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Eliana Mitsue Takeshita
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Eliana Mitsue Takeshita
AVALIAÇÃO IN VITRO DA EFETIVIDADE DE
DENTIFRÍCIOS DE BAIXA CONCENTRAÇÃO DE
FLUORETO SUPLEMENTADOS COM FOSFATO.
Araçatuba – SP
2006
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Eliana Mitsue Takeshita
Eliana Mitsue TakeshitaEliana Mitsue Takeshita
Eliana Mitsue Takeshita
Dissertação apresentada à Faculdade de
Odontologia da Universidade Estadual
Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Campus
de Araçatuba, para obtenção de título de
Mestre em Odontopediatria.
Orientadora: Kikue Takebayashi Sassaki
ARAÇATUBA - SP
2006
AVALIAÇÃO IN VITRO DA EFETIVIDADE DE
DENTIFRÍCIOS DE BAIXA CONCENTRAÇÃO DE
FLUORETO SUPLEMENTADOS COM FOSFATO.
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Catalogação-na-Publicação
Serviço Técnico de Biblioteca e Documentação – FOA / UNESP
Takeshita, Eliana Mitsue
T136a Avaliação in vitro da efetividade de dentifrícios
de baixa concentração de fluoreto e suplementados
com fosfato / Eliana Mitsue Takeshita. -
Araçatuba : [s.n.], 2006
69 f. : il. ; tab.
Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual Paulista,
Faculdade de Odontologia, Araçatuba, 2006
Orientador: Profa. Dra. Kikue Takebayashi Sassaki
1. Dentifrícios 2. Esmalte dentário 3. Cárie dentária 4. Flúor
5. Fosfatos 6. Desmineralização
Black D27
CDD 617.645
4
Dados Curriculares
Eliana Mitsue Takeshita
Nascimento
28.12.1981 – Vitória - ES
Filiação
Milton Teiti Takeshita
Cleusa Mitsuko Nonaka Takeshita
2000/2003
Curso de Graduação em Odontologia pela Universidade
Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho, Unesp –
Campus Araçatuba.
2005/2006
Curso de Pós Graduação em Odontopediatria, nível de
Mestrado, na Faculdade de Odontologia de Araçatuba –
UNESP
Associações
CROSP - Conselho Regional de Odontologia de São
Paulo
SBPqO - Sociedade Brasileira de Pesquisa Odontológica
Dedicatória
DedicatóriaDedicatória
Dedicatória
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DEUS
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Presente em todos os momentos da minha vida, protegendo
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Presente em todos os momentos da minha vida, protegendo-
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-me e guiando
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os meus passos em meu longo caminho rumo a grandes realizações. Devo
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a Ele todos os meus momentos de aleg
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a Ele todos os meus momentos de alegria e sucesso até aqui conquistado.
ria e sucesso até aqui conquistado.ria e sucesso até aqui conquistado.
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Muito Obrigada!
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7
À
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À MINHA FAMÍLIA
MINHA FAMÍLIA MINHA FAMÍLIA
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Por todos os conceitos divididos, ensinados e aprendidos. Pelo apoio e
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confiança em mim depositados em todos os momentos de minha vida. E que a
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distância fez provar a união que
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distância fez provar a união que há entre nós.
há entre nós. há entre nós.
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A
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AOS MEUS PAIS
OS MEUS PAISOS MEUS PAIS
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MILTON E
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CLEUSA
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Pela confiança que possuem em mim. Desde a minha infância até os dias de
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hoje. São exemplos de determinação, dedicação, honestidade, muita felicidade e
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amor. Agradeço por todos os momentos em que estamos jun
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amor. Agradeço por todos os momentos em que estamos juntos e todos os esforços para
tos e todos os esforços para tos e todos os esforços para
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que nunca faltasse nada tanto para mim quanto para meus irmãos, passando
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segurança e tranqüilidade para que nós realizássemos todos os nossos objetivos.
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Não há palavras que expressem meu amor por vocês.
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AOS MEUS IRMÃOS
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WILTON
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WILLIAM
ILLIAMILLIAM
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Pela grande alegria que proporcionam a nossa família. Mesmo com objetivos
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diferentes e em lugares distantes, somos um trio e tanto. Wilton, pela sua
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determinação e exemplo de irmão mais velho, sempre me guiando e protegendo!
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Ajudou
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-me em vários
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me em vários momentos de minha vida. Somos irmãos e amigos de profissão.
momentos de minha vida. Somos irmãos e amigos de profissão. momentos de minha vida. Somos irmãos e amigos de profissão.
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E meu “irmazinho”, William, pela sua determinação, companheirismo e sua
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grande capacidade de agradar a todos com seu carinho e sensibilidade.
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Agradeço por serem meus queridos irmãos.
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“A única amizade que vale é aquela que nasce sem nenhum motivo”
Van Shendel
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À MINHA
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ORIENTADORA
RIENTADORARIENTADORA
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Profª Drª Kikue Takebayashi Sassaki, minha querida orientadora,
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exemplo de docente e pesquisadora. Pelo exemplo de determinação, organização,
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humildade e perseveranç
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humildade e perseverança. Agradeço por todo o esforço que dedicou a esse trabalho, e
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por ter me proporcionado todos esses anos de orientação. Aprendi muito estando ao seu
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lado.
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Agradeço pela amizade, preocupação e compreensão, conversas e risadas que demos
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ao longo da nossa con
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ao longo da nossa convivência.
vivência.vivência.
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Ao Prof
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Dr Alberto Carlos Botazzo Delbem,
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Pelo exemplo de dedicação, experiência e competência. E realiza as pesquisas
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superando todos os grandes desafios. E por ter atendido e compreendido todas as
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dificuldades que tivemos para a realização d
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dificuldades que tivemos para a realização desse trabalho.
esse trabalho.esse trabalho.
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“A primeira fase do saber, é amar os nossos professores”
Erasmo
A
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Agradecimentos
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Especiais
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Aos meus padrinhos
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, Júlio e Setsuko,
Júlio e Setsuko, Júlio e Setsuko,
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Presente em todos os momentos de minha vida. Obrigada pela preocupação e
dedicação que sempre demonstram por mim.
Ao meu namorado, Fabio,
Ao meu namorado, Fabio,Ao meu namorado, Fabio,
Ao meu namorado, Fabio,
Pela compreensão nas fases finais da realização desse trabalho. E, mesmo
longe, passou a segurança que precisava para terminar mais uma grande
conquista.
A aluna Lu
A aluna LuA aluna Lu
A aluna Luciene Pereira de Castro
ciene Pereira de Castrociene Pereira de Castro
ciene Pereira de Castro
,
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Pela ajuda na realização da fase laboratorial, e compreensão diante as
exigências feitas por mim.
“Para cada esforço disciplinado há múltiplas recompensas”
Jim Rohn
À Faculdade de Odontologia de Araçatuba, na pessoa dos professores Dr. Paulo
Roberto Botacin, digníssimo Diretor e Dr. Célio Percinoto, digníssimo Vice-Diretor.
Ao Curso de Pós-Graduação em Odontopediatria da Faculdade de Odontologia de
Araçatuba –UNESP, na pessoa de seu coordenador Prof. Dr. Alberto Carlos Botazzo
Delbem.
Aos docentes da Disciplina de Odontopediatria da Faculdade de Odontologia de
Araçatuba, UNESP, Prof. Dr. Célio Percinoto, Prof. Dr. Robson Federico Cunha,
Profª Dra. Rosângela dos Santos Nery, Profª Dra. Sandra M. H. C. Ávila de
Aguiar, exemplos de dedicação, pela agradável convivência e conhecimentos
transmitidos.
Aos funcionários da Disciplina de Odontopediatria, Maria dos Santos Ferreira
Fernandes e Mario Luis da Silva, pelo auxílio indispensável e momentos de
descontração.
À todos os colegas do curso de Pós-Graduação em Odontopediatria (Mestrado e
Doutorado) da Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, pela
convivência carinhosa.
À todos os amigos de turma de mestrado: Alessandra, Eliana, Janaína, Max
Douglas e Tais, pela convivência.
12
À todos os colegas que fizeram parte do curso de Pós-Graduação em Odontopediatria,
em especial , Daniela e Antônio, pela amizade e toda animação que passaram
durante o curso.
Aos amigos do Laboratório que sempre incentivaram, ajudaram e compreenderam o
esforço na realização desse trabalho, Ana Elisa, Ana Carolina, Karina Mirela,
Marcelle, Márcia, Felipe, Camila, Luciana, Karina.
A Fernanda Lourenção Brighenti por ter me ensinado e aconselhado nos momentos
iniciais da realização deste trabalho.
A Eliana Rodrigues por ter se tornado uma grande amiga e por dividir todos os
momentos durante a pós-graduação.
Ao amigo Kélio Garcia Silva por compartilhar as idas ao frigorífico, pela ajuda e
esforço e a convivência no laboratório.
A amiga Gracieli Prado Elias, por participar de certa forma incentivando e dando
apoio na realização desse trabalho, e por compartilhar na realização de outros
trabalhos.
Aos funcionários da Biblioteca da Faculdade de Odontologia de Araçatuba da
UNESP, Ana Cláudia, Luzia, Ivone, Cláudio, Maria Cláudia, Izamar, Marina
pela atenção e disponibilidade que nos recebem.
13
À Marina, Valéria e Diogo, da Seção de Pós-Graduação da Faculdade de
Odontologia de Araçatuba- UNESP, pelo profissionalismo e atenção sempre
carinhosa.
Aos Demais professores e funcionários da Faculdade de Odontologia de Araçatuba –
UNESP, em especial, Profa Dra Denise Pedrini, Profa Dra Cristina Antonili Silva
E Prof Dra. Adriana Cristina Zavanelli, pelos ensinamentos transmitidos durante
a graduação e pós-graduação.
Ao Departamento de Ciências Básicas, pelo incentivo durante os trabalhos
realizados durante a graduação, em especial, Profa Dra Rita Cássia Dornelles
Menegatti, e os técnicos Gim e Mauro.
Aos amigos que participaram e incentivaram durante a pós-graduação, em
especial, Débora e Michel.
As minhas amigas Sayaka Iwama e Tatiana Corrêa da Silva pela convivência e
apoio na realização dos trabalhos de pesquisa durante a graduação.
Aos amigos que mesmo com a distância continuam sempre meus amigos: Bianca,
Ioninha, lívia, Solange, Marcele, Fernando, Ricardo, Aline, Megumi, e Fran.
14
Ao Frigorífico Friboi, em especial, ao veterinário Henrique Borges, que permitiu a
coleta dos dentes bovinos.
Ao Senhor Mario Ogasawara, da Faculdade de Farmácia de Riberão Preto – USP,
que com seus conhecimentos auxiliou na manipulação dos dentifrícios
experimentais.
À Coordenadoria de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), pela
concessão de recursos que possibilitou a realização deste Curso de Mestrado.
À Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) pelo auxílio
concedido para a realização do trabalho (05/54651-6)
À todos aqueles que, de certa forma, contribuíram para a elaboração e conclusão
deste trabalho,
Minha eterna gratidão...
SUCESSO
SUCESSOSUCESSO
SUCESSO
“Rir muito e com freqüência; ganhar o respeito
de pessoas inteligentes e o afeto das crianças;
merecer a consideração de críticos honestos e
suportar a traição de falsos amigos; apreciar a
beleza, encontrar o melhor nos outros, deixar o
mundo um pouco melhor, seja por uma
saudável criança, um canteiro de jardim ou
uma redimida condição social; saber que ao
menos uma vida respirou mais fácil porque você
viveu...
...Isso é ter tido sucesso”.
Ralph Waldo Emerson
Epígrafe
EpígrafeEpígrafe
Epígrafe
16
SUMÁRIO
RESUMO............................................................................................................18
1 INTRODUÇÃO.............................................................................................. 22
2 PROPOSIÇÃO............................................................................................... 26
3 MATERIAL E MÉTODOS........................................................................... 28
3.1 Delineamento Experimental........................................................ 28
3.2 Formulação e Dosagem de F dos Dentifrícios
Experimentais................................................................................ 28
3.3 Ciclagem de pH (Des>Re)........................................................... .29
3.4 Determinação da microdureza do esmalte............................... 30
3.5 Determinação de F, Ca e P no esmalte e nas soluções............ 30
3.6 Análise Estatística........................................................................ 32
4 RESULTADOS.............................................................................................. 34
5 DISCUSSÃO...................................................................................................41
6 CONCLUSÕES............................................................................................. 46
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS............................................................. 48
ANEXOS.......................................................................................................... 53
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R
E
E
S
S
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M
M
O
O
Resumo
18
RESUMO
TAKESHITA, E. M. Avaliação in vitro da efetividade de dentifrícios de baixa
concentração de fluoreto suplementados com fosfato. Araçatuba, 2006. 69 f.
Dissertação (Mestrado)– Faculdade de Odontologia, Universidade Estadual Paulista,
Araçatuba, 2006.
A redução da concentração de fluoreto (F) nos dentifrícios é importante para a
prevenção da fluorose dental, entretanto, é necessário manter a mesma efetividade
de um dentifrício de mercado (1100 µgF/g). O objetivo do presente trabalho foi
avaliar in vitro se a suplementação com fosfato em dentifrícios com baixa
concentração de F pode proporcionar eficácia semelhante a de um dentifrício padrão
sobre a desmineralização do esmalte de dente bovino, utilizando modelo de ciclagem
de pH. Blocos de esmalte selecionados foram submetidos a repetidas ciclagens de pH
alternadas com tratamento diário com dentifrícios contendo 500 µgF/g e entre 0 e 3%
de trimetafosfato de sódio (TMP); foram utilizados também um dentifrício sem
adição de F e TMP (placebo) e um comercial (Crest
, de 1100 µgF/g). Após as
ciclagens foram determinadas a porcentagem de perda da microdureza de superfície,
perda mineral (∆Z) e conteúdo de F, cálcio (Ca) e fósforo (P) no esmalte. Foram
utilizados testes paramétricos e não paramétricos e análise de correlação de Pearson
para determinar diferenças e relação dose resposta entre os tratamentos. Os
resultados mostraram que a adição de TMP (0,25-3,0%) a dentifrícios sem F causa
uma diminuição na %SMH e na ∆Z, e quando adicionado a um dentifrício de 500
µgF/g o efeito final torna-se comparável a de um dentifrício de 1100 µgF/g.
Observou-se também aumento na concentração de F na camada superficial da lesão
com o aumento da concentração de TMP. Conclui-se que é possível reduzir a
concentração de F a 500 µg/g e se obter uma ação comparável com a de um
dentifrício comercial através da suplementação com fosfato sob a forma de TMP.
Palavras-chave: Dentifrícios. Esmalte dentário. Flúor. Cárie dentária. Fosfato.
Desmineralização.
A
A
B
B
S
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T
T
R
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A
A
C
C
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T
Abstract
20
ABSTRACT
TAKESHITA, E. M. In vitro evaluation of dentifrices with low fluoride content
supplemented with phosphate. Araçatuba, 2006. 69 f. Dissertação (Mestrado)–
Faculdade de Odontologia, Universidade Estadual Paulista, Araçatuba, 2006.
The reduction of fluoride (F) concentration in dentifrices is important to prevent
dental fluorosis, but it is necessary to maintain their effectiveness. The aim of this
study was to evaluate, in vitro, whether the phosphate supplementation of a
dentifrice with low F content would provide a similar effect when compared to a
standard dentifrice. Bovine enamel demineralization in a pH cycling model was
used. Enamel blocks were selected trough surface microhardness (SMH) and were
subjected to a pH cycling during 7 days. The treatment was done twice daily for 1
min with dentifrice containing 500 µgF/g. The sodium trimetaphosphate (TMP)
concentration varied from 0 up to 3%. For the control groups, a dentifrice without F
and P and a “Gold Standard” dentifrice (1100 µgF/g) were used. After the pH
cycling, the percentage change of surface microhardness (%SMH), mineral loss (∆Z)
and the assessment of F, calcium and phosphate in enamel were calculated.
Parametrical and non-parametrical tests and Pearson´s correlation analysis were
used to determine difference (p<0.05) and dose-response relationship between
treatments. The results showed that TMP addition (from 0.25 to 3%) to a dentifrice
without F induces a reduction in %SMH and ∆Z. When this concentration of TMP is
added to a dentifrice with 500 µg F/g the final effect is similar to a dentifrice with
1100 µgF/g (Crest
). Also, the results showed an increase in the F content in lesion
surface layer with the increase of TMP concentration. It is concluded that it is
possible reduce the F content to 500 µgF/g by supplementing with phosphate and
obtain a similar action when compared to a market dentifrice.
Keywords: Dentifrice. Dental enamel. Fluoride. Dental Caries. Phosphate.
Demineralization.
I
I
N
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T
T
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O
O
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O
Introdução
22
1 INTRODUÇÃO
A adição de fluoreto (F) ao dentifrício teve início na década de 60 e, embora a
expansão de seu uso tenha provocado uma diminuição na incidência da cárie
dentária, foi acompanhada por um aumento na fluorose dentária (ten Cate, 2004). A
prevalência de fluorose aumentou em áreas com e sem fluoretação das águas, o que
levantou a hipótese de que outros fatores que não a água de abastecimento eram
responsáveis pela fluorose (Pendrys & Stamm ,1990).
O uso de dentifrícios fluoretados por crianças durante o período de
desenvolvimento dental, do nascimento até os seis anos de idade, tem sido
considerado um fator de risco para a fluorose dentária (Mascarenhas, 2000).
Um dos recursos para redução na ingestão de F pelas crianças seria a
diminuição de sua concentração no dentifrício (Horowitz, 1992) contanto que
mantenha sua efetividade anticariogênica comparável a de um dentifrício padrão de
mercado (1100 µg F/g).
O aumento da eficácia do dentifrício pode ser obtido pela redução do seu pH e
conseqüente aumento na formação de fluoreto de cálcio (Saxegaard & Rolla, 1988;
Ogaard, 2001; Negri & Cury, 2002; Brighenti et al., 2006).
Outro recurso que poderia ser empregado é a suplementação com cálcio e/ou
fosfato, uma vez que o processo da remineralização, embora seja intensificado pelo F,
depende primariamente da presença desses íons na saliva (Schemehorn et al.,
1999a,b). Se uma quantidade suplementar de íons cálcio e fosfato fosse acrescentada
aos íons já presentes na saliva, sem insolubilizar o F, seria possível obter um efeito
aditivo ao do F.
Introdução
23
Dentre os vários sais de fosfato com atividade anticariogênica (Harris et al,
1967; Gonzalez, 1971; Larson et al, 1972; Gonzalez et al, 1973; Ständtler et al, 1996), o
trimetafosfato de sódio (TMP) parece ser o mais ativo (Harris et al., 1966). Estudos
sugerem que o TMP atua reduzindo o processo de desmineralização (Henry &
Navia, 1969), entretanto, seu mecanismo de ação ainda não está completamente
definido.
Trabalhos clínicos utilizando dentifrícios com 3% TMP não associado a
F mostraram uma ligeira redução nos incrementos de cárie quando comparados a um
dentifrício placebo (Ständtler, 1996). Outro, porém, mostrou que a adição de 3% TMP
a um dentifrício de 1500 µgF/g não mostrou diferenças significantes quando
comparado ao mesmo dentifrício sem a suplementação (O´Mullane et al., 1997),
indicando que na presença de altas concentrações de F a suplementação de TMP não
traz aumento na ação anticariogênica . Entretanto, é possível que em um dentifrício
de baixa concentração de F a suplementação possa incrementar seu efeito
anticariogênico.
A formulação de um dentifrício com menor concentração de F suplementado
com cálcio e/ou fosfato deve manter estes íons sob forma ativa; por outro lado, não
foi estabelecida qual concentração desses íons seria adequada para um dentifrício de
baixa concentração de F. Assim, seria interessante determinar qual concentração de
cálcio e fosfato que associada a uma baixa concentração de F promoveria uma ação
anticariogênica semelhante a de um dentifrício padrão de mercado (1100 µg F/g),
sem interferir na ação e estabilidade do F.
Introdução
24
Por outro lado, de acordo com as recomendações mais recentes (ten Cate &
Mundorff-Shrestha, 1995), para atestar a eficácia de dentifrícios já existentes como
também para validar novas formulações é necessário verificar a relação dose-
resposta desses dentifrícios. Um dos modelos utilizados na avaliação desses
produtos é a ciclagem de pH que permite simular o desenvolvimento de cárie sob
condições controladas (White, 1995). Vieira et al. (2005) padronizaram a metodologia
da ciclagem de pH para esmalte bovino e obtiveram relação dose-resposta e,
portanto, esse modelo foi o utilizado no presente trabalho.
P
P
R
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O
O
P
P
O
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Proposição
26
PROPOSIÇÃO
A proposição do presente trabalho foi avaliar in vitro se a suplementação com
fosfato em dentifrícios com baixa concentração de F pode proporcionar eficácia
semelhante a de um dentifrício padrão sobre a desmineralização do esmalte de dente
bovino, utilizando modelo de ciclagem de pH.
Foram analisadas:
• a porcentagem de alteração da microdureza de superfície
• a dureza do esmalte em secção longitudinal e a porcentagem de volume
mineral em diferentes distâncias da superfície do esmalte
• a perda mineral integrada
• a concentração de F, Ca, P presente no esmalte.
M
M
A
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D
D
O
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Material e Método
28
3 MATERIAL E MÉTODO
3.1 Delineamento Experimental
Blocos de esmalte (4x4 mm) foram obtidos de dentes incisivos bovinos
estocados em solução de formol neutro a 2% em temperatura ambiente. As
superfícies de esmalte dos blocos foram seqüencialmente polidas e aqueles com
dureza (baseline) de 330-370 KHN (SMH
1
) foram selecionados e divididos, de acordo
com a média de dureza do total de blocos e seu intervalo de confiança, em grupos
experimentais de 10 espécimes cada (Anexo B e C). Os blocos de esmalte bovino
foram submetidos num período de sete dias, a cinco ciclagens de pH e ao tratamento
duas vezes ao dia com dentifrício. As formulações de dentifrícios tinham
concentrações de F de zero e 500 µg/g e concentrações de TMP de 0 a 3%. Foi
utilizado o dentifrício comercial Crest
(“Gold Standard”- 1100 µg F/g) para fins de
comparação. Após as ciclagens de pH, a microdureza de superfície do esmalte
(SMH
2
) foi novamente medida para cálculo da porcentagem de alteração de dureza
da superfície (%ASMH). Em seguida foi determinada a dureza do esmalte em secção
longitudinal e calculada a porcentagem de volume mineral em diferentes distâncias
da superfície do esmalte seguida da perda mineral integrada (∆Z). Foi determinada a
concentração de F, Ca e P no esmalte e nas soluções após as ciclagens.
3.2 Formulação e Dosagem de F e P dos Dentifrícios Experimentais
Os dentifrícios foram manipulados no laboratório com os seguintes
componentes: dióxido de titânio, carboximetilcelulose, metil-p-hidroxibenzoato de
sódio, sacarina, óleo de menta, glicerina, sílica abrasiva, laurilsulfato de sódio e água.
Material e Método
29
O fluoreto (F) foi acrescido às formulações para obter uma concentração final de 500
µg F/g (na forma de NaF- Merck
®
) e o TMP (Sigma
®
), nas concentrações de 0; 0,1;
0,25; 0,5; 1; 2 e 3%. Foram preparados também um dentifrício sem F e sem TMP
(placebo) e dentifrícios sem adição de F mas com as diferentes concentrações de
TMP. A determinação do flúor total (FT) e do flúor iônico (FI) foi realizada através
do método utilizado por Delbem et al. (2002) (Anexo A). Foi utilizado um eletrodo
específico combinado para íon F (9609 BN – Orion) acoplado ao analisador de íons
(Orion 720 A+), previamente calibrado com cinco padrões (0,125; 0,25; 0,5; 1 e
2µgF/g). O P dos dentifrícios foi determinado de acordo com o método de Fiske &
Subbarow (1925), submetendo-se previamente parte das amostras à hidrólise com
HCl 1 mol L
-1
em banho-fervente durante 1 h (Anexo B).
3.3 Ciclagem de pH (Des>Re)
Os blocos foram submetidos em frascos individuais durante sete dias a cinco
ciclagens de pH, à temperatura de 37ºC, permanecendo os últimos dois dias em
solução remineralizante (Vieira et al., 2005). Os blocos foram imersos sob agitação
constante, duas vezes ao dia durante um minuto, em suspensões de dentifrícios em
água destilada/deionizada (1:3 – peso:peso) quando removidos das soluções
desmineralizante (Des, 6 horas – Ca e P 2,0 mmol L
-1
em tampão acetato 0,075 mol L
-
1
, 0,04 µg F/mL em pH 4,7 – 2,2 mL/mm
2
) e remineralizante (Re, 18 horas – Ca 1,5
mmol L
-1
, P 0,9 mmol L
-1
, KCl 0,15 mol L
-1
em tampão Cacodilato de sódio 0,02 mol L
-
1
, 0,05 µg F/mL em pH 7,0 – 1,1 mL/ mm
2
). Os blocos foram lavados com jatos de
Material e Método
30
água destilada/deionizada por 30 segundos, após serem removidos das soluções Des
ou Re e dentifrício/água.
3.4 Determinação da Microdureza do Esmalte
A microdureza de superfície foi determinada antes (SMH inicial, SMH
1
) e após
as ciclagens de pH (SMH final, SMH
2
) utilizando-se o microdurômetro Shimadzu
HMV-2000, sob carga de 25 gramas por 10 segundos (Anexo E). Foram realizadas
inicialmente cinco impressões a 100 µm uma da outra, na região central do esmalte e
após as ciclagens, outras cinco a 100 µm em relação às impressões iniciais, sendo
calculada a porcentagem de variação de microdureza de superfície (%ASMH),
[%ASMH = ((SMH
2
– SMH
1
)/ SMH
1
) x 100]. Após análise da SMH, secções
longitudinais foram feitas no centro dos blocos e uma das metades incluídas em
resina acrílica e polida. Uma seqüência de oito impressões a distâncias de 10, 30, 50,
70, 90, 110, 220 e 330 µm da superfície externa do esmalte foi realizada na região
central dos blocos e outras duas a 100 µm acima e abaixo, sob carga de 25 gramas por
10 segundos (Anexo F). As médias foram calculadas em cada distância e os valores
convertidos em conteúdo mineral (% vol. min.) (Featherstone et al. ,1983). A área
integrada (%vol. min. x µm) do esmalte hígido (Z
1
) e do esmalte após ciclagem de pH
(Z
2
) foi calculada (Ögaard et al., 1988; Arends & Bosch, 1992; Sullivan et al., 1995)
seguida da perda mineral integrada (∆Z = Z
2
– Z
1
) (Vieira et al., 2005).
3.5 Determinação de F, Ca e P no esmalte e nas soluções
Uma das metades dos blocos seccionados longitudinalmente foi seccionada
obtendo um bloco com dimensões 2X2mm. As medidas foram realizadas com
Material e Método
31
paquímetro digital (Mitutoyo CD-15B, Mitutoyo Corporation, Japan) para obter-se a
área de superfície do esmalte. Em seguida, duas camadas, a primeira de 10µm e a
segunda de 40 µm de esmalte foram removidas, baseando-se no trabalho de
Weatherell et al. (1985). Para tal foi utilizado um micromotor acoplado à peça reta (N
270, Dabi-Atlante, Ribeirão Preto, SP, Brasil) e disco de lixa auto-adesiva (13 mm de
diâmetro) de granulação 600 (silicon-carbide, BUEHLER) para a primeira camada e
lixa de granulação 320 (silicon-carbide, BUEHLER) para a segunda camada, em
frascos de poliestireno cristal (J-10, Injeplast) (Anexo G). As superfícies dos blocos
foram lavadas com 0,4 mL de água deionizada, no interior dos frascos onde foi
acrescentado 0,4 mL de HCl 1 mol L
-1
. Os frascos foram mantidos sob agitação
constante por 30 minutos e seguida da adição de 0,8 mL de NaOH 0,5 mol L
-1
.
Alíquotas de 0,7 mL dessa mistura foram pipetadas, adicionadas de 0,07 mL de
TISAB III (total ionic strength adjustor buffer) para dosagem de F. Outra alíquota de 0,7
mL foi adicionada de 0,014 mL de ISA (ionic strenght adjustor) para determinação de
cálcio utilizando-se eletrodo específico (Orion 9300) e analisador de íons (Orion
720A). Dessa mistura alíquotas de 100 µL foram utilizadas para dosagem de fósforo
inorgânico, pelo método espectrofotométrico de Fiske & Subbarow (1925). Os
resultados foram expressos em µmoles/mm
3
.
Foi realizada a análise das soluções de ciclagem de pH com relação à variação
(final-inicial) da quantidade de (µg) de F (∆F) e Ca (∆Ca). As diferenças das três
soluções (Des, Re 1º - 5º dia e Re 6º - 7º dia) foram somadas (Anexo M).
3.6 Análise estatística
Material e Método
32
Os resultados obtidos foram submetidos ao teste de normalidade e
homogeneidade das variâncias. Em seguida, foi aplicada a análise estatística mais
adequada para cada resultado: com exceção do quociente de reação para as soluções
desmineralizantes e análise da %vol.min em diferentes distâncias, em que foi
aplicado o teste de Kruskal-Wallis, todos os demais resultados foram submetidos à
análise de variância seguida do teste de Tukey. Foi realizada também a análise de
regressão e correlação de Pearson. As análises foram feitas utilizando-se o programa
GMC versão 2002 (Campos, 2003), estabelecendo-se o nível de significância em 5%.
R
R
E
E
S
S
U
U
L
L
T
T
A
A
D
D
O
O
S
S
Resultados
34
4 RESULTADOS
As concentrações (média±dp) de F e P nos dentifrícios estão apresentadas na
tabela 1. Observa-se que sem prévia hidrólise ácida a concentração de P encontrada
nos dentifrícios é de no máximo 30% daquela estimada pela fórmula molecular do
TMP. O pH (média±dp) dos dentifrícios experimentais foi de 7,3 ± 0,4 e do Crest
®
foi
de 7,0 ± 0,008.
< Tabela 1>
A Figura 1A mostra os valores médios de %ASMH (Anexo I) do esmalte dos
blocos tratados com os dentifrícios experimentais e comercial (Crest
®
). Observa-se
que o tratamento com dentifrícios sem F contendo TMP até a concentração de 0,1%
não diminui a porcentagem de perda de microdureza, permanecendo igual ao
placebo. O efeito de TMP só é observado a partir da concentração de 0,25%, na
ausência de F e aumenta com sua concentração. Nos dentifrícios com F (500 µg/g) a
adição de TMP causou uma maior redução da %ASMH a partir da concentração de
0,1%, se igualando ao Crest
®
. Em concentrações acima de 1% obteve-se eficácia maior
que o do Crest
®
. O efeito da adição de TMP ao dentifrício sobre a %ASMH mostrou
correlação significante tanto em dentifrícios sem F (r=0,9767, p=0,0006), como
naqueles com F (r=0,8554, p=0,0144) .
< Figura 1>
A figura 1B mostra que nos grupos tratados com dentifrícios sem F a perda
mineral foi menor que a do placebo a partir da adição de 0,1% de TMP. O efeito
máximo foi observado na concentração de 1%. A adição de TMP ao dentifrício de 500
µgF/g provocou uma melhora na sua eficácia reduzindo a perda mineral, a partir da
concentração de 0,25%, quando se iguala ao Crest
®
; nas concentrações acima de 0,5%
Resultados
35
observam-se perdas ainda menores. O efeito da adição de TMP sobre a perda
mineral mostrou correlação significante tanto nos dentifrícios sem F (r=0,8756,
p=0,0104) como naqueles com F (r=0,8554, p=0,0098).
A Figura 2 mostra que as diferenças de conteúdo mineral entre os grupos são
mais evidentes até uma profundidade de cerca de 50 µm; essas diferenças podem ser
observadas já na primeira camada de 10 µm, mesmo nos grupos em que não tenha
sido detectada diferença estatisticamente significante no ∆Z.
< Figura 2>
Pela análise do conteúdo mineral após a microabrasão (figura 3), observa-se
que há correlação entre a concentração de F no esmalte e a concentração de TMP
tanto nos dentifrícios sem F (r=0,8549, p=0,0146) como naqueles com F (r=0,9759,
p=0,0006). Com relação ao Ca, a correlação só foi observada nos dentifrícios com F
(r=0,7798, p=0,0382) e quanto ao P, não houve correlação.
< Figura 3>
A partir das concentrações de F e Ca das soluções utilizadas nas ciclagens,
determinou-se o quociente de reação para CaF
2
através da fórmula do produto de
solubilidade (Kps = [Ca].[F]
2
) (anexo M). Observou-se que não há diferença
estatisticamente significante entre os grupos com diferentes concentrações de TMP.
Tabela 1. Concentração (µg/g) de F iônico (FI) e total (FT) e P (sem e após hidrólise) dos dentifrícios. Os valores expressam
médias±dp e o número de amostras
F (µg/g) P (µg/g)
Flúor Iônico (FI) Flúor Total (FT) Sem Hidrólise Após Hidrólise
Dentifrício 0 500 0 500 0 500 0 500
0% TMP
5,6 ± 1,72 (6)
520,5 ± 2,1 (3) 7,36 ± 2,2 (6) 512,7 ± 2,1 (3) 30,59 ± 19,11 (3) 18,66 ± 1,9 (3) 36,43 ± 12,05 (3) 10,32± 10,1 (3)
0,1% TMP
5,7 ± 1,6 (6) 516,8 ± 22,5 (3) 8,4 ± 4,2 (6) 500,4 ± 15,2 (3)
94,31 ± 4,17 (3) 71,73 ± 3,7 (3) 273,29 ± 19,9 (3) 219,90 ± 3,12 (3)
0,25% TMP
5,6 ± 2,2 (6) 520,9 ± 22,7 (3) 6,8 ± 2,5 (6) 511,4 ± 20,9 (3)
127,70± 6,22 (3) 106,51± 3,2 (3) 623,86 ± 14,71 (3) 551,77 ± 6,7 (3)
0,5% TMP
5,3 ± 1,8 (6) 506,5 ± 22,5 (3) 7,0 ± 2,6 (6) 501,4 ± 19,1 (3)
178,93± 2,13 (3) 181,42 ± 12,35 (3) 1142,67 ± 12,6 (3) 1209,47 ± 37,5 (3)
1% TMP
4,9 ± 1,6 (6) 514,2 ± 12,4 (3) 6,8 ± 2,2 (6) 523,7 ± 13,4 (3)
287,56 ± 14,64 (3)
297,05 ± 11,86 (3) 2187,25 ± 27,85 (3)
2550,81 ± 16,29 (3)
2% TMP
6,3 ± 0,7 (3) 478,3 ± 10,6 (3) 9,2 ± 1,4 (3) 489,9 ± 8,7 (3) 561,51 ± 21,05 (3)
408,61 ± 14,18 (3) 5017,31 ± 74,4 (3) 4197,66 ± 17,24 (3)
3% TMP
4,8 ± 1,2 (3) 532,1 ± 32,5 (3) 4,3 ± 0,2 (3) 543,8 ± 34,5 (3)
483,07± 9,7 (3) 397,28 ± 16,33 (3) 5972,23 ± 259,0 (3)
5946,73 ± 75,19 (3)
Crest®
1117,3 ± 29,0 (3) 1083,6 ± 29,3(3)
1944,37 ± 25,6 (3)
Figura 1 – (A) Porcentagem de alteração de microdureza de superfície (%ASMH), (B)
perda mineral (∆Z) do esmalte dos blocos tratados com dentifrícios com 500 µgF/g (□) , 0
µgF/g (◊) e Crest
®
(∆). Letras distintas indicam diferenças estatisticamente significantes
(ANOVA, Tukey, p<0,05).
e
d
c
c
b,c
a,b
a
g,j
i
i
h,i
h,i,j
g,h
f
g
-100,0
-90,0
-80,0
-70,0
-60,0
-50,0
-40,0
-30,0
-20,0
-10,0
0,0
0 2000 4000 6000 8000 10000
µg P/g dentifrício
%ASMH
(A)
a
b
b,c
c
d
d
d
e
e,f
f,g,j
g,h
h,i
h,i
i
j
-5000,0
-4000,0
-3000,0
-2000,0
-1000,0
0,0
0 2000 4000 6000 8000 10000
µgP/g de dentifrício
∆
∆
∆
∆
Z (% vol min)
(B)
Discussão
38
Figura 2 – Conteúdo mineral (%Vol.min, n=10) em diferentes profundidades do
esmalte dos blocos tratados com dentifrícios sem F (A) e com 500 µgF/g e Crest
®
(B).
Letras distintas indicam diferenças estatisticamente significantes (Kruskal Wallis,
p<0,05).
30
43
56
69
82
95
0 50 100 150 200 250 300 350
Profundidade (
µ
m)
Conteúdo Mineral (%vol min)
Placebo
0-0.1%
0-0.25%
0-0.5%
0-1%
0-2%
0-3%
a
a,b
b
c
d
d
e
a
a
a
b
b
b
c
a
a
a
a
b
b
b
a
a,b
b,c
c
c
c
c
* * * *
(A)
60
67
74
81
88
95
0 50 100 150 200 250 300 350
Profundidade (
µ
m)
Conteúdo mineral (%vol min)
500 ppmF
500- 0.1%
500- 0.25%
500- 0.5%
500- 1%
500- 2%
500- 3%
Crest™
a
b
c
d
d
e
f
g
a
b
c
c
c
d
d
a
a
b
c
c
c,d
d
* * * *
(B)
Discussão
39
Figura 3 – Concentração (µmol/mm
3
) de F (A), Ca (B) e P (C) (média ± epm, n = 10) no esmalte dos
blocos tratados com dentifrícios experimentais de 0 µgF/g (◊), 500 µgF/g (□) e Crest
®
(∆). Letras
distintas indicam diferenças estatisticamente significantes (Kruskal Wallis, p,0,05).
Concentração de F no esmalte
a,b,d
a,b
a
a
a,b,d
a,b,c
a,b,c
b,c,e
c,e
c,d,e
f
e,f
e,f
c,e
e,f
0,000
0,040
0,080
0,120
0,160
0,200
0,240
0 2000 4000 6000 8000 10000
µgP/g dentifrício
F(µmol/mm
3
)
Concentração de Ca no esmalte
a,b
a,ba,b
a,b
a,b
a
a,b
b
a,b
a,b
a,b
a,b
a,b
a,b
a,b
0,00
10,00
20,00
30,00
40,00
50,00
60,00
0 2000 4000 6000 8000 10000
µgP/g dentifrício
Ca (µmoles/mm
3
)
(A) (B)
Concentração de P no esmalte
a,b,d
a,d
a,b,d
a
a,d
a,b,d
a,d
c,d
a,b,c,d
a,b,c,d
a,b,c,d
a,b,c,d
a,b,c,d
b,c,d
d
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
30,00
35,00
40,00
0 2000 4000 6000 8000 10000
µgP/g dentifrício
P (µmoles/mm
3
)
(C)
D
D
I
I
S
S
C
C
U
U
S
S
S
S
Ã
Ã
O
O
Discussão
41
5 DISCUSSÃO
Uma das formas de prevenção da fluorose dentária seria a diminuição da
exposição ao F pela redução de sua concentração disponível nos dentifrícios
(Horowitz,1992).
Entretanto, é necessário que esses dentifrícios com menor concentração de F
sejam eficazes tanto quanto um dentifrício comercial de 1100 µgF/g. Alguns autores
têm preconizado a utilização de agentes anticariogênicos associados ou não ao F
(Ingram & Edgar, 1994; Roberts, 1995). Assim, a suplementação com fosfato em um
dentifrício contendo 500 µgF/g poderia proporcionar a mesma efetividade. Como
demonstrado no presente trabalho, os dentifrícios suplementados com TMP,
dependendo da concentração adicionada, apresentaram uma eficácia equivalente ou
maior que a do controle positivo (Crest
®
., 1100 µgF/g).
Alguns trabalhos relatam que a atividade anticariogênica dos sais de fosfato,
dentre eles o TMP, se deve a uma redução do processo de desmineralização do
esmalte (Henry & Navia, 1969, Gonzalez, 1971). Dentre os fosfatos estudados, o TMP
mostrou atividade anticariogênica melhor que o hexametafosfato e o ortofosfato
(Harris et al., 1967). Trabalhos clínicos utilizando dentifrícios com 3% TMP não
associado a F mostraram uma ligeira redução nos incrementos de cárie quando
comparados a um dentifrício placebo (Ständtler, 1996). Os resultados do presente
trabalho in vitro também mostram uma redução na perda da microdureza de
superfície do esmalte e ∆Z de blocos tratados com dentifrícios contendo apenas TMP.
Mesmo em concentração de 0,1% TMP, já se observa diferença significante em
Discussão
42
relação ao placebo e esse efeito fica mais evidenciado em concentrações maiores de
TMP.
Em outro trabalho clínico (Andlaw et al., 1983), dentifrícios contendo 3% TMP
apresentaram efetividade menor que aqueles que continham 0,8% MFP (1.060
µgF/g). No presente trabalho também se constata que a porcentagem de perda de
microdureza de superfície como de perda mineral (∆Z) é maior quando o TMP não
está associado ao F. Kinkel et al. (1985) relataram que dentifrícios contendo a
combinação de 1200 µgF/g (NaF), 420 µgF/g (MFP) e 2% de TMP apresentavam
efetividade superior quando comparados a um controle de 1300µgF/g (MFP).
Nossos resultados mostram que mesmo a concentração mais baixa de F (500 µg/g)
associada a 0,1% de TMP já mostra redução da perda de microdureza de superfície
semelhante àquela obtida com o controle positivo de 1100 µg F/g.
Segundo Gonzalez (1971), o F e o TMP não competem pelo mesmo sítio de
ligação na superfície do esmalte. Os resultados mostram que o efeito de TMP pode
incrementar o do F, sem interferir em sua ação.
O TMP é um composto cíclico que pode ser hidrolisado através de uma base
ou um ácido forte (Gonzalez, 1971). Como se pode observar na tabela 1, sem hidrólise
ácida das amostras dos dentifrícios, foi encontrado no máximo 30% da concentração
de P estimada a partir da fórmula molecular do TMP. Dessa maneira, podemos
sugerir que o TMP atua predominantemente sob forma inalterada, através da
deposição na superfície e/ou pela sua incorporação ao esmalte. Quando incorporado
à hidroxiapatita (HA) altera as trocas de minerais com o meio (MacGaughey e
Stowell, 1977), diminuindo a solubilidade tornando a deposição de fosfatos de cálcio
Discussão
43
na superfície do esmalte mais lenta (MacGaughey, 1983), favorecendo a formação de
compostos químicos mais semelhantes à HA e fluorapatita (FA) (Gonzalez, 1971).
Como se pode constatar no gráfico do ∆Z (figura 1B), a remoção de uma
camada de 50 µm de profundidade foi suficiente para permitir a avaliação da camada
superficial da lesão, uma vez que até essa profundidade se notam as maiores
diferenças entre os grupos. A incorporação de F no esmalte aumenta com a
concentração de TMP presente no dentifrício e mostra uma correlação significante
com a %ASMH para os dentifrícios sem F (r=0,8503, p=0,0156) e com F (r=0,7666,
p=0,0438). Houve correlação significante também entre a concentração de F no
esmalte e o ∆Z para os dentifrícios sem (r=0,8248, p=0,0224) e com F (r=0,8788,
p=0,00098). Quanto ao Ca não houve correlação significante, entretanto, observa-se
uma tendência de aumento na concentração desse íon no esmalte com o aumento de
TMP, quando este está associado ao F (figura 3B), o que pode ter contribuído para o
aumento da microdureza de superfície e maior conteúdo mineral avaliado pela
microdureza em secção longitudinal, observados no presente trabalho.
O quociente de reação para CaF
2
calculado pelo produto das concentrações
molares de Ca e F presentes nas soluções de ciclagem não se altera com o aumento da
concentração de TMP do dentifrício, o que sugere que o TMP não interfere na
formação de fluoreto de cálcio através de alterações nas concentrações desses íons
presentes nas soluções de ciclagem.
A formação de fluoreto de cálcio na superfície do esmalte em pH neutro pode
ocorrer com a incorporação de fosfatos em sua composição, formando um composto
mais solúvel, o que aumentaria a liberação de F ao meio (Christoffersen et al., 1988).
Discussão
44
No modelo de ciclagem de pH, entretanto, as mudanças de pH (4,7 e 7,0) das
soluções levam à dissolução e reprecipitação do composto sobre a superfície do
esmalte. Segundo Gonzalez et al. (1973), o TMP se adsorve à superfície da HA,
formando uma camada protetora que torna mais lenta a desmineralização, como
também as trocas iônicas entre o esmalte e o meio. Dessa maneira, com o TMP
adsorvido à HA durante os tratamentos com os dentifrícios, é possível que o fluoreto
de cálcio e/ou os diferentes fosfatos de cálcio formados na superfície do esmalte
sejam mais preservados. Esse processo se repetiria a cada tratamento com dentifrício,
resultando em maior microdureza e conteúdo mineral.
Deste modo, os resultados mostram que a ação do TMP sobre o processo da
des- e remineralização aumenta com sua concentração, ao menos até 3% utilizada
nesse trabalho e essa ação incrementa a eficácia do F resultando em menor perda
mineral do esmalte. A adição de TMP ao dentifrício permitiu que mesmo em
concentração de F de 500 µg/g se obtivesse uma eficácia semelhante ou maior que a
do controle positivo de 1100 µgF/g.
C
C
O
O
N
N
C
C
L
L
U
U
S
S
Ã
Ã
O
O
Conclusão
46
6 CONCLUSÃO
Conclui-se que a suplementação com TMP na concentração de 0,25 a 3,0%
proporciona a um dentifrício de 500µgF/g uma eficácia equivalente ou superior que
a de um dentifrício padrão de 1100µgF/g, in vitro, sobre a desmineralização do
esmalte de dente bovino.
R
R
E
E
F
F
E
E
R
R
Ê
Ê
N
N
C
C
I
I
A
A
S
S
B
B
I
I
B
B
L
L
I
I
O
O
G
G
R
R
Á
Á
F
F
I
I
C
C
A
A
S
S
Referências Bibliográficas
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A
A
N
N
E
E
X
X
O
O
S
S
Anexos
53
ANEXO A
DOSAGEM DE F NOS DENTIFRÍCIOS
100
-
110 mg
homogeneização
-
vórtex
suspensão
-
dentifrícios
centrifugar 3000 rpm/20 min
(906g)
0,25 mL suspensão
0,25 mL sobrenadante
1,0 mL TISAB II
0,5 mL NaOH 1 mol L
-1
0,25 mL HCl 2 mol L
-1
0,25 mL HCl 2 mol L
-1
0,5 mL NaOH 1 mol L
-1
1,0 mL TISAB II
leitura do F total
-
mV
leitura do F iônico
-
mV
H
2
O deionizada q.s.p.10 mL
1 h aquecimento (45°C / agitação)
Anexos
54
ANEXO B
DOSAGEM DE P NOS DENTIFRÍCIOS
100
-
110 mg
homogeneizaçã
o
-
vórtex
suspensão
-
dentifrícios
centrifugar 3000 rpm/20 min
(906g)
1,25 mL suspensão
0,25 mL sobrenadante
0,5 mL sobrenadante
1,25 mL HCl 1 mol L
-1
Leitura do P
sem hidrólise
Leitura do P
após hidrólise
H
2
O deionizada q.s.p. 10 mL
Banho fervente por 1h
centrifugar 3000 rpm/20 min
(906g)
Anexos
55
ANEXO C
PREPARO E SELEÇÃO DOS BLOCOS DE ESMALTE
Confecção dos blocos de esmalte bovino (4 x 4 mm)
2. Secção da coroa utilizando disco diamantado (série 15 HC
Diamond - n. 11-4244 Buehler) separando a superfície
vestibular da lingual.
3. Face vestibular fixada na placa de acrílico.
4. Secção da face vestibular no sentido longitudinal, na
porção mais plana, utilizando-se 2 discos diamantados
(série 15 HC Diamond –n. 11-4243 Buehler), montados em
cortadeira sob refrigeração com água
destilada/deionizada e separados por um disco espaçador
de alumínio com 4 mm de espessura. Em seguida, foi
realizado o corte no sentido transversal.
5. Fragmento vestibular do dente bovino, fixado sobre placa
de resina. Ao lado, bloco de esmalte dentário.
1. Coroa do dente bovino incisivo central inferior, separada
da raiz através de disco diamantado de duas faces (KG
Sorensen D 91), montado em motor de bancada (Nevoni),
mantido sob refrigeração (água destilada/deionizada).
Anexos
56
ANEXO D
PREPARO E SELEÇÃO DOS BLOCOS DE ESMALTE
Planificação da dentina e polimento do esmalte
1. Bloco de esmalte fixado em disco de
resina acrílica pré-fabricada (± 3 cm de
diâmetro por ± 8 mm de espessura), com
auxílio de cera pegajosa (Kota Ind. e
Com. LTDA), com a superfície dentinária
voltada para cima.
2. Ajuste da dentina para obtenção
de superfícies paralelas entre
esmalte e dentina, utilizando
Politriz APL-4 AROTEC e lixas de
granulação 320 (CARBIMET
Paper Discs, 30-5108-320,
BUEHLER), 2 pesos, durante 20
segundos sob baixa rotação e
refrigeração.
3. Blocos fixados com a superfície do
esmalte voltada para cima, a qual será
polida.
Seqüência do polimento de esmalte:
1. Pedra-pomes, água deionizada e taça de borracha montada em contra-ângulo
em baixa-rotação.
2. Na Politriz APL-4 AROTEC - lixa de granulação 600, 800 e 1200 (30 segundos –
2 pesos) e refrigeração a água. Limpeza em lavadora ultrassônica e água
destilada/deionizada por 2 minutos, entre cada lixa;
3. Na Politriz APL-4 AROTEC - acabamento final com disco de papel feltro
TEXMET 1000 (Buehler Polishing Cloth) (1 minuto – 2 pesos) e suspensão de
diamante 1 micron base-água (Buehler);
4. Limpeza em lavadora ultrassônica utilizando solução detergente (Ultramet
Sonic Cleaning Solution - Buehler) diluída 20:1 em água destilada/deionizada
(2minutos);
5. Lavagem durante 30 segundos com jato de água destilada/deionizada.
Anexos
57
ANEXO E
ANÁLISE DE MICRODUREZA
1. Microdurômetro Shimadzu Micro
Hardness Tester HMV-2.000 (Shimadzu
Corporation - Kyoto-Japan), com
penetrador tipo Knoop, acoplado ao
Software para análise de imagem
CAMS-WIN (NewAge Industries,
USA).
2. Bloco de esmalte sendo
submetido à leitura no
microdurômetro, carga
estática de 25 gramas e
tempo de 10 segundos, para
análise da microdureza de
superfície.
3. Fotomicrografia das impressões para
análise de microdureza de superfície
inicial (SMH-inicial), e final (SMH-
final) (Aumento: 100x).
Anexos
58
ANEXO F
MICRODUREZA EM SEÇCÃO LONGITUDINAL
1. Embutidora metalográfica (AROTEC PRE
30S) – utilizada para inclusão dos blocos
de esmalte em 5 gramas de resina acrílica
(Buehler Transoptic Powder, Lake Bluff,
Illinois, USA), pressão de 150 Kgf/cm2,
tempo de aquecimento de 7 minutos e
mais 7 minutos de resfriamento. Os blocos
foram fixados em posição com cola adesiva
(Super Bonder – Loctite).
2. Corpo de prova – plano longitudinal
voltado para a superfície da resina acrílica.
3. Microdurômetro Shimadzu Micro
Hardness Tester HMV-2.000 (Shimadzu
Corporation - Kyoto-Japan), com
penetrador tipo Knoop, acoplado ao
Software para análise de imagem CAMS-
WIN (NewAge Industries, USA).
4. Fotomicrografia das impressões para
análise de microdureza de secção
longitudinal nas diferentes distâncias.
(Aumento: 100x).
Seqüência do polimento de esmalte:
1. Na Politriz APL-4 AROTEC - lixa de granulação 320 (1 minuto – 2 pesos),
600, 800 e 1200 (2minutos – 2 pesos) e refrigeração a água. Limpeza em
lavadora ultrassônica e água destilada/deionizada por 2 minutos, entre cada
lixa;
2. Na Politriz APL-4 AROTEC - acabamento final com disco de papel feltro
MICROCLOTH SUPREME PSA (Buehler Polishing Cloth) (2 minuto – 2
pesos) e suspensão de diamante 1/4 micron base-água (Buehler);
3. Limpeza em lavadora ultrassônica utilizando solução detergente (Ultramet
Sonic Cleaning Solution - Buehler) diluída 20:1 em água
destilada/deionizada (3minutos);
4. Lavagem durante 30 segundos com jato de água destilada/deionizada.
Anexos
59
ANEXO G
ANÁLISE DE CONTEUDO DE F, Ca, P NO ESMALTE
1. Micromotor acoplado à peça reta (N
270, Dabi-Atlante, Ribeirão Preto, SP,
Brasil)
2. Bloco de esmalte adaptado
ao mandril, sendo submetido
à microabrasão, com
desgaste de 10 e 40 µm, para
análise da incorporação de F,
Ca e P no esmalte.
3. Após desgaste, pó de esmalte presente
na lixa adaptada em frascos de
poliestireno cristal (J-10, Injeplast).
Anexos
60
ANEXO H
MICRODUREZA DE SUPERFÍCIE
Valores obtidos a partir da análise de microdureza de superfície (Knoop) inicial e final
Microdureza inicial Microdureza final
Blocos
Média
Blocos
Média
1 363 359 356 343 363
356,8
1 50 66 40 21 21
39,6
2 341 347 339 345 352
344,8
2 28 49 34 50 50
42,2
3 352 363 356 361 359
358,2
3 49 63 55 66 82
63,0
4 363 363 366 354 352
359,6
4 42 36 46 44 51
43,8
5 347 350 350 345 345
347,4
5 55 38 44 43 43
44,6
6 350 359 354 359 352
354,8
6 59 41 29 56 29
42,8
7 359 356 366 350 356
357,4
7 49 51 45 48 53
49,2
8 366 354 361 352 359
358,4
8 43 36 46 47 40
42,4
9 341 345 347 343 350
345,2
9 47 50 45 43 49
46,8
10 345 345 345 341 347
344,6
10 64 52 52 44
53,0
média
352,7
média
46,7
dp 6,4 dp 6,9
Blocos
Média
Blocos
Média
11 345 345 359 345 335
345,8
11 37 24 33 27 25
29,2
12 350 356 347 350 347
350,0
12 83 71 99 98 85
87,2
13 361 352 352 350 350
353,0
13 39 30 30 38 63
40,0
14 352 359 366 354 368
359,8
14 88 78 87 87 86
85,2
15 343 345 347 339 339
342,6
15 61 60 79 61 58
63,8
16 361 368 350 356 366
360,2
16 60 88 68 74 84
74,8
17 347 350 354 359 350
352,0
17 55 62 51 47 52
53,4
18 350 363 359 359 356
357,4
18 34 28 23 24 20
25,8
19 350 347 345 354 361
351,4
19 41 39 35 41 38
38,8
20 345 354 341 350 350
348,0
20 76 51 57 60 47
58,2
média
352,0
média
55,6
dp 5,8 dp 22,2
Blocos
Média
Blocos
Média
21 345 333 343 347 347
343,0
21 73 66 78 50 54
64,2
22 350 366 361 366 345
357,6
22 61 42 47 60 63
54,6
23 345 343 361 350 361
352,0
23 81 88 65 104 109
89,4
24 341 352 354 361 359
353,4
24 60 48 49 49 65
54,2
25 352 354 350 368 363
357,4
25 60 88 68 74 84
74,8
26 350 356 347 347 366
353,2
26 74 80 96 90 85
85,0
27 354 345 359 345 359
352,4
27 62 58 48 66 54
57,6
28 366 359 359 352 350
357,2
28 54 68 47 55 59
56,6
29 347 350 350 359 352
351,6
29 70 74 90 71 96
80,2
30 356 350 350 354 352
352,4
30 97 77 86 67 95
84,4
média
353,0
média
70,1
dp 4,2 dp 14,1
Blocos
Média
Blocos
Média
31 345 359 354 361 366
357,0
31 65 68 93 77 58
72,2
32 366 361 361 352 354
358,8
32 57 60 61 53 64
59,0
33 347 347 343 333 345
343,0
33 64 74 101 128 142
101,8
34 341 347 345 350 345
345,6
34 83 65 73 84 79
76,8
35 366 356 352 354 363
358,2
35 88 86 52 42 57
65,0
36 333 335 339 341 343
338,2
36 98 97 99 98 80
94,4
37 354 359 352 350 356
354,2
37 77 72 52 50 62
62,6
38 341 343 335 341 339
339,8
38 76 58 59 66 74
66,6
39 350 354 354 352 363
354,6
39 103 119 129 86 71
101,6
40 350 356 352 359 350
353,4
40 100 103 87 105 104
99,8
média
350,3
média
80,0
dp 7,9 dp 17,5
Dentifrício - 0 ppmF 0,5%TMP
Placebo
Dentifrício - 0 ppmF 0,1%TMP
Dentifrício - 0 ppmF 0,25%TMP
Anexos
61
Microdureza inicial Microdureza final
Blocos
Média
Blocos
Média
41 366 352 341 352 347
351,6
41 82 103 60 80 79
80,8
42 356 356 354 356 361
356,6
42 123 81 91 108 136
107,8
43 356 356 352 350 350
352,8
43 94 83 60 75 51
72,6
44 350 361 350 341 347
349,8
44 87 67 62 80 98
78,8
45 343 356 350 343 350
348,4
45 93 82 93 92 74
86,8
46 347 352 345 350 352
349,2
46 65 69 95 110 110
89,8
47 350 361 359 366 352
357,6
47 96 96 85 83 76
87,2
48 343 343 341 345 335
341,4
48 158 167 158 158 165
161,2
49 359 354 363 352 354
356,4
49 87 82 70 62 63
72,8
50 356 352 343 347 345
348,6
50 66 78 73 80 79
75,2
média
351,2
média
91,3
dp 4,9 dp 26,7
Blocos
Média
Blocos
Média
51 343 350 345 352 361
350,2
51 113 135 131 132 136
129,4
52 363 361 343 359 354
356,0
52 125 111 130 128 128
124,4
53 352 354 345 359 361
354,2
53 94 82 81 100 86
88,6
54 350 347 350 347 359
350,6
54 96 110 93 110 77
97,2
55 356 359 359 350 350
354,8
55 131 141 139 131 131
134,6
56 356 350 354 350 347
351,4
56 111 113 102 98 97
104,2
57 350 345 347 350 347
347,8
57 114 163 131 120 118
129,2
58 359 356 352 350 359
355,2
58 133 149 118 107 150
131,4
59 335 337 331 341 345
337,8
59 131 129 132 129 142
132,6
60 350 352 347 352 347
349,6
60 129 105 107 102 92
107,0
média
350,8
média
117,9
dp 5,3 dp 16,9
Blocos
Média
Blocos
Média
61 350 350 354 345 350
349,8
61 152 163 155 154 135
151,8
62 350 345 347 347 350
347,8
62 132 118 116 131 142
127,8
63 343 350 350 352 347
348,4
63 111 107 107 109 111
109,0
64 343 350 350 347 347
347,4
64 143 157 156 160 160
155,2
65 352 366 350 341 343
350,4
65 116 127 137 128 120
125,6
66 347 333 335 341 343
339,8
66 139 151 139 148 150
145,4
67 356 361 363 366 356
360,4
67 145 149 135 131 151
142,2
68 359 350 354 350 356
353,8
68 170 177 186 159 178
174,0
69 350 366 354 343 359
354,4
69 120 117 127 123 120
121,4
70 351 354 354 347 361
353,4
70 107 110 101 100 100
103,6
média
350,6
média
135,6
dp 5,5 dp 22,0
Blocos Média Blocos Média
71 359 368 363 343 361
358,8
71 188 186 194 197 194
191,8
72 343 341 339 347 363
346,6
72 173 183 170 174 158
171,6
73 370 361 361 363 356
362,2
73 180 161 140 179 147
161,4
74 361 363 359 368 366
363,4
74 157 140 179 190 136
160,4
75 335 339 339 347 345
341,0
75 127 126 125 170 168
143,2
76 350 354 363 350 359
355,2
76 147 152 143 157 142
148,2
77 345 341 343 350 341
344,0
77 165 171 166 175 165
168,4
78 341 333 337 335 337
336,6
78 193 157 165 152 158
165,0
79 350 341 345 341 352
345,8
79 151 152 175 190 143
162,2
80 359 343 343 350 347
348,4
80 196 170 181 168 186
180,2
média
350,2
média
165,2
dp 9,2 dp 14,2
Dentifrício - 0 ppmF 1%TMP
Dentifrício - 0 ppmF 2% TMP
Dentifrício - 0 ppmF 3% TMP
Dentifrício - 500 ppmF
Anexos
62
Microdureza inicial Microdureza final
Blocos Média Blocos Média
81 361 363 366 354 368
362,4
81 191 195 200 200 193
195,8
82 352 363 350 361 363
357,8
82 190 199 196 181 185
190,2
83 363 354 352 366 345
356,0
83 194 186 195 188 194
191,4
84 341 341 347 343 352
344,8
84 173 172 207 170 211
186,6
85 337 341 337 343 341
339,8
85 207 224 197 194 183
201,0
86 356 356 359 368 359
359,6
86 203 200 212 210 205
206,0
87 352 354 361 366 352
357,0
87 207 194 200 188 212
200,2
88 350 350 347 352 354
350,6
88 218 210 198 188 207
204,2
89 347 363 359 356 345
354,0
89 216 218 193 211 203
208,2
90 345 363 363 366 361
359,6
90 170 181 194 197 196
187,6
média
354,2
média
197,1
dp 7,1 dp 7,9
Blocos Média Blocos Média
91 341 341 361 366 339
349,6
91 201 213 215 200 222
210,2
92 341 343 347 343 341
343,0
92 205 213 209 210 213
210,0
93 350 341 352 345 347
347,0
93 231 233 233 233 211
228,2
94 354 366 366 361 363
362,0
94 206 213 218 214 216
213,4
95 361 345 354 354 347
352,2
95 217 226 203 199 206
210,2
96 345 366 363 368 352
358,8
96 197 217 209 183 191
199,4
97 356 350 352 347 350
351,0
97 201 220 200 211 209
208,2
98 341 343 337 337 341
339,8
98 190 203 199 194 187
194,6
99 361 363 350 352 356
356,4
99 227 200 218 204 218
213,4
100 352 356 363 361 350
356,4
100 213 195 212 191 197
201,6
média
351,6
média
208,9
dp 7,0 dp 9,2
Blocos Média Blocos Média
101 354 343 345 341 363
349,2
101 215 194 213 220 220
212,4
102 363 361 354 350 359
357,4
102 261 247 241 251 238
247,6
103 359 366 354 354 354
357,4
103 238 229 215 241 235
231,6
104 333 345 333 343 331
337,0
104 213 222 209 203 229
215,2
105 343 366 366 363 368
361,2
105 216 211 211 201 246
217,0
106 356 366 356 361 361
360,0
106 209 211 215 205 209
209,8
107 361 354 368 359 359
360,2
107 205 226 248 233 216
225,6
108 350 359 359 350 352
354,0
108 205 224 236 207 246
223,6
109 356 350 347 354 356
352,6
109 221 217 211 210 208
213,4
110 356 350 352 350 347
351,0
110 229 218 227 213 227
222,8
média
354,0
média
221,9
dp 7,2 dp 11,3
Blocos Média Blocos Média
111 356 347 350 341 356
350,0
111 215 215 243 207 207
217,4
112 361 361 356 361 350
357,8
112 237 239 230 248 261
243,0
113 345 343 356 347 350
348,2
113 233 247 230 236 241
237,4
114 359 352 345 359 356
354,2
114 221 231 217 217 212
219,6
115 339 347 343 356 352
347,4
115 212 271 257 220 241
240,2
116 356 366 356 356 359
358,6
116 214 205 209 231 248
221,4
117 354 350 345 361 347
351,4
117 213 233 265 246 246
240,6
118 366 363 354 363 363
361,8
118 231 211 217 233 220
222,4
119 350 345 347 350 347
347,8
119 221 233 215 213 231
222,6
120 356 350 350 361 352
353,8
120 227 224 225 230 221
225,4
média
353,1
média
229,0
dp 5,0 dp 10,0
Dentifrício - 500 ppmF 0,25% TMP
Dentifrício - 500 ppmF 1%TMP
Dentifrício - 500 ppmF 0,1% TMP
Dentifrício - 500 ppmF 0,5%TMP
Anexos
63
Microdureza inicial Microdureza final
Blocos Média Blocos Média
121 354 354 359 350 352
353,8
121 248 257 252 241 238
247,2
122 350 354 363 354 356
355,4
122 258 230 232 235 247
240,4
123 350 359 352 350 352
352,6
123 235 255 251 252 233
245,2
124 347 343 341 354 345
346
124 224 238 233 242 254
238,2
125 359 350 361 354 361
357
125 232 227 229 231 236
231,0
126 359 350 361 354 361
357
126 254 271 254 239 258
255,2
127 345 339 333 347 343
341,4
127 211 235 222 233 236
227,4
128 341 347 341 350 350
345,8
128 236 212 226 238 248
232,0
129 352 366 352 350 356
355,2
129 237 236 232 230 238
234,6
130 366 366 352 359 352
359
130 237 235 239 242 233
237,2
média
352,3
média
237,2
dp 5,9 dp 8,4
Blocos Média Blocos Média
131 361 356 343 363 352
355,0
131 217 248 254 226 254
239,8
132 341 363 354 350 354
352,4
132 238 236 229 238 215
231,2
133 361 345 359 352 361
355,6
133 243 268 271 280 250
262,4
134 335 337 343 341 341
339,4
134 229 215 237 209 217
221,4
135 356 359 361 350 343
353,8
135 224 250 227 231 233
233,0
136 363 366 368 366 363
365,2
136 274 274 271 257 265
268,2
137 347 356 359 356 354
354,4
137 268 235 235 280 254
254,4
138 335 339 333 335 339
336,2
138 211 233 212 254 233
228,6
139 363 347 350 361 356
355,4
139 238 236 241 251 238
240,8
140 350 359 361 361 359
358,0
140 243 235 258 245 245
245,2
média
352,5
média
242,5
dp 8,6 dp 15,2
Blocos Média Blocos Média
141 363 356 350 363 341
354,6
141 172 239 255 241 203
222,0
142 354 345 350 366 341
351,2
142 205 220 225 218 236
220,8
143 361 350 359 359 343
354,4
143 224 235 218 190 225
218,4
144 359 363 368 368 363
364,2
144 185 194 152 179 216
185,2
145 361 366 363 352 347
357,8
145 163 177 167 188 175
174,0
146 345 343 333 350 343
342,8
146 207 181 171 208 190
191,4
147 361 363 359 356 345
356,8
147 233 229 223 231 143
211,8
148 359 361 356 345 356
355,4
148 238 242 238 200 197
223,0
149 352 354 359 361 366
358,4
149 193 198 222 195 188
199,2
150 347 350 354 352 347
350,0
150 192 182 227 250 188
207,8
média
354,6
média
205,4
dp 5,7 dp 17,2
Dentifrício - 500 ppmF 3%TMP
Dentifrício - 500 ppmF 2%TMP
Crest
Anexos
64
ANEXO I
MICRODUREZA EM SECÇÃO LONGITUDINAL
Valores de % de volume mineral (%vol.min.) e ∆Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆Z
1 30,7 31,8 58,3 75,7 83,6 89,9 91,6 88,4 -4047,2 1 64,6 67,1 82,0 90,9 89,7 91,6 90,9 92,3 -1852,3
2
38,2 34,2 55,5 79,9 87,0 91,4 87,3 88,0 -4218,9
2
65,1 77,5 82,1 87,7 91,4 92,3 92,0 90,8 -1581,9
3
32,7 41,5 61,1 76,2 84,1 89,1 89,6 86,4 -4132,4
3
62,2 76,4 81,7 86,6 90,4 93,7 90,2 95,2 -1541,6
4
31,5 37,2 57,9 76,9 88,9 92,7 91,1 89,5 -3623,2
4
65,4 69,5 78,8 90,7 90,8 94,5 91,5 90,4 -1691,7
5
36,2 36,9 53,6 68,6 83,1 88,0 90,0 85,4 -4601,3
5
64,9 73,3 80,1 90,2 92,7 92,5 90,8 91,8 -1695,8
6 37,0 35,5 59,1 73,6 87,7 92,6 91,3 95,5 -3317,4 6 62,5 67,3 80,3 89,5 90,1 91,7 91,1 92,7 -1869,0
7
37,3 47,1 56,3 73,6 84,5 92,1 91,0 90,4 -3553,1
7
62,6 72,2 82,1 91,1 93,5 95,2 93,7 91,0 -1215,4
8
29,9 35,1 65,1 79,2 83,0 90,0 87,5 87,7 -4278,0
8
62,9 65,1 81,4 86,7 88,6 89,8 94,8 93,2 -1672,7
9
32,8 37,5 53,7 71,0 87,3 91,3 90,4 88,2 -4080,2
9
57,6 65,7 73,1 82,9 89,2 93,8 91,8 91,2 -2110,2
10
28,5 31,3 64,6 78,7 88,3 87,0 85,3 90,6 -4557,6
10
58,0 65,2 74,7 86,9 88,9 92,4 91,9 91,8 -2054,4
média
33,5 36,8 58,5 75,3 85,7 90,4 89,5 89,0 -4040,9
média
62,6 69,9 79,6 88,3 90,5 92,8 91,9 92,0 -1728,5
dp 3,5 4,7 4,1 3,7 2,3 1,9 2,1 2,8 337,6 dp 2,8 4,6 3,2 2,6 1,6 1,6 1,4 1,4 260,8
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
1
38,0 47,5 59,6 76,8 88,4 90,9 90,8 89,2 -3489,8
1
69,6 65,9 79,5 88,9 90,9 93,0 91,2 92,7 -1740,7
2
43,2 51,3 52,0 60,3 81,3 89,8 91,7 92,1 -3795,0
2
64,4 71,5 78,1 90,0 93,0 92,1 92,6 91,6 -1620,0
3 49,5 53,6 61,5 78,3 73,1 81,5 91,9 92,9 -3776,7 3 65,6 68,9 78,3 90,2 91,4 91,8 91,6 91,9 -1789,5
4
40,5 42,7 63,1 71,3 90,4 89,7 91,3 88,2 -3643,5
4
66,6 75,1 83,5 90,5 92,0 91,4 92,5 92,5 -1428,9
5
35,8 34,1 55,5 61,1 89,2 93,1 92,7 92,2 -3651,4
5
63,8 68,2 76,8 86,8 91,7 92,4 91,6 91,5 -1897,1
6
31,0 30,4 50,0 72,5 85,5 93,0 93,0 90,4 -3796,4
6
63,7 76,4 84,9 84,3 87,7 94,1 94,5 93,5 -1167,8
7
34,1 44,7 60,7 75,7 87,3 90,0 90,9 92,5 -3484,3
7
65,6 72,0 86,4 88,5 91,2 91,8 90,7 92,6 -1659,6
8
44,5 50,0 73,6 79,6 81,8 84,7 90,4 84,5 -3883,2
8
68,5 74,7 79,1 88,4 92,1 93,0 91,8 91,5 -1571,6
9 37,0 41,6 70,2 75,1 90,9 90,2 90,8 88,1 -3501,2 9 65,9 75,9 79,1 85,9 91,2 93,3 92,4 92,5 -1509,7
10
37,9 39,6 67,1 74,7 87,3 91,3 90,4 88,2 -3644,4
10
65,9 76,7 84,7 86,6 91,0 93,4 92,0 91,0 -1493,3
média
39,1 43,5 61,3 72,5 85,5 89,4 91,4 89,8 -3666,6
média
66,0 72,5 81,0 88,0 91,2 92,6 92,1 92,1 -1587,8
dp 5,4 7,5 7,6 6,7 5,4 3,6 0,9 2,7 101,3 dp 1,9 3,8 3,5 2,1 1,4 0,9 1,0 0,7 206,3
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆Z
1
50,3 55,8 74,0 87,2 87,5 90,7 89,2 86,4 -3072,6
1
70,8 74,0 81,6 89,4 92,7 92,5 93,6 92,1 -1286,9
2
52,1 56,1 75,7 85,5 91,1 91,5 90,3 91,1 -2538,8
2
71,5 77,1 85,0 91,4 91,6 93,5 92,2 92,6 -1194,7
3
36,9 40,4 58,6 77,4 84,4 87,8 90,5 91,5 -3846,6
3
71,3 76,3 83,5 89,1 92,0 91,6 91,1 93,0 -1494,1
4
41,2 37,8 50,4 68,7 85,2 91,3 93,0 92,1 -3634,3
4
72,6 76,2 88,1 88,8 93,9 91,9 91,9 94,1 -1198,8
5
41,4 39,6 56,1 82,2 90,9 93,1 92,7 93,3 -2945,0
5
70,8 78,7 85,8 90,3 93,7 92,9 92,8 91,2 -1172,0
6
36,6 48,7 63,6 75,6 88,3 90,2 90,7 87,9 -3554,2
6
71,7 76,9 88,3 88,5 92,5 92,7 91,9 94,3 -1160,5
7
41,5 40,9 63,0 80,9 83,8 90,1 94,3 91,5 -3074,6
7
72,0 75,3 80,1 86,9 92,8 91,6 92,8 93,7 -1377,1
8
37,8 41,3 48,7 69,4 86,8 91,1 90,8 91,0 -3904,0
8
70,9 72,1 83,8 88,8 92,9 90,9 92,1 92,5 -1526,1
9
37,2 34,6 64,8 77,5 86,5 91,4 91,5 89,3 -3559,5
9
68,7 75,0 83,2 87,9 94,4 92,4 94,0 92,4 -1195,5
10
46,7 50,9 53,1 69,4 86,8 91,5 92,1 91,1 -3355,9
10
74,7 78,6 81,6 94,7 93,8 91,3 92,3 91,8 -1262,5
média
42,2 44,6 60,8 77,4 87,1 90,9 91,5 90,5 -3348,6
média
71,5 76,0 84,1 89,6 93,0 92,1 92,5 92,8 -1286,8
dp 5,7 7,7 9,2 6,7 2,4 1,4 1,5 2,1 434,0 dp 1,5 2,0 2,7 2,2 0,9 0,8 0,9 1,0 134,4
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
1
44,1 49,9 58,7 82,4 88,9 91,9 90,7 90,3 -3160,8
1
75,4 76,8 80,5 91,4 92,2 91,4 93,8 94,2 -1106,2
2
52,4 52,8 61,9 82,6 90,3 91,0 92,2 92,1 -2725,0
2
72,4 76,0 81,9 91,2 92,3 93,2 91,9 93,4 -1261,0
3
44,0 46,2 59,5 80,8 88,4 90,2 90,0 90,2 -3461,5
3
72,0 76,0 86,4 91,0 92,2 92,4 92,1 93,8 -1198,1
4
48,0 42,3 73,0 83,7 87,9 87,5 91,7 90,6 -3150,6
4
73,5 75,1 86,1 89,5 94,9 91,7 92,4 92,4 -1266,9
5
49,1 31,0 71,1 81,3 88,7 91,4 90,4 90,0 -3356,3
5
74,2 76,9 87,8 91,8 92,8 94,2 93,2 92,7 -920,6
6
48,1 51,9 67,5 76,6 88,9 89,3 90,9 91,2 -3117,7
6
74,7 80,9 89,4 90,5 93,5 91,7 93,2 92,1 -1010,6
7
50,6 46,8 72,9 88,1 89,6 91,4 88,4 84,4 -3363,3
7
71,8 75,1 85,5 89,8 92,1 93,9 93,0 93,3 -1089,3
8 48,3 41,6 73,9 84,1 89,3 91,0 92,5 92,8 -2657,6 8 75,1 76,7 85,0 92,3 91,5 91,3 93,3 92,8 -1161,2
9
47,9 43,3 64,9 81,8 88,9 92,2 91,1 87,1 -3266,4
9
73,1 71,1 85,1 91,9 93,6 92,5 92,6 92,8 -1253,8
10
48,6 49,0 74,8 80,4 86,8 91,7 88,2 86,7 -3390,4
10
74,9 79,2 89,6 91,0 94,5 92,9 93,2 90,3 -1033,5
média
48,1 45,5 67,8 82,2 88,8 90,7 90,6 89,5 -3165,0
média
73,7 76,4 85,7 91,0 93,0 92,5 92,9 92,8 -1130,1
dp 2,6 6,4 6,2 2,9 1,0 1,4 1,4 2,6 274,6 dp 1,3 5,7 3,2 0,7 0,6 0,3 0,4 1,7 118,5
Dentifrício - 500 ppmF 0,1% TMP
Dentifrício - 500 ppmF 0,25% TMP
Dentifrício - 500 ppmF 0,5%TMP Dentifrício - 0 ppmF 0,5%TMP
Dentifrício - 0 ppmF 0,25%TMP
Dentifrício - 0 ppmF 0,1%TMP
Dentifrício - 500 ppmF Placebo
Anexos
65
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆Z
1 53,7 51,3 73,7 82,5 89,6 91,4 89,7 91,3 -2812,9 1 79,8 80,2 86,6 93,0 92,8 93,0 94,0 92,1 -822,5
2 49,8 64,5 76,3 81,2 85,2 90,8 90,3 88,5 -2772,6 2 79,9 72,7 89,0 91,5 95,3 93,8 93,0 93,3 -899,1
3 47,0 55,6 73,1 87,6 89,7 90,1 90,2 89,0 -2851,0 3 77,3 82,1 89,9 91,1 92,8 92,9 91,4 91,9 -1090,8
4
48,9 63,0 79,7 80,7 87,5 90,5 90,2 91,5 -2575,4
4
78,5 85,0 89,8 91,2 93,8 93,1 92,2 91,3 -927,0
5
47,9 59,0 75,4 82,5 91,3 90,8 91,9 92,3 -2386,5
5
79,7 81,2 89,5 93,9 93,2 92,8 94,6 92,8 -628,1
6
52,6 48,2 63,5 81,3 92,1 90,2 92,9 92,4 -2724,5
6
80,3 78,7 91,0 94,2 92,0 92,2 93,9 92,9 -763,1
7
52,5 63,6 74,2 82,0 88,3 89,0 92,8 89,9 -2492,0
7
79,7 79,8 89,7 92,2 93,5 93,0 93,2 92,9 -810,5
8
54,0 54,0 61,6 71,0 83,4 95,0 94,3 92,5 -2544,3
8
79,9 80,2 90,9 92,9 93,5 91,2 91,6 94,3 -988,9
9 52,4 63,0 76,8 84,4 89,3 88,9 85,7 89,8 -3181,0 9 80,9 79,7 88,9 91,9 94,0 94,1 94,0 92,8 -656,4
10
52,5 49,5 66,2 82,3 84,0 86,9 93,7 93,0 -2885,8
10
78,9 82,2 88,5 92,5 93,5 93,0 92,0 92,2 -961,3
média 51,1 57,2 72,0 81,5 88,0 90,4 91,2 91,0 -2722,6 média 79,5 80,2 89,4 92,4 93,4 92,9 93,0 92,7 -854,8
dp 2,5 6,3 6,1 4,2 3,0 2,1 2,5 1,6 231,8 dp 1,0 3,2 1,3 1,1 0,9 0,8 1,2 0,8 153,4
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
1 52,8 49,4 70,2 82,9 89,5 89,5 90,6 91,3 -2943,3 1 87,4 84,0 92,0 93,4 94,9 91,1 93,7 91,2 -717,8
2 45,7 57,5 70,3 86,6 93,3 92,2 92,1 90,6 -2403,2 2 88,1 83,9 93,0 93,0 92,3 91,1 92,8 92,8 -766,5
3 56,3 53,3 71,6 84,4 91,1 91,9 90,6 88,8 -2727,0 3 89,2 86,0 90,7 91,0 93,3 92,9 91,7 92,9 -772,9
4 51,3 61,7 75,8 90,1 90,7 89,2 90,7 91,0 -2457,4 4 89,6 80,5 89,7 91,2 92,5 94,0 94,5 92,0 -578,5
5 62,3 69,6 68,6 76,9 87,7 91,9 87,7 93,8 -2661,2 5 87,9 81,9 91,2 92,5 93,3 92,2 92,7 91,8 -832,2
6 47,3 47,3 74,3 87,8 87,9 90,8 91,0 89,0 -2897,8 6 89,1 82,7 92,0 91,4 93,6 91,2 93,2 92,9 -752,7
7 50,1 69,8 91,5 88,3 90,6 90,6 91,1 86,0 -2173,5 7 89,2 86,2 89,9 92,2 92,9 92,4 91,0 92,1 -916,2
8 60,5 52,5 73,8 80,1 83,2 88,1 92,4 89,4 -2922,7 8 88,2 87,7 92,7 91,9 92,3 93,5 93,0 92,2 -571,1
9 49,2 55,6 73,4 84,9 90,5 95,2 89,8 91,5 -2436,3 9 89,0 83,5 89,1 91,0 93,2 91,8 91,5 92,3 -986,7
10 56,3 57,0 67,1 84,2 88,9 92,2 91,7 90,7 -2545,7 10 86,8 83,8 89,8 92,2 92,4 92,6 92,3 91,9 -863,3
média 53,2 57,4 73,6 84,6 89,3 91,2 90,8 90,2 -2616,8 média 88,4 84,0 91,0 92,0 93,1 92,3 92,6 92,2 -775,8
dp 5,5 7,7 6,8 4,0 2,7 2,0 1,3 2,1 257,9 dp 0,9 2,1 1,4 0,8 0,8 1,0 1,1 0,6 133,3
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
1 54,4 66,1 87,4 89,4 89,6 89,1 90,9 90,1 -2180,5 1 90,6 89,5 93,8 91,5 92,2 93,6 92,5 93,0 -496,1
2 53,7 63,9 76,6 85,2 91,1 89,5 90,2 91,6 -2469,9 2 91,4 87,1 91,6 91,4 92,5 92,2 92,5 92,0 -722,0
3 51,9 54,0 68,0 84,4 89,0 88,4 93,0 90,4 -2739,0 3 90,8 88,7 91,9 91,6 90,8 92,2 92,3 92,0 -747,9
4 53,9 55,4 72,6 86,9 92,0 92,8 92,4 92,7 -2150,9 4 89,0 89,5 91,4 90,2 90,4 90,8 92,5 92,5 -829,3
5 51,6 54,6 65,5 75,5 89,0 92,3 92,6 92,7 -2632,4 5 90,7 90,2 91,5 90,6 93,7 91,1 92,1 90,9 -850,8
6 55,4 60,3 71,2 93,5 91,7 91,6 93,2 90,6 -2051,5 6 88,8 87,6 92,3 90,7 92,7 93,5 92,9 92,6 -579,2
7 56,5 58,9 61,9 85,5 92,6 93,1 90,8 92,2 -2468,1 7 90,1 88,7 90,6 90,2 92,1 94,5 94,9 91,5 -375,8
8 56,8 58,5 68,6 79,1 89,5 92,9 91,8 91,4 -2473,6 8 90,9 87,6 90,7 90,5 92,7 92,0 92,9 91,9 -724,6
9 53,5 51,8 71,9 86,9 90,5 93,4 90,3 92,2 -2489,8 9 90,9 87,8 93,0 92,3 92,4 92,7 92,8 91,6 -622,6
10 54,4 48,9 70,1 90,4 91,7 91,3 90,7 91,8 -2599,1 10 90,0 87,5 90,9 94,0 92,4 94,6 93,2 93,5 -382,3
média 54,2 57,2 71,4 85,7 90,7 91,4 91,6 91,6 -2425,5 média 90,3 88,4 91,8 91,3 92,2 92,7 92,9 92,1 -633,1
dp 1,7 5,4 6,9 5,2 1,3 1,8 1,1 0,9 225,3 dp 0,8 1,1 1,0 1,2 0,9 1,3 0,8 0,8 172,0
10 µm 30 µm 50 µm 70 µm 90 µm 110 µm 220 µm 330 µm
∆
∆∆
∆
Z
1 73,0 75,0 77,0 89,2 91,6 92,8 93,7 93,5 -1257,7
2 71,7 76,7 83,8 91,9 92,4 90,9 92,7 93,3 -1267,2
3 74,0 80,9 84,2 87,1 94,0 91,4 94,0 92,5 -1080,0
4 71,0 78,3 81,5 89,5 91,9 92,8 94,2 93,7 -1037,5
5 75,1 72,7 79,9 89,5 91,8 90,8 92,3 91,6 -1601,4
6 74,2 78,1 89,2 90,4 89,6 92,4 90,2 92,5 -1414,4
7 73,7 82,2 91,3 91,0 91,7 91,7 89,6 93,1 -1318,8
8 75,0 74,5 79,5 89,7 91,4 92,7 91,2 92,0 -1550,3
9 73,8 76,3 87,6 89,6 91,9 91,4 91,6 91,0 -1456,9
10 73,0 77,7 77,1 91,6 93,2 92,6 93,8 93,7 -1114,1
média 73,4 77,3 83,1 89,9 91,9 91,9 92,3 92,7 -1309,8
dp 1,3 2,9 5,0 1,4 1,2 0,8 1,6 0,9 195,9
Crest
Dentifrício - 0 ppmF 3% TMP
Dentifrício - 0 ppmF 2% TMP
Dentifrício - 0 ppmF 1%TMP
Dentifrício - 500 ppmF 2%TMP
Dentifrício - 500 ppmF 3%TMP
Dentifrício - 500 ppmF 1%TMP
Anexos
66
ANEXO J
ANÁLISE DE MICRODUREZA - %ASMH e ∆Z
Tabela 1 – Porcentagem de alteração de microdureza de superfície (%ASMH) e perda
mineral (∆Z) dos grupos submetidos à ciclagem de pH (média ± epm, n=10)
%ASMH ∆
∆∆
∆Z
Dentifrícios
0 µgF/g 500 µgF/g 0 µgF/g 500 µgF/g
0% TMP
-86,7 ± 2,0
a
-52,8 ± 4,0
e
-4040 ± 106,8
a
-1728,5 ± 82,5
e
0,1% TMP
-84,2 ± 6,2
a,b
-44,3 ± 2,6
f
-3666,6 ± 32,0
b
-1587,8 ± 65,2
e,f
0,25% TMP
-80,1 ± 4,0
b,c
-40,6 ± 2,8
f,g
-3348,6 ± 137,2
b,c
-1286,8 ± 42,5
f,g,j
0,5% TMP
-77,1 ± 5,2
c
-37,3 ± 3,1
g,h,i
-3165,0 ± 85,8
c
-1130,1 ± 37,5
g,h
1% TMP
-77,8 ± 3,3
c
-35,1 ± 3,2
g,h
-2722,6 ± 73,3
d
-854,8 ± 48,5
h,i
2% TMP
-66,4 ± 5,0
d
-31,2 ± 3,2
h
-2616,8 ± 81,5
d
-775,8 ± 42,1
h,i
3% TMP
-61,3 ± 6,3
d
-32,2 ± 2,1
h
-2425,5 ± 71,2
d
-663,1 ± 54,4
i
Crest
-42,1 ± 5,1
f,i
-1309,8 ± 61,9
j
Letras distintas indicam diferenças estatisticamente significantes entre os grupos (ANOVA
e Tukey, p<0,05).
Anexos
67
ANEXO L
VALORES MÉDIOS DO CONTEÚDO DE F, Ca E P NO ESMALTE (µmol/mm
3
)
F Ca P
0 µgF/g 500 µgF/g 0 µgF/g 500 µgF/g 0 µgF/g 500 µgF/g
0% TMP
0,070 ± 0,004
a
0,127 ± 0,009
b,c,e
22,30 ± 2,4
a,b
20,47 ± 2,3
a,b
7,84 ± 1,6
a,d
24,63 ± 4,5
b,c,d
0,1% TMP
0,081 ± 0,005
a,b
0,131 ± 0,008
c,e
16,57 ± 1,5
a
35,33 ± 7,4
a,b
11,31 ± 4,3
a,b,d
16,61 ± 2,5
a,b,c,d
0,25% TMP
0,084 ± 0,004
a,b,d
0,128 ± 0,010
c,d,e
21,23 ± 2,5
a,b
30,06 ± 6,2
a,b
8,38 ± 2,0
a,d
18,08 ± 2,7
a,b,c,d
0,5% TMP
0,073 ± 0,004
a
0,132 ± 0,008
c,e
19,96 ± 1,8
a,b
27,97 ± 5,0
a,b
6,97 ± 1,2
a
18,78 ± 2,5
a,b,c,d
1% TMP
0,083 ± 0,009
a,b,d
0,154 ± 0,009
e,f
19,65 ± 1,8
a,b
26,89 ± 4,9
a,b
12,98 ± 2,1
a,b,d
19,80 ± 3,4
a,b,c,d
2% TMP
0,089 ± 0,007
a.b,c
0,160 ± 0,010
e,f
20,02 ± 1,4
a,b
34,49 ± 7,5
a,b
8,26 ± 2,0
a,d
21,24 ± 3,5
a,b,c,d
3% TMP
0,97 ± 0,00125
a,b,c
0,181 ± 0,014
f
21,44 ± 2,6
a,b
41,37 ± 8,2
b
14,21 ± 1,1
a,b,d
29,54 ± 4,8
c,d
Crest
0,167 ± 0,013
e,f
24,19 ± 5,1
a,b
22,03 ± 3,6
d
Média±epm seguidas de letras indicam diferenças estatisticamente significantes (ANOVA, Tukey, p<0,05).
Anexos
68
ANEXO M
∆F e ∆Ca NAS SOLUÇÕES APÓS CICLAGEM DE pH (µg/g)
∆F ∆Ca
0µgF/g 500 µgF/g 0 µgF/g 500 µgF/g
0% TMP
-0,027 ± 0,002
a,b
0,010 ± 0,003
c,e
163,69 ± 57,50
a,b,d
-32,15 ± 90,57
d
0,1% TMP
-0,031 ± 0,002
a,b
-0,004 ± 0,001
c,d
314,34 ± 28,23
a,c
274,72 ± 29,48
a,b,c,e,f
0,25% TMP
-0,025 ± 0,002
a,b
0,004 ± 0,003
c,d
179,06 ± 55,37
a,b,d
-0,84 ± 129,8
d,e,g
0,5% TMP
-0,020 ± 0,005
a,d
-0,006 ± 0,004
d
321,89 ± 45,05
a,b,c
115,50 ± 149,40
d,g
1% TMP
-0,027 ± 0,002
a,b
0,001 ± 0,002
c,d
207,82 ± 43,24
b,d
188,84 ± 72,66
a,b.d
2% TMP
-0,037 ± 0,004
b
0,008 ± 0,005
c,d,e
265,81 ± 38,72
a,b,c,f
155,18 ± 40,93
d,f,g
3% TMP
-0,038 ± 0,003
b
-0,004 ± 0,002
c,d
406,25 ± 46,85
c
298,91 ± 72,62
a,b,g
Crest
0,019 ± 0,003
e
486,96 ± 201,40
a,b,g
Média±epm seguidas de letras distintas indicam diferenças estatisticamente significantes (Kruskal Wallis, p<0,05).
Anexos
69
ANEXO N
QUOCIENTE DE REAÇÃO PARA CaF
2
Des Re (1º a 5º dia) Re (6º e 7º dia)
0 µgF/g 500 µgF/g 0 µgF/g 500 µgF/g 0 µgF/g 500 µgF/g
0% TMP
1,26.10
-14
±
1,92.10
-15 a,d
1,88.10
-14
± 2,6.10
-15 e,f
7,03.10
-15
± 1,27.10
-16 a,c
1,73.10
-14
± 1,82.10
-15 b,e
1,23.10
-14
± 2,03.10
-15 a,b,c,d
1,97.10
-14
± 2,92.10
-15 b,c,d,g
0,1% TMP
9,26.10
-15
± 4,39.10
-16 b
1,91.10
-14
± 3,25.10
-15 e,f
4,17.10
-15
± 4,26.10
-16 a
1,4.10
-14
± 1,83.10
-15 b
9,65.10
-15
± 3,6.10
-16 a,c,d
1,69.10
-14
± 2,51.10
-15 c,d,e,f,g
0,25% TMP
9,5.10
-15
± 2,87.10
-16 b,c
1,83.10
-14
± 2,36.10
-15 f,g
4,65.10
-15
± 2,76.10
-16 a
1,76.10
-14
± 1,81.10
-15 b,e
9,63.10
-1 5
± 6,21.10
-16 a,c,d
1,83.10
-14
± 2,3.10
-15 d,e,g
0,5% TMP
1,36.10
-14
± 3,22.10
-15 a,c
1,83.10
-14
± 3,67.10
-15 e,f
5,07.10
-15
± 5,67.10
-16 a,d
1,34.10
-14
± 1,87.10
-15 b.c
1,03.10
-14
± 1,04.10
-15 a,c,d
1,52.10
-14
± 3,01.10
-15 a,d,g
1% TMP
1,34.10
-14
± 1,09.10
-15 a,e
1,53.10
-14
± 1,06.10
-15 e,f
3,82.10
-15
± 2,66.10
-16 a
1,13.10
-14
± 1,29.10
-15 b,c,d
9,51.10
-15
± 6,02.10
-16 a,c,d
1,15.10
-14
± 8,12.10
-16 a,d
2% TMP
9,25.10
-15
± 1,67.10
-15 b,c,d
1,79.10
-14
±1,31.10
-15 f,g
2,79.10
-15
± 1,83.10
-16 a
1,47.10
-14
± 1,36.10
-15 d,e
9,35.10
-15
± 1,51.10
-15 a,c
9,87.10
-15
± 6,62.10
-16 a,e
3% TMP
1,05.10
-14
± 2,47.10
-16b,c,d
1,68.10
-14
± 1,21.10
-15 f,g
3,87.10
-15
± 6,6.10
-16 a
1,17.10
-14
± 1,04.10
-15 b
6,67.10
-15
± 3,54.10
-16 e
8,84.10
-15
± 3,19.10
-16 a,f
Crest
2,99 .10
-14
± 5,33.10
-15 g
2,1.10
-14
± 2,18.10
-15 e
2,12.10
-14
± 3,07.10
-15 g
Média±epm seguidas de letras distintas indicam diferenças estatisticamente significantes (Kruskal Wallis, p<0,05).
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