11
sendo realizada em ambiente sombreado, onde as plantas ficam por um período
variável de 15-30 dias e, posteriormente, são levadas para área de pleno sol,
onde ocorre a rustificação e o crescimento (DUTRA et al., 2009).
As plantas lenhosas, que contemplam grande parte das frutíferas, inclusive
a mangabeira, tem dificuldades relevantes para o estabelecimento in vitro,
principalmente devido à contaminação e oxidação, por isso a utilização de
técnicas de micropropagação são estratégias importantes para solucionar
problemas de propagação, também melhoramento genético e da biotecnologia
das plantas, principalmente de lenhosas e perenes (ERIG e SCHUCH, 2003).
2.8 Meio de cultivo
De acordo com Pasqual et al. (1998) toda a planta de uma forma geral, é
autotrófica, necessitando para o seu desenvolvimento de um substrato que
contenha os sais minerais essenciais, água, gás carbônico e luz. No entanto, ao
se cortar parte desta planta para cultivá-la in vitro ou a utilização de sementes e
embriões observa-se que os explantes não são autotróficos e por isso necessitam
também de elementos essenciais, constituintes orgânicos e energia (sacarose).
O meio de cultivo é composto por seis componentes básicos, são eles:
macronutrientes (N, P, K, S, Ca, Mg, Fe), micronutrientes (Mn, Zn, B, Cl, Mb, Co e
I), açúcares (sacarose, glicose ou frutose), vitaminas e aminoácidos (tiamina,
niacina, piridoxina, glicina e Mio-inositol.) e reguladores de crescimento (auxinas e
citocininas) (PASQUAL et al.,1998; TOMBOLATO e COSTA, 1998).
O meio MS (MURASHIGE e SKOOG, 1962) é um dos mais utilizados
porque contém todos os nutrientes essenciais ao desenvolvimento do explante e
por ser responsável por bons resultados para várias espécies.
O carvão ativado também é recomendado no cultivo in vitro sendo
importante para evitar a oxidação que é a reação do oxigênio com íons metálicos
(+) dos outros compostos do meio de cultivo. Os explantes ao serem inoculados
no meio de cultura podem liberar exudatos que tornam o meio de cultivo escuro,
sendo conseqüência da liberação de fenóis dos ferimentos ocasionados no
processo de extração dos explantes (SANTOS, 2001).
Portanto, as sementes, embriões, gemas e tecidos são estabelecidos em
meios de cultivos diversos, alguns estudos com diferentes espécies apontam que