductos
salivares também é alterada, causando um desequilíbrio na hemolinfa. Tal alteração
morfofisiológica pode estar diretamente correlacionada com as alterações morfológicas
observadas. Da Glória (1988) observou essas mesmas alterações em Boophilus microplus ao
empregar um regulador de crescimento.
A ausência de sulcos dorsais e ventrais do grupo fluazuron pode ter sido devido a mal
formação das apódemas que são invaginações da cutícula que servem de pilares de sustentação
para inserção dos músculos. A presença de uma musculatura sem sustentação pode dificultar
todo um processo de movimentos durante a postura das fêmeas ingurgitadas.
Tm
Sr
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
25
Tabela 6. Número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus que sofreram
alterações na sua morfologia após a alimentação, assim como o qui-quadrado com correção
de Yates e o valor de “p” dos grupos controle e fluazuron.
Número de fêmeas ingurgitadas
Parâmetros
Controle FZN
Com alterações morfológicas
0 50
Sem alterações morfológicas
50 0
Total de fêmeas observadas
50 50
Qui-quadrado corrigido
96,04
Valor de p
< 0,05
Figura 7. Aspecto dorsal de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos
tratado com fluazuron e controle.
Fluazuron Controle
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
26
Figura 7. Aspecto ventral de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos
tratado com fluazuron e controle.
4.1.5 Alterações no deslocamento horizontal das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus
sanguineus
O número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos controle e
fluazuron que atingiram o raio de 100 centímetros em piso de cerâmica nos tempos de 10, 15,
20 e 30 minutos e seus respectivos qui-quadrado com correção de Yates e valor de “p” podem
ser observados na tabela 7.
Nas fêmeas do grupo controle observou-se deslocamento ambulacral normal (figura 8),
onde 29 atingiram o raio de 100 cm em 30 minutos, aquelas do grupo tratado com FZN
somente uma fêmea obteve o mesmo sucesso, a diferença foi significativa entre os grupos. Tal
resultado pode ter sido devido a mal formação das apódemas que não sustentaram a
musculatura, dificultando o deslocamento dos espécimes do grupo tratado com fluazuron. O
formato elíptico das fêmeas ingurgitadas do grupo tratado, também dificultou o equilíbrio das
mesmas, ficando muitas vezes em decúbito dorsal.
Tabela 7. Número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos controle e
fluazuron que atingiram o raio de 100 centímetros em piso de cerâmica em diferentes tomadas
de tempo e seus respectivos qui-quadrado com correção de Yates e valor de “p”.
Número de fêmeas que
atingiram o raio de 100 cm
Tempo (min) Controle FZN Qui-quadrado p
10
19 0 24,96 < 0,05
15
27 0 45,52 < 0,05
20
27 1 41,85 < 0,05
30
29 1 48,60 < 0,05
F
luazuron
Controle
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
27
Figura 8. Dispersão horizontal das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus do
grupo controle.
Figura 9. Dispersão horizontal das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus do
grupo fluazuron.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
28
4.1.6 Alterações do geotropismo negativo das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus
sanguineus
O número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus que atingiram a altura
máxima de 50 cm no tempo de 60 minutos, pode ser observado na tabela 8.
Os exemplares do grupo controle não tiveram dificuldade em escalar a superfície de
madeira, em 60 minutos, 25 fêmeas atingiram a altura máxima de 50 cm, já no grupo tratado
apenas dois espécimes tiveram o mesmo sucesso (figura 9). Os demais exemplares do grupo
FZN ficaram em alturas intermediárias, pois apresentavam dificuldade na escalada, perdiam o
equilíbrio e voltavam à base do protótipo. Em ambos os grupos cinco fêmeas permaneceram no
assoalho. Este resultado pode estar diretamente correlacionado com as alterações no formato
das fêmeas ingurgitadas.
Tabela 8. Número de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus que atingiram a
altura de 50 cm no tempo de 60 minutos.
Númerode fêmeas que
atingiram 50 cm
Parâmetros
Controle FZN
Atingiram em 60 minutos
25 2
Não atingiram 60 minutos
5 28
Total de fêmeas observadas
30 30
Qui-quadrado corrigido
32,59
Valor de p
< 0,05
Figura 10. Dispersão vertical das fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos
grupos tratado com fluazuron e controle.
Fluazuron
Controle
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
29
4.2. Etapas Experimentais II e III - Larvas de R. sanguineus Alimentadas em Coelhos
Tratados com Fluazuron e Larvas Oriundas de Teleóginas Alimentadas em Coelhos
Tratados com Fluazuron (LOTT)
4.2.1.Parâmetros biológicos da fase parasitária e não parasitária de Rhipicephalus
sanguineus
O período e o percentual de ecdise de larvas e eficácia do fluazuron na inibição da
ecdise de larvas coletadas de coelhos infestados artificialmente e mantidas a 27 ºC e 80 ± 10%
de UR e escotofase, dos grupos controle, tratado com FNZ e ainda larvas oriundas de
teleóginas tratadas (LOTT) podem ser observados na tabela 9.
O período de ecdise foi o mesmo para os grupo controle e LOTT, foram semelhantes ao
resultado encontrado por Madhadev (1977), que foi de 10 a 13 dias. Sartor (1994) e Bellato
(1995) encontraram médias menores, 2,30 e 8,01 dias, respectivamente.
Os valores das médias para o percentual de ecdise nos grupos controle e LOTT foram
iguais e semelhante ao observado por Sartor (1994) e Bellato (1995), que foram de 93,36 e
97%, respectivamente. As larvas do grupo FZN não realizaram ecdise, corroborando com
Splindler (1983); Kramer et al. (1985) e Chen (1987) que afirmam que o benzoilfeniluréia,
fluazuron atua nos carrapatos inibindo a sua ecdise. Segundo estes autores, a degradação da
quitina tem um importante papel na muda periódica dos artrópodes.
Bull et al. (1996) afirmaram que o efeito do FZN sobre fêmeas de B. microplus que se
alimentam em gado tratado é significativo de modo que há redução da postura, que resulta em
ovos não viáveis; os carrapatos imaturos morrem, visto que eles foram incapazes de realizar a
muda para o próximo instar.
A eficácia do FZN na inibição da muda de larvas para ninfa foi de 100%, no entanto
sua ação sobre larvas oriundas de fêmeas alimentadas em animais tratados com FNZ foi
praticamente nula, pois foi observado que 98% das larvas mudaram para ninfa.
Tabela 9. Período e percentual de ecdise e eficácia do fluazuron na inibição da ecdise de larvas
de Ranguineus sanguineus coletadas de coelhos infestados artificialmente e mantidas a 27 ºC e
80 ± 10% de UR e escotofase, no grupos controle, tratados com fluazuron e ainda larvas
oriundas de teleóginas tratadas (LOTT).
Grupos
Parâmetros Medidas de
Tendência Central Controle
LOTT FZN
Período de ecdise
(dias)
Amplitude de Variação
Média
11 – 13
11,8
a
11 – 13
12,2
a
0
0
b
Ecdise (%)
Amplitude de Variação
Média
95 – 100
98,0
a
95 – 100
98,0
a
0
0
b
Eficácia (%)
- - 0
a
100
b
Médias seguidas de letras iguais não diferem entre si ao nível de 95%.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
30
4.2.2 Alterações morfológicas em larvas de Rhipicephalus sanguineus
O número de larvas ingurgitadas de R. sanguineus que sofreram alterações na sua
morfologia após a alimentação, assim como o qui-quadrado com correção de Yates e o valor
de “p” dos grupos controle e fluazuron estão presentes na tabela 10.
Todas as larvas após se alimentarem nos coelhos tratados com fluazuron
apresentaram tegumento friável, idiossoma abaulado e comportamento letárgico. Em
nenhum grupo as laravas de R. sanguineus apresentaram teratogenia.
As larvas que eclodiram de todos os três grupos não apresentaram teratogenia.
Tabela 10. Número de larvas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus com alterações na
sua morfologia após a alimentação, assim como o qui-quadrado com correção de Yates e o
valor de “p” dos grupos controle e fluazuron.
Parâmetros Número de larvas ingurgitadas
Controle FZN
Com alterações morfológicas
0 50
Sem alterações morfológicas
50 0
Total de larvas observadas
50 50
Qui-quadrado corrigido
96,04
Valor de p
< 0,05
4.3. Etapa Experimental IV - Ninfas de Rhipicephalus. sanguineus Alimentados em
Coelhos Tratados com Fluazuron
4.3.1 Fase parasitária de ninfas de Rhipicephalus sanguineus
A porcentagem de recuperação e o período parasitário de ninfas de R. sanguineus,
coletadas de coelhos infestados artificialmente com 200 ninfas cada, estão presentes na tabela
11.
O período parasitário de ambos os grupos não diferiram entre si. Os valores
encontrados foram próximos ao encontrado por Bellato (1995), que observou uma média de
4,87 dias.
As médias do percentual de recuperação não apresentaram diferença significativa e
foram inferiores à média encontrada por Bellato (1995) de 91,20%.
O benzoilfeniluréia fluazuron não interferiu na fase parasitária de ninfas, as ninfas se
fixaram e se alimentaram normalmente nos coelhos.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
31
Tabela 11. Período parasitário e percentual de recuperação de ninfas ingurgitadas de
Rhipicephalus sanguineus, coletadas de coelhos infestados artificialmente com 200 ninfas
cada.
Grupos Parâmetros Medidas de Tendência
Central
Controle FZN
Período Parasitário
(dias)
Amplitude de Variação
Média
5
5,0
a
5 – 6
5,6
a
Recuperação
(%)
Amplitude de Variação
Média
42 – 100
77,90
a
64 – 100
83,40
a
Médias seguidas de letras iguais não diferem entre si ao nível de 95%.
4.3.2 Fase não parasitária de ninfas de Rhipicephalus sanguineus
Os dados referentes ao período e percentual de ecdise de ninfas e eficácia do fluazuron
na inibição da ecdise de ninfas coletadas em coelhos infestados artificialmente e mantidas a 27
ºC e 80 ± 10% de UR e escotofase, podem ser observados na tabela 12.
O período de ecdise não diferiu estatisticamente entre os grupos tratado e controle.
Sartor (1994) sob as mesmas condições de UR e temperatura relatou uma média de 3,27 dias,
bem abaixo aos valores encontrados no presente estudo. A média obtida no controle foi similar
à encontrada por Bellato (1995), que foi de 11,73 dias.
Os grupos controle e FNZ apresentaram diferença estatística quanto ao percentual de
ecdise, o FZN não interferiu na ecdise, de apenas 29,20% das ninfas, em média.realizaram
ecdise O valor do percentual de ecdise observado no grupo controle, 96,80 foi ao encontro aos
reportados por Sartor (1994) e Bellato (1995), que foram de 94,99 e 99,0%, respectivamente.
A eficácia do FZN na inibição do processo de muda de ninfa para adulto de R.
sanguineus foi de 69,83%, indicando que este AGR impediu a ecdise de quase 70% das ninfas
alimentadas em coelhos que receberam o tratamento.
Tabela 12. Período, percentual de ecdise e eficácia do fluazuron na inibição da ecdise de
ninfas Rhipicephalus sanguineus coletadas em coelhos infestados artificialmente e mantidas a
27 ºC e 80 ± 10% de UR e escotofase.
Grupos
Parâmetros Medidas de
Tendência Central
Controle FZN
Período de ecdise
(dias)
Amplitude de Variação
Média
11 – 14
12,4
a
13 – 15
14,4
a
Ecdise
(%)
Amplitude de Variação
Média
91 – 99
96,80
a
21 – 49
29,20
b
Eficácia (%)
- - 69,83
Médias seguidas de letras iguais não diferem entre si ao nível de 95%.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
32
4.3.3 Alterações morfológicas em ninfas de Rhipicephalus sanguineus
O número de ninfas ingurgitadas de R. sanguineus que sofreram alterações na sua
morfologia após a alimentação, assim como o qui-quadrado com correção de Yates e o valor
de “p” dos grupos controle e fluazuron podem ser observados na tabela 13.
As ninfas do grupo controle não apresentaram alterações morfológicas. Porém, pode-
se observar que no grupo de ninfas alimentadas em coelhos tratados com FZN todas
apresentavam tegumento friável, idiossoma abaulado e comportamento letárgico (figura 10),
alguns espécimes que realizaram a ecdise apresentavam uma fina película aderida a nova
cutícula, conferindo um aspecto acinzentado aos carrapatos. Fato que pode ser relacionado a
ação do regulador de crescimento no processo da troca de cutículas. Em nenhum dos grupos
houve teratogenia dos espécimes.
Tabela 13. Número de ninfas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos controle
e tratado com fluazuron que sofreram alterações na sua morfologia após a alimentação em
coelhos, assim como o qui-quadrado com correção de Yates e o valor de “p”.
Parâmetros Número de ninfas ingurgitadas
Controle FZN
Com alterações morfológicas
0 50
Sem alterações morfológicas
50 0
Total de ninfas observadas
50 50
Qui-quadrado corrigido
96,04
Valor de p
< 0,05
Figura 11. Ninfas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus dos grupos tratado com
fluazuron (F) e Controle (C), após alimentação em coelhos.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
33
5
5
C
C
O
O
N
N
C
C
L
L
U
U
S
S
Õ
Õ
E
E
S
S
Depreendemos que o fluazuron empregado na dose de 10mg/kg de peso corporal em
coelhos promoveu alterações morfologias, biológicas e comportamentais em R. sanguineus que
indicam a possibilidade de emprego deste AGR no controle desse carrapato, com a
particularidade na redução da taxa de reinfestação.
Entretanto novos estudos necessitam ser realizados visando a eficácia do fluazuron no
controle de R. sanguineus quando empregado em cães. O uso de coelhos foi um teste
preliminar para indicar ou não a atividade do fluazuron sobre o carrapato R. sanguineus.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
34
6 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
AESCHLIMANN, A. Development embryonnaire d`Ornithodoros moubata (Murrary) et
transmission transovarriene de Borrelia duttoni. Acta Tropica, v.15, p.15-64. 1958.
AESCHLIMANN,
A.;
HESS,
E. What is our current knoweledge of acarine embryology?
Acarology VI. Ellis Horwood, Chichester, p. 90-99, 1984.
BALASHOV,
Y. S.
Bloodsucking ticks (Ixodoidea) – Vectors of diseases of man and
animals. Nauka Publishers, Zoological Institute, Leningrad, USSR. p. 376. 1968.
BAKER, T. C. Chemical control of behaviour, 1985. In: SPINDLER, K.D.; SPINDLER-
BARTH, M.; LONDERSHAUSEN, M. chitin metabolism: a target for drugs against parasites.
Parasitology Research, v. 76, p. 283 – 288, 1990.
BECHARA, G. H.; SZABÓ, M. P. J.; FERREIRA, B. R.; GARCIA, M. V. Rhipicephalus
sanguineus Tick in Brazil: feeding and reproductive aspects under laboratorial conditions.
Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v.4, n.2, p.61-66, 1995.
BELLATO, V. Efeitos de diferentes temperaturas no desenvolvimento de Rhipicephalus
sanguineus (LATREILLE, 1806) em condições de laboratório. 59 p. Tese de Doutorado em
Medicina Veterinária, Parasitologia Veterinária, Seropédica: UFRRJ, 1995.
BELLATO, V.; DAEMON, E. Influência da temperatura de manutenção da fase não
parasitária sobre a fase parasitária de Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) (acari:
Ixodidae). Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 6, n. 1, p. 15 – 19, 1997.
BICALHO, K.A.; FERREIRA, F.; BORGES, L.M.F.; RIBEIRO , M.F.B. In vitro evaluation
of the effects of some acaricides on life stages of Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae).
Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 53, n. 5, p. 548 - 552, 2001.
BOWMAN, D. D. Georgis’ Parasitology for veterinarians. 8ª Edição. Elsevier Science
(USA) – 422p., 2003.
BUCZEK, A. Experimental teratogeny in the tick Hyalomma marginatum marginatum
(Acari: Ixodida: Ixodidae): Effect of high humidity on embrionic development. Annals of the
Entomological Society of America, v. 37, n. 6, p. 807-814, 2000.
BULL, M. S.; SWINDALE, S.; DOVEREND, D.; HESS, E. A. Supression of Boophilus
microplus populations withi fluazuron &endash; an acarine growth regulator. Australian
Veterinary Journal, v. 74, p. 468-470, 1996.
CARVALHO, F. E. S. Efeito da umidade relativa na embriogênese de Amblyomma
cajennense, Rhipicephalus sanguineus, Boophilus microplus e Anocentor nitens (Acari:
Ixodidae). Tese de Mestrado em Medicina Veterinária, Parasitologia Veterinária Seropédica:
UFRRJ, 2005.
CHEN, A. C.; Chitin metabolism. Arch Insect Biochemistry Physiol, v. 6, p. 267 – 277, 1987.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
35
CHRISTOFERS, S.R. Piroplasma canis and its life-cycle in the tick. Scientific Memoers by the
Officers of the Medical and Sanitary Departments of the Governmente of India., v. 29, p. 40 -
43. In: Nuttall, G.H.F. 1915. Biology of Ixodidae. Parasitology, v. 7, p.448- 456, 1907.
CITRONI, D.; D‘AGOSTINO, B. I.; MARTINS, S.; SCHMID, H. R.; JUNQUEIRA, P.
Efficacy of fluazuron against infestations with Argentinean B. microplus, 17th International
Conference of the WAAVP, Copenhagen, p. 15 – 19, 1999.
COELHO, C. F. Biologia da fase não parasitária de Rhipicephalus sanguineus (Latreille,
1806) (Acari: Ixodidae) sob condições de laboratório: Aspectos da Oviposição. 52 p. Tese de
Mestrado em Medicina Veterinária, Parasitologia Veterinária Seropédica: UFRRJ, 1993.
COOP, R. L.; TAYLOR, M. A.; JACOBS, D. E. JACKSON, F. Ectoparasites: recent
advances in control. Trends in Parasitology, v. 18, n.2, p.55-56, 2002.
CUNHA, D. W. Estudos da toxicidade de alguns carrapatos comumente encontrados no
Brasil (Acariana: Ixodidae). Tese de Mestrado em Medicina Veterinária, Parasitologia
Veterinária Seropédica: UFRRJ, 1978.
CORREIA, T. R. Eficácia do Inibidor de Crescimento de Insetos Pyriproxyfen Associado ao
Piretróide D-phenotrina no Controle de Ctenocephalides felis felis (BOUCHÉ, 1835)
(SIPHONAPTERA:Pulicidae) em Cães, Gatos e no Ambiente. 52 p. Tese de Mestrado em
Medicina Veterinária, Parasitologia Veterinária Seropédica: UFRRJ, 2003.
DA GLÓRIA, M.A. Estudos preliminares para avaliação do uso de compostos reguladores
de crescimento no controle de Boophilus microplus. Tese de Mestrado em Medicina
Veterinária, Parasitologia Veterinária Seropédica: UFRRJ, 1988.
DAVIS, R.M. Use of orally administered chithin inhibitor (lufenuron) to control flea vectors
of plague on ground squirrels in California. Journal of medical entomology, v. 36, n.5, 1999.
DIPEOLU,
O.O. Studies on ticks of veterinary importance in Nigeria: X. Notes on the biology
of ticks of dogs Rhipicephalus sanguineus and Haemaphisalis leachi leachi. Bulletin of
Animal Health and Production in Africa, v. 32, n. 1, 1984.
DONAHUE, W. A.; TELL, P. D.; STREY, O.F.; MEOLA, R. W. Pyriproxyfen Effects on
Newly Engorged Larvae and Nymphs of the Lone Star Tick (Acari: Ixodidae) Journal of
Medical Entomology, v. 34, n.2, p.206-211, 1997.
FAHMY, M. A. M., MANDUOUR, A. M. , ARAFA, M. S. Certain biological and ecological
observations on Rhipicephalus s. sanguineus (Latreille, 1806) in Assiut Area, Upper Egypt.
Journal of Egypt Society of Parasitology, v. 7, n. 1, p. 25 – 34, 1977.
FELDMAN-MUHSAM, B. Laboratory colonies of Rhipicephalus sanguineus. Bull World
Health Organization, v.31, p. 587 – 589, 1964..
FERNANDES, J. I. Eficácia do piretróide d-fenotrina e do fipronil no controle de
Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) (Acari: Ixodidae) em cães. Tese de Mestrado em
Medicina Veterinária, Parasitologia Veterinária Seropédica: UFRRJ, 2005.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
36
FERNANDES, J. I.; CORREIA, T.R.; MELO, R.M.P.S.; VEROCAI, G. G.; CRUZ, V. P.;
SCOTT, F. B.; RIBEIRO, F. A. Avaliação da eficácia in vitro do amitraz no controle de
fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguíneus (ACARI: IXODIDAE). XIV Congresso
Brasileiro de Parasitologia Veterinária e II Simpósio Latino-Americano de Rickettsioses,
Ribeirão Preto, SP. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 14 supl. 1, p. 224,
2006.
FUJISAKI, C. K.; KITAOKA, S.; MORII, T. Comparative observations on some bionomics
of japonese ixodid ticks under laboratory cultural conditions. National Institute of Animal
Health Quarterly, v. 16, p. 122 – 128, 1976.
GRAF, J.F. 1993. The role of insect growth regulators in arthropod control. Parasitology
Today, v. 9, n. 12, p. 471-474, 1993.
HADANI, A.; CWILICH, R.; RECHAV, Y.; DINUR, Y. Some methods for the breeding of
ticks in the laboratory. Hefuah Veterinary, v.26, n. 3, p. 87 – 100, 1969.
HAFEZ, M.; BASSAL, T. M. The nutrition and ambient temperature effect on the oviposition
ability of Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) (Acari: Ixodidae). Journal of Egypt
Society of Parasitology, v. 10, n. 2, p. 295 – 300, 1980.
HANSELL, M. Ethology, 1985. In: SPINDLER, K.D.; SPINDLER-BARTH, M.;
LONDERSHAUSEN, M. chitin metabolism: a target for drugs against parasites. Parasitology
Research, v. 76, p. 283 – 288, 1990.
HOOGSTRALL, H. African ixodoidea. V.1. Thicks of the Sudan (with special refence t
Equatoria Province and with preliminary reviews of rhe genera Boophilus, Margaropus, and
Hyalomma). Department of the Navy, Bureau of the Medicine and Surgery, Washington,
D.C., 1956. 1101p.
INOKUMA, H.; TAMURA, K., ONISHI, T. Dogs develop resistence to Rhipicephalus
sanguineus. Veterinary Parasitology, v. 68, p. 295 – 297, 1997.
JACOBS, D. E.; HUTCHINSON, M. J.; KRIEGER, K. J.; BARDT, D. A novel approach to
flea control on cats, using pyriproxyfen. The Veterinary Record, v.139, p. 559-561, 1996.
JASKOSKI, B.J.; BUTLER, V.L.
Rhipicephalus sanguineus: Amino Acid Composition of
egg shell. Experimental Parasitology, v. 30, p. 400-406,1971.
KAWADA, H.; HIRANO, M. Insecticidal Effects of the Insect Growth Regulators
Methoprene and Pyriproxyfen on the Cat Flea (Siphonaptera: Pulicidae). Journal of Medical
Entomology, v. 33, n.5, p.819-822, 1996.
KEMP, D. H.; DUNSTER, S.; BINNINGTON, K. C.BIRD, P. E.; NOLAN, J. Mode of action
of CGA 157419 on the cattle tick Boophilus microplus. Bulletin de la Societe de France
Parasitol, v. 8, p. 1048, 1990.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
37
KOCH, H. G.; TUCK, M. D. Molting and survival of the brown dog tick (Acari: Ixodidae)
under different temperatures and humidities. Annual Entomology of the Society of America, v.
79, n. 1, p. 11 – 14, 1986.
KRAMER, K. J.; DZIADIK-TUNER, C.; KOGA, D. Chitin metabolism sect physiology,
biochemistry and pharmacology, vol 3. Pergamon, New York, 1985. p. 75 – 115.
KRYGER, U.; DESCHODT, C.; SCHOLTZ, C. H. Effects of fluazuron and ivermectin
treatment of cattle on the structure of dung beetle communities. Agriculture, ecosystems and
environment, v. 105, 2005.
LABRUNA, M. B.; PEREIRA, M. C. Carrapatos em cães no Brasil. Revista Clínica
Veterinária , ano VI, n. 30, p. 24-32, 2001.
LANCASTER,
J.L.;
MCMILLAN,
H.L. The effects of relative humidity on the lone star tick.
Journal of Economic Entomology, v. 48, n. 3, p. 338-339, 1955.
LEES,
A.D.;
BEAMENT,
J.W.L. An egg-waxing organ in ticks. Quarterly Journal of
Microscopical Science, v. 89, p. 291-333, 1948.
MACDONALD, J.M. 1995. Flea control: an overview of treatment concepts for North
America. Veterinary Dermatology, v. 6 n. 3, p.121-130, 1995.
MAHADEV, P. V. M. Life-cicle, feeding behaviour and ovipositional ability of
Rhipicephalus sanguineus and Rhipicephalus turanicus (Acarina: Ixodidae). Indian Journal of
Acarology, v. 2, p. 12 – 20, 1977.
MAYNARD, L.; HOUFFSCHIMITT, P.; LEBREUX, B. Field efficacy of a 10 per cent
pyriproxyfen spot-on for the prevention of flea infestations on cats. Journal of Small Animal
Practice, v. 42, p.491-494, 2001.
MASSARD, C. L.; FONSECA, A. H. Carrapatos e doenças transmitidas, comuns ao homem e
aos animais. A Hora Veterinária, v. 23, n. 37, p. 15-23, 2004.
MELO, R.M.P.S.; FERNANDES, J. I.; CORREIA, T.R.; RIBEIRO, F. A.; CRUZ, V. P.;
SCOTT, F. B. Eficácia do etoxazole em coelhos no controle de Rhipicephalus sanguineus.
Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v.14 supl. 1 XIV Congresso Brasileiro de
Parasitologia Veterinária e II Simpósio Latino-Americano de Rickettsioses, Ribeirão Preto,
SP, p. 264, 2006.
MEOLA, R.; PULLEN, S. ; MEOLA, S. Toxicity and histopathology of the growth regulator
pyriproxyfen to adults and eggs of the cat flea (Siphonaptera: Pulicidae). Journal of Medical
Entomology, v. 33 n. 4, p.670-679, 1996.
MILLER, R. J.; GEORGE,J. E.; GUERRERO, F.; CARPENTER, L.; WELCH, J. B.
Characterization of acaricide resistence in Rhipicephalus sanguineus (latreille) (Acari:
Ixodidae) collected from the Corozal army veterinary quarantine center Panama. Journal of
Medical Entomology, v. 38, n. 2, p. 298 – 301, 2001.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
38
NAGAR, S. K. On the significance of the duration of the preoviposition and oviposition
periods in ixodid ticks. Acarology, v. 10, n. 4, p. 621 – 629, 1968.
NASSAR, M. S.; HAMMAD, S. M.; EL KOUDARY, A. S. the biology of the brown dog tick
Rhipicephalus sanguineus. Bulletin Societe de la Entomologiqued’ Egypte, p. 55, p. 409 –
418, 1971.
NEITZ, W.O. D.; BOUGHTON, F.; WALTERS, H. S. laboratory Investigations on the life
cycle of Karoo paralysis ticks (Ixodes rubicundus Neummam, 1904). Onderstepoort Journal
of Veterinary Research, v. 38, n. 3, p. 215 – 224, 1971.
NUTTALL, G.H.F.. Biology of Ixodidae. Parasitology, v.7, p.448- 456, 1915.
PALMA, K. C.; MEOLA, S. M.; MEOLA, R. W. Mode of Action of Pyriproxyfen and
Methoprene on Eggs of Ctenocephalides felis (Siphonaptera: Pulicidae). Journal of Medical
Entomology, v.30, n.2, p.421-426, 1993.
PAUL, C. F.; KAPOOR, D.; PERTI, S. L. studies on the life-history and development of
ticks. Labdev Journal of. Science.and Technology, v. 8, n. 2, p. 80 – 83, 1970.
RETNAKARAN, A.; GRANETT, J.; ENNIS, T. J. Insect growth regulators, 1985. In:
SPINDLER, K.D.; SPINDLER-BARTH, M.; LONDERSHAUSEN, M. chitin metabolism: a
target for drugs against parasites. Parasitology Research, v.76, p. 283 – 288, 1990.
RODRIGUES, A. F. S. E.; DAEMON, E.; D’AGOSTINO, M. Investigação sobre alguns
ectoparasitos em cães de rua no município de Juiz de Fora, Minas Gerais. Revista Brasileira
de Parasitologia Veterinária, v. 10, n. 1, p. 13 – 19, 2001.
SALEH, R. S.; EL-GAYAR, F.; SHAZLI, A. Biological studies on Rhipicephalus sanguineus
sanguineus Latr. Alex. Journal of Agriculture Research, v. 26, n.3, p. 653 – 657, 1978.
SANT'ANNA, F.B.; TORRES, F. O.; MARTINS, I. V. F.; CORREIA, T. R.; FERNANDES,
J. I.; FREITAS, I. F.; SCOTT, F. B.; GRISI, L. Eficácia do piretróide sintético alfametrina no
controle de Rhipicephalus sanguineus em cães. Parasitología Latinoamericana, v.57, p.30-
33, 2002.
SANTOS-SILVA, M. M.; FILIPE, A. R. Ciclos biológicos de ixodídeos (Ixodoidea:
Ixodidae) em condições de laboratório. Revista Portuguesa de Ciências Veterinárias, v.93,
n.527, p.143-148, 1998.
SANTOS, A.C.G.
Efeito dos diferentes teores de Umidade Relativa sob condições
controladas de laboratório na fase de vida livre de Boophilus microplus (Canestrini, 1887)
(Acari: Ixodidae). 56p. 1999. Tese (doutorado em Parasitologia Veterinária) – Instituto de
Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, 1999.
SARDEY, M. R.; RAO, S. R. Obsernations on the life-history and bionomics os
Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) under different temperatures and humidites.
Indian Journal of Animal Science, v. 43, n. 9, p. 867 – 869, 1973.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
39
SARTOR, A.A. Aspectos da biologia de Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806)
(Acarina: Ixodidae) em condições de laboratório. 80 p. Tese de Doutorado em Medicina
Veterinária, Parasitologia Veterinária, Seropédica: UFRRJ, 1994.
SARTOR, A.A.; CUNHA, D. W. A.; DAEMON, E. Aspectos da biologia de Rhipicephalus
sanguineus (Latreille, 1806) (Acarina: Ixodidae) em condições de laboratório: fase parasitária
de larvas, ninfas e fêmeas e não parasitária de larvas e ninfas. Revista Brasileira de Medicina
Veterinária, v.18, n. 1, p. 14 – 17, 1996.
SCOTT, F. B.; MARTINS, I. V. F.; SOUZA, C. P.; CORREIA, T. R. Aspectos gerais do
controle da pulga Ctenocephalides felis felis em cães. A Hora Veterinária, ano 21, n. 125,
p.13-18, 2002.
SLOWIK, T. J.; LANE, R. S.; DAVIS, R. M. Field trial of systemically delivered arthropod
development inhibitor (fluazuron) used to control woodrat fleas (Shiphonaptera:
Ceratophyllidae) and ticks (Acari: Ixodidae). Journal of Medical Entomology, v.38, n.1, 2000.
SPINDLER, K.D. Chitin: its synthesis and degradation in arthropods, 1983. In: SPINDLER,
K.D.; SPINDLER-BARTH, M.; LONDERSHAUSEN, M. chitin metabolism: a target for
drugs against parasites. Parasitology Research, v.76, p. 283 – 288, 1990.
SPINDLER-BARTH, M.; SPINDLER, K.D. Antiecdysteroids and receptors, 1987. In:
SPINDLER, K.D.; SPINDLER-BARTH, M.; LONDERSHAUSEN, M. chitin metabolism: a
target for drugs against parasites. Parasitology Research, v.76, p. 283 – 288, 1990.
SPINDLER, K.D.; SPINDLER-BARTH, M.; LONDERSHAUSEN, M. Chitin metabolism: a
target for drugs against parasites. Parasitology Research, v.76, p. 283 – 288, 1990.
SONENSHINE,D.E.; TIGNER, J.
Oviposition and hatching in two species of ticks in relation
to moisture deficit. Annals of the Entomological Society of America, v. 62, n.3, p. 628-640,
1969.
SONENSHINE,D.E
Biology of ticks. Vol. I. Oxford University Press, New York. p. 447,
1991.
SRIVASTAVA,
S.
C.;
VARMA,
M.
G.
R.
The culture of the tick. Rhipicephalus sanguineus
(Latreille) (Ixodidae) in the laboratory. Journal of Medical Entomology, v.1, n. 2, p. 154 –
157, 1964.
STANNECK, D.; LARSEN, K. S.; MENCKE, N. Pyriproxyfen concentration in the coat of
cats and dogs after topical treatment with a 1.0% w/v spot-on formulation. Journal of
Veterinarian Pharmacology and Therapeutics, v.26, p.233-235, 2003.
TAYLOR, M. Recent developments in ectoparasiticidas. The Veterinary Journal v. 161,
p.253-268, 2001.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
40
TEEL, P. D.; DONAHUE, W. A.; STREY, O.F.; MEOLA, R. W. Effects of Pyriproxyfen on
Engorged Females and Newly Oviposited Eggs of the Lone Star Tick (Acari: Ixodidae)
Journal of Medical Entomology, v.33, n.5, p.721-725, 1996.
TRAVASSOS, J.; VALLEJO-FREIRE. A criação artificial de Amblyomma cajennense para o
preparo de vacina contra febre maculosa. Memórias do Instituto Butantan, v. 18, p. 145 – 245,
1944.
ZENNER, L.; DREVON-GAILLOT, E.; MARCY-L’ÉTOILE. Combate químico e controle
dos carrapatos em cães e gatos. A Hora Veterinária, Ano 23, n. 137, p. 63-65, 2004.
WOOLLEY ,T.A. Acarology. Mites and Human Welfare. John Wiley, New York. p. 484,
1988.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
41
Anexo A. Dados da literatura sobre os parâmetros biológicos da fase não parasitária de Rhipicephalus sanguineus alimentados em coelhos.
Valores dos períodos expressos em dias.
Larvas Ninfas Fêmeas Ovos / Larvas Autor Ano Temperatura/U.R.
P.P.E. P.E. (%)
Ecdise
P.P.E. P.E. (%)
Ecdise
P.P.P.
P.P. P.I. (%)
Eclosão
Christophers 1907 - - 8 - 9 - - 15 - - - - -
Nuttall 1915 - - 9 - - - - - - - -
Feldmam-Muhsam 1964 - - 8,80 87,2 - - - - - - -
Srivastava; Varma 1964 25°C/80% - 12,90 - - 17,70 70,00 - - - -
Srivastava; Varma 1964 29°C/80% - 7,80 - - 11,70 70,00 - - - -
Nagar 1968 25 ± 5°C/80% - - - - - - 2 - 5 11 - 19 - -
Hadani et al. 1969 28°C/80% - 11 - - 14 - 18 - - - - -
Nassar et al. 1971 28,3°C/68,2% - 5,87 - - 14,50 - - - - -
Paul et al. 1971 27 ± 1°C/70 ± 5% 2,30 5,20 - 4,10- 12,50 - - - - -
Sardev; Rao 1973 28 - 32°C/78 - 82% - - - - - - - - - -
Fujisaki et al. 1976 25°C/100% - 14,0 - - 11 – 14 - - - - -
Mahadev 1977 25 - 30°C/90 - 100% - 10 - 13 - - 10 - 17 - - - - -
Sartor 1994 27 ± 1°C/80 ± 10% 8,30 2,30 93,36 13,90 3,27 94,99 - - - -
Bellato 1995 27 ± 1°C/80 ± 10% - 7 - 10 80 - 100 - 11 - 13 80 – 100 2 - 4 9 - 18 18 - 20 99,00
Sartor 1996 27 ± 1°C/80% 8,40 2,40 92,07 13,80 2,40 97,04 - - - -
Santos – Silva; Felipe 1998 24°C/80 - 85% - 10 - 11 - - 12 - 4 8 - 10 - -
P.P.E. = Período de pré-muda ou pré ecdise; P.E. = Período de muda ou ecdise; P.P.P. = Período de pré-postura; P.P. = Período de postura; P.I. = Período de incubação.
ANEXOS
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
42
Anexo B. Dados da literatura sobre os parâmetros biológicos da fase parasitária de Rhipicephalus sanguineus alimentados em coelhos. Valores
dos períodos expressos em dias.
Larvas Ninfas Fêmeas
Autor Ano Temperatura/U.R.
Manutenção dos
Hospedeiros
P.P.A. P.A. (%) Rec. P.P.A. P.A. (%) Rec. P.P.A. P.A. (%) Rec. Peso (mg)
Christophers 1907 - - 3 - 4 - - 5 - - 7 - -
Nuttall 1915 - - 9 - - - - - - - -
Feldmam-Muhsam 1964 - - 5 - 6 - - 5 - 6 - - - - -
Srivastava; Varma 1964 Ambiente - 2 - 6 - - 4 - 10 - - 7 - 15 - -
Hadani et al. 1969 28°C/80% - - - - - - 10 - 16 7 - 19 - -
Nassar et al. 1971 28,3°C/68,2% - 4,30 - - 4,70 - - - - -
Paul et al. 1971 27 ± 1°C/70 ± 5% 1,10 3,80 - 2,80 5,30 - 3,80 7 - 40 - 119,00
Sardev; Rao 1973 28 - 32°C/78 - 82% - 2 - 7 - - 4,90 - - 7 – 13 - -
Fujisaki et al. 1976 Junho, julho e agosto - 4 - 6 - - 5 - 6 - - - - -
Mahadev 1977 - 1 -2 3 - 7 - 1 - 2 4 - 5 - - 9 - 16 - -
Cunha 1978 Ambiente - 2 - 7 - - 4,80 - - 6 - 19 - -
Saleh et al. 1978 29 ± 1°C - 2 - - 3 - - 8,2 - -
Sartor 1994 27 ± 1°C/80 ± 10% - 3,56 41,45 - 4,67 64,26 - 9 - 10 78,66 166,02
Bellato 1995 27 ± 1°C/80 ± 10% - 3 - 8 44,8 – 88,4 - 4 - 8 83,0 – 96,5 - 7 - 18 66,7 – 93,3 67,40 – 156,0
Sartor 1996 27 ± 1°C/80% - 3,70 48,06 - 5,20 46,40 - 8,80 65,0 166,02
Santos – Silva; Felipe 1998 24°C/80 - 85% 24 4 - 5 - 5 6 - 8 - 12 8 - -
P.P.A. = Período de pré-alimentação; P.A. = Período de alimentação; (%) Rec. = Percentual de recuperação.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
43
Anexo C. Definição e fórmulas dos parâmetros biológicos analisados de larvas, de ninfas e de
adultos sob a temperatura de 27 ± 1°C e U.R. de 80 ± 10% e do ciclo parasitário desenvolvido
em coelhos, realizados para os grupos controle e tratado.
Eficácia na inibição da ecdise (EIE) = (média de carrapatos que realizaram ecdise no grupo
controle - média de carrapatos que realizaram ecdise no grupo tratado) / (média de carrapatos
que realizaram ecdise no grupo controle) X 100
Eficiência Reprodutiva (ER) = peso da massa de ovos X % de eclosão / peso das teleóginas X
20.000).
Eficácia do produto = (ER do grupo controle – ER do grupo tratado / ER do grupo controle) X
100.
Índice de Eficiência Reprodutiva = Peso das massas de ovos / Peso das fêmeas ingurgitadas X
100.
Período parasitário – compreendido desde a infestação até o desprendimento e coleta dos
instares ingurgitados.
Período de pré-oviposição - compreendido desde a coleta da fêmea ingurgitada até o início da
oviposição.
Período de oviposição - compreendido desde a postura do primeiro até o último ovo.
Período de incubação - compreendido desde o início da postura até o início da eclosão.
Período de eclosão - compreendido entre o surgimento da primeira e da última larva.
Período parasitário - desde a infestação até o desprendimento e coleta dos ínstares
ingurgitados.
Percentual de recuperação - total de ínstares ingurgitados coletados em relação ao total de
indivíduos utilizados nas infestações.
Período de muda - da coleta do instar ingurgitado até o surgimento do próximo instar.
Percentual de ecdise - total de instares que sofreram ecdise em relação ao total recuperado da
fase parasitária.
Percentual de eclosão – percentual estimado de larvas eclodidas em relação ao total de ovos
postos.
Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software
http://www.foxitsoftware.com For evaluation only.
Livros Grátis
( http://www.livrosgratis.com.br )
Milhares de Livros para Download:
Baixar livros de Administração
Baixar livros de Agronomia
Baixar livros de Arquitetura
Baixar livros de Artes
Baixar livros de Astronomia
Baixar livros de Biologia Geral
Baixar livros de Ciência da Computação
Baixar livros de Ciência da Informação
Baixar livros de Ciência Política
Baixar livros de Ciências da Saúde
Baixar livros de Comunicação
Baixar livros do Conselho Nacional de Educação - CNE
Baixar livros de Defesa civil
Baixar livros de Direito
Baixar livros de Direitos humanos
Baixar livros de Economia
Baixar livros de Economia Doméstica
Baixar livros de Educação
Baixar livros de Educação - Trânsito
Baixar livros de Educação Física
Baixar livros de Engenharia Aeroespacial
Baixar livros de Farmácia
Baixar livros de Filosofia
Baixar livros de Física
Baixar livros de Geociências
Baixar livros de Geografia
Baixar livros de História
Baixar livros de Línguas
Baixar livros de Literatura
Baixar livros de Literatura de Cordel
Baixar livros de Literatura Infantil
Baixar livros de Matemática
Baixar livros de Medicina
Baixar livros de Medicina Veterinária
Baixar livros de Meio Ambiente
Baixar livros de Meteorologia
Baixar Monografias e TCC
Baixar livros Multidisciplinar
Baixar livros de Música
Baixar livros de Psicologia
Baixar livros de Química
Baixar livros de Saúde Coletiva
Baixar livros de Serviço Social
Baixar livros de Sociologia
Baixar livros de Teologia
Baixar livros de Trabalho
Baixar livros de Turismo