Descreve ainda que bandas da CMA
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puderam ser visualizadas em células metafásicas em regiões
anteriormente descritas como nucleolares. Já o fluorocromo 4’,-6-diamidinino-2-phenylindole (DAPI)
discrimina regiões heterocromáticas ricas em bases AT e é comumente utilizado associado com um
contrastante negativo como a Actomicina D (AMD).
Espécies de café e do gênero Psilanthus tiveram seu complemento cromossômico caracterizado pelo
uso dos fluorocromos DAPI e CMA
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. PINTO-MAGLIO et al. (2001) obtiveram para a cultivar Bourbon
Vermelho de C. arabica, resultados negativos para o bandamento com DAPI e positivo para CMA
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tendo sido
observadas seis bandas. BARBOSA et al. (2001) caracterizaram três espécies diplóides do gênero Coffea: C.
eugenioides, C. canephora e C. dewevrei, com o uso desses fluorocromos. Em todas as espécies avaliadas não
foram visualizadas bandas positivas nos cromossomos com a utilização do fluorocromo DAPI. No entanto,
com a CMA
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foram observadas quatro bandas em C. eugenioides e seis nas espécies C. canephora e C.
dewevrei. LOMBELLO & PINTO-MAGLIO (2003), estudando a espécie P. ebractoteolatus, não verificaram
bandas com o uso do DAPI, porém visualizaram quatro bandas com a CMA
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.
LOMBELLO & PINTO-MAGLIO (2004a), avaliando as espécies do gênero Psilanthus: P.
bengalensis e P. tranvancorensis e outras duas do gênero Coffea: C. brevipes e C. racemosa, não
visualizaram bandas positivas com o uso do DAPI; já com a CMA
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foram verificadas quatro bandas em P.
tranvancorensis e C. racemosa; e duas bandas em C. brevipes e P. bengalensis. LOMBELLO & PINTO-
MAGLIO (2004b), avaliando as espécies C. humilis, C. kapakata, C. sp. Moloundu e C. stenophylla,
observaram bandas com o DAPI apenas em C. stenophylla, porém estas não foram determinantes quanto a seu
número. Já com a CMA
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, C. kapakata, C. sp. Moloundu e C. stenophylla apresentaram quatro bandas,
enquanto C. humilis apresentou cerca de oito bandas. LOMBELLO & PINTO-MAGLIO (2004c), com a
aplicação da CMA
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, verificaram nas espécies C. salvatrix e C. sessiflora quatro bandas e em C. canephora
cultivar Apoatã, duas bandas. Nenhuma dessas espécies apresentou bandas positivas para o fluorocromo
DAPI. As espécies C. congensis e C. liberica não tiveram resultados positivos com o uso do DAPI, porém
com a CMA
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foram observadas seis bandas em ambas as espécies (PINTO-MAGLIO et al., no prelo).
Diferenças no padrão de bandamento com fluorocromos possibilitam a diferenciação de gêneros,
espécies, populações e até do complemento cromossômico; permitindo a identificação de cromossomos
individuais. Espécies de gêneros como: Citrus, Poncirus (ROOSE et al., 1998), Clivia sp. (RAN et al., 1999),
Nicotiana (NAKAMURA et al., 2001), Passiflora L. (MELO et al., 2001), Manihot (CARVALHO &
GUERRA, 2002), Allium (KIM et al., 2002), Lupinus (HAJDERA et al., 2003), Citrus spp. (YAMAMOTO &
TOMINAGA, 2003; YAMAMOTO & TOMINAGA, 2004), Selaginella (MARCON et al., 2005) e Paspalum
(VAIO et al., 2005), por exemplo, já tiveram seu cariótipo caracterizado pelo uso da CMA
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e/ou DAPI.
2.5.3 AgNOR
O nitrato de prata (AgNO
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) tem afinidade por proteínas nucleoares presentes nos
nucleólos e constrições secundárias de cromossomos que possuem genes de rDNA e, que
podem estar envolvidos na formação da região organizadora do nucléolo (NOR). Com a
utilização do nitrato de prata para o bandamento cromossômico, formam-se bandas em
locais onde se encontram as proteínas nucleolares. As bandas podem ser vistas na prófase
ou até em cromossomos metafásicos indicando a transcrição dessas proteínas no ultimo
ciclo celular (GOODPASTURE & BLOOM, 1975).
Algumas espécies diplóides de café já foram avaliadas quanto ao bandamento com a prata.
PIEROZZI et al. (2003) avaliando sete espécies diplóides de Coffea verificaram a presença de um par de
cromossomos com banda NOR em: C. canephora, C. congensis, C. dewevrei, C. eugenioides e C. liberica
(hoje, C. dewevrei var. liberica); e dois pares para C. stenophylla e C. racemosa. Estes dados confirmam os
resultados de PINTO-MAGLIO & CRUZ, (1987) para os números de cromossomos meióticos associados ao
nucléolo observados nestas mesmas espécies.
PINTO-MAGLIO et al. (no prelo), com o uso da prata, registraram também para as espécies C.
canephora, C. congensis e C. dewevrei var. liberica a presença de apenas duas bandas, ou seja, apenas um par
de cromossomos do complemento haplóide associado a NOR, porém contrastando com os resultados de