( PDF ) Ontogenia comparada do esplancnocrânio, aparelho de Weber e esqueleto caudal de três espécies de Otophysi, com ênfase em Siluriformes (Pisces, Teleostei)"

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UNIVERSIDADEDESÃOPAULO

FFCLRP–DEPARTAMENTODEBIOLOGIA

PROGRAMADEPÓS‐GRADUAÇÃOEMBIOLOGIACOMPARADA

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Ontogeniacomparadadoesplancnocrânio,aparelhodeWebereesqueletocaudalde

trêsespéciesdeOtophysi,comênfaseemSiluriformes(Pisces,Teleostei)

VolumeI(TextoeApêndice)



MurilodeCarvalho



Tese apresentada à Faculdade de Filosofia,

CiênciaseLetrasdeRibeirãoPretodaUSP,como

partedasexigênciasparaaobtençãodotítulode

DoutoremCiências,Área:BiologiaComparada.



RIBEIRÃOPRETO–SP

2010

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UNIVERSIDADEDESÃOPAULO

FFCLRP–DEPARTAMENTODEBIOLOGIA

PROGRAMADEPÓS‐GRADUAÇÃOEMBIOLOGIACOMPARADA

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Ontogeniacomparadadoesplancnocrânio,aparelhodeWebereesqueletocaudalde

trêsespéciesdeOtophysi,comênfaseemSiluriformes(Pisces,Teleostei)

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MurilodeCarvalho

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Orientador:Prof.Dr.FlávioAlicinoBockmann

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Tese apresentada à Faculdade de Filosofia,

CiênciaseLe

trasdeRibeirãoPretodaUSP,como

partedasexigênciasparaaobtençãodotítulode

DoutoremCiências,Área:BiologiaComparada.

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RIBEIRÃOPRETO–SP

2010

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ADVERTÊNCIA

Estetrabalhoé apresentadocomopartedosrequerimentosparaobtençãodograude

doutor, e não é pretendido ser uma publicação científica. Portanto, os novos dados,

opiniõese  hipótesesexpressasaquiNÃOestãodisponíveisnaliteraturazoológica.Os

leitores são advertidos que a cópia ou a pública  referência à este documento na sua

presente forma, sem a prévia concordância do seu autor, será feita contrária ao seu

desejo.



NOTICE

This work is presented in partial fulfillment of the dissertation requirement for the

Ph.D.degree,andisnotintendedasascientificpublication.Therefore,thenewdata,

opinions,

and hypotheses expressed herein are NOT available in the zoological

literature. Readers are advised that further copying or public reference to this

documentinitspresentform,withoutpreviousagreementofhisauthor,willbedone

inviolationofhiswill.





ÀminhaamadaesposaLuciana,pelo

imensurávelapoioecompanheirismo.





‘Allthatwecallphylogenyistoday,and

everhasbeen,ontogenyitself.Ontogenyis,

then,theprimary,thesecondary,the

universalfact.Itisontogenyfromwhichwe 

departandontogenytowhichwereturn.

Phylogenyisbutanameforthelineal

sequencesofontogeny,viewedfromthe

historicalstandpoint’

Whitman,1919



‘Fourmyopicevolutionistslookedat

evolution.Onesaid,‘Itissurvivalofthe

fittest’.Onesaid,‘Itisdifferential

reproduction’.Onesaid,‘Itischangeingene

ratios’.Andonesaid,‘Itisamolecular

process’.Theyallsawsomethingreal,but

eachmagnifiedwhathesaw,andnonesaw

evolutionasawhole’.

Darlington,1980



‘Thebodyofevolutionarytheorythatcurrently

occupiesadominantpositioninbiological

thoughtisneo‐Darwinism.Whilethetheoryhas

considerableexplanatorypower,itiswidely

recognizedasbeingincompleteinthatitlacksa

componentdealingwithindividual

development,orontogeny’

Arthur,1997



Resumo

R ESUMO

A superordem Ostariophysi inclui os peixes popularmente conhecidos como

carpas, matrinxãs e lambaris, bagres e cascudos, peixes elétricos, além daqueles

incluídos na ordem Gonorynchiformes. Otophysi é um subclado que inclui somente

quatroordensdepeixes,emsuamaioriadeáguadoce(Cypriniformes,Characiformes,

SiluriformeseGymnotiformes),excluindoosGonorynchiformes.Algunsestudossobre

asrelaçõesentreestasordenstêmsidofeitos.Noentanto,éunânimeaposiçãomai

s

basal da ordem Cypriniformes. Os Otophysi compartilham um complexo morfológico

único,oaparelhodeWeber.OaparelhodeWeberéconstituídodeelementosósseos

homólogos aos arcos neurais e  parapófises das vértebras mais anteriores. Estas

estruturas são fortemente conectad

as umas às outras por ligamentos e servem de

ligação entre a bexiga natatória e o ouvido interno. Dentre as ordens citadas acima,

Siluriformes é uma das mais diversificada, com várias modificações anatômicas

fisiológicas e comportamentais. Os seus membros possuem ampla distribuição por

todos os continentes, inclusive o Antártico (como representantes fósseis), mas sua

maior diversidade se encontra na região Tropical. Existe  pouco consenso sobre as

relaçõesinterfamiliares,masDiplomystidaeéreconhecidacomoalinhagemmaisbasal

da ordem. Raros são os estudos ontogenéticos que possuem um enfoque evolutivo,

ondecomparaçõessãofeitasafimdesesolucionardúvidasmaisgeraiscomrelaçãoàs

homologias e filogenias. Adicionalmente, trabalhos com ontogenia podem fornecer

dados diretamente aplicados em taxonomia. Com a utilização de caracteres

ontogenéticos, o presente fornece dados inéditos  que ajudam no esclarecimento de

homologiasdecertasestruturasdosesplancnocrânio,aparelhodeWebereesqueleto

caudaldeexemplaresdeOtophysi.





Abstract

A BSTRACT

The superorder Ostariophysi includes fishes popularly known as carps, tetras,

catfishes, armored catfishes, electric fishes, beyond those included in the order

Gonorynchiformes. Otophysi is a subclade that includes only four orders of fishes,

mostly freshwater (Cypriniformes, Characiformes, Siluriformes and Gymnotiformes),

excluding Gonorynchiformes.Somestudiesontherelationshipbetweentheseorders

have been made. However, it is unanimous the most basal position in the order

Cypriniformes. The Otophysi share a unique morphological complex, the Weberian

apparatus. This apparatus is formed by bony elements homologous to the neural

archesandparapophysisofanteriorvertebrae.Thesestructuresarestronglyattached

to each other by ligaments linking the swim bladder to the inner ear. Among the

orders mentioned above, Siluriformes is one of the most diverse, with many

anatomical physiological and behavioral changes. Its members are widely distributed

on all continents, including Antarctica (as fossil representatives), but its greatest

diversity is found in tropical region. There is little consensus about interfamilial

relationships,butDiplomystidaeis recognizedasthe most basallineageofthe order.

The ontogenetic studies having an evolutionary approach are rare, with comparisons 

beingmadeinordertoaddressmoregeneralquestionsregardingthehomologiesand

phylogenies.Additionally,workingwithontogenymayprovidedatadirectlyappliedin

taxonomy. With the use of ontoge netic characters, the present study provides new

data that help in clarifying homologies of some structures of splanchnocranium,

Weberianapparatusandcaudalskeletonofotophysanspecies.





Agradecimentos

iii

A GRADECIMENTOS

Expressomeussinceros  agradecimentos àsInstituiçõesepessoasque, mesmo

queindiretamente,colaboraramparaarealizaçãodestetrabalho.Emespecial:

Aos meus pais, Julio César e Dalva que me deram toda a  formação inicial,

possibilitandoqueeudesenvolvessemeucarátereminhas responsabilidadessempre

deformalivreecomtotalsuporte,visandoarealizaçãodemeuideal.

À minha esposa Luciana. Sem dúvida a pessoa mais ativa em minha vida e a

quem devo inúmeros agradecimentos, tanto durante essa tese quanto em nossas 

experiências pessoais conjuntas. Seu grande amor, carinho, companheirismo,

compreensãoeapoioincondicionaisforam(esão)deextremaimportânciaparameus

projetosprofissionaisepessoais.

A todos os parentes adquiridos após o casamento, meus sogros Ari e Vera,

cunhadoe“primos”,especialmenteEstelaeAdriano.

Ao meu orientador Prof. Dr. Flávio Alicino Bockmann, a quem serei

eternamente grato. É simplesmente impossível citar a quantidade adquirida de

conhecimento biológico e amadurecimento pessoal durante nosso (longo) convívio.

Isso, sem dúvida, é devido ao fato de ser uma pessoa de índole extremamente

positiva,acessível,incentivadoreabertoàsdiscussões.

Ao Dr. Yoshimi Sato, responsável pela Estação de Piscicultura de Três Marias

(CODEVASF/CEMIG),MG.Semesta amávelpessoal,estatesenãoseriapossívelemsua

totalidade,umasvezqueamaioriadomaterialanalisadofoiprovenientedestecentro

dereproduçãodepeixes.

AoDr.LaerteBatistadeOliveiraAlves,diretordoCentroNacionaldePesquisae

Conservação de Peixes Continentais (CEPTA) que autorizou minha participação no

grupo coordenado pelo Dr. José Augusto Senhorini  com reprodução de peixes. Esta

vivencia me proporcionou um conhecimento mais amplo sobre técnicas de cultivo e

reproduçãodepeixes,além de valiosa torça de experiênciascomoutrasáreas,como

genéticaeembriologiadepeixes.



Agradecimentos

AosDrs.OsvaldoT.OyakawaeMárioC.C.dePinna(MZUSP)porpermitireme

auxiliarem minhas visitas à coleção de peixes, com especial agradecimento a este

último pelas discussões adicionais e motivação. Estendo esta gratidão a todos os

(ex)alunos da seção de peixes do MZUSP: pela ajuda, amizade, empréstimos de

literatura e inúmeras discussões. Em especial ao Dr. Flávio Lima que me forneceu

material adicional que foi utilizado no presente estudo e será de extremo valor em

trabalhosfuturos.

Aosegressos doMZUSP Drs.FábiodiDarioeCristianoMoreira.Estaspessoas,

de cuja amizade muito me orgulho, contribuíram de forma ímpar nesta tese, me

apontandopontosdevistadiferentesedisponibilizandoliteraturasdiversasatéentão

desconhecidaspormim.

UmagradecimentomuitoespecialeudedicoàtécnicaemhistologiaVaniM.A.

Corrêa, do Laboratório de Histotecnologia do Departamento de Biologia Celular e

Molecular de Bioagentes Patogênicos da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto –

USP.Alémdeseruma pessoaexemplar,elafeze meorientouem todaa preparação

histológica presente neste estudo. Com isso, meu conhecimento de técnicas em

histologiafoilargamenteampliado.

OutrapessoaaquemsouextremamentegratoéoProf.Dr.PauloTambascode

Oliveira, professor associado do Departamento de Morfologia, Estomatologia e

Fisiologia da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP) da USP. Sempre

disposto a  ajudar, mesmo que  não tenha relação direta com seus estudos, sua

participação em minha formação foi ímpar, colaborando na identificação das

estruturas histológicas e mecanismos de ossificação, inserção de musculatura em

ossos,etc.

AoDr.RalfBritzeseualunoPeterKonstantinidisdoNaturalHistoryMuseumde

Londres, Inglaterra auxiliando em minha visita a esta instituição, além de diversas

conversas sobre peixes, comportamento,  cultivo, desenvolvimento e anatomia

comparada,que abriramhorizontesnosníveisdediscussãodestatese,evidenciandoa

importânciadeantigosestudosdeanatomia,osquaissão,atualmente,negligenciados

namaioriadosartigos.



Agradecimentos

Ao Thomas Grünbaum, doutorando do Département de Biologie, Chimie et

GéographiedaUniversitéduQuébec.Nossaconvivência,aindaquelimitadaàduração

docongressointernacionaldeIctiologiaeHerpetologiadaASIH,possibilitoudiscussões

profundas a respeito do desenvolvimento, em especial, de estruturas do esqueleto

caudal e, como este pesquisador lida com táxons basais, o conhecimento de tais

táxonsaumentousignificativamenteasdiscussõesdestatese.

BoapartedasimagensdestatesefoiobtidanolaboratóriodoProf.Dr.Dalton

S. Amorim, sob assistência deste docente e sua técnica  Maria Isabel P. de Andrade

Balbi (Bel). Agradeço também a todos os alunos daquele laboratório que dividiram 

suasexperiênciasetempocomigo.

Agradeço especialmente à Nair Silva de Oliveira, funcionária da Biblioteca

Central do campusda USPde RibeirãoPreto,atuandonoserviço de empréstimosde

literatura entre diversas instituições(COMUT). Sua ajuda (e de todo o COMUT) foi, e

tem sido, de valor inestimável. Sem a vasta quantidade de artigos obtidos por este

sistema,asdiscussõesteriamsidomuitoinferiores.

A todos meus amigos de laboratório, sem exceção e cujos nomes não citarei

individualmente para evitar esquecimentos. Ressalto, no entanto, um especial

agradecimento a alguns, cuja convivência  foi mais próxima: Hertz F. dos Santos,

Micheli Beccari, Adriana Takako, Alexandre Ribeiro, Katiane Ferreira e Marcel

Cavallaro.Alémdenossalongaamizade,citoonomedoAléssioSilva,poispartilhamos

interesses comuns sobre anatomia de peixes e tivemos muitas conversas sobre o

assuntoemuitomeajudounasidentificaçõesdosmúsculos.

AoMarceloR.deCarvalhoesuaesposaMary,cujaamizadeecompan

heirismo

foramfundamentaisemminhavidapessoaleprofissional.

AoAlanHadley,pelodesenvolvimentoedisponibilizaçãográtisdosoftwarede

montagem de imagens CombineZP, sem o qual seria impossível a obtenção das

imagensaquipresentes.



Agradecimentos

AograndeamigoLuizOmarGonçalvesque,comsuashabilidadesímparescomo

torneiro mecânico confeccionou o adaptador da câmera digital para a lupa,

possibilitandoaaquisiçãodeimagensdigitais.

À Diretoria de Fauna e Recursos Pesqueiros – DIFAP/IBAMA que concedeu a

licença de coleta e transporte de material biológico (Processo IBAMA/MMA n°

02027.001524/2006‐49).

Ao programa de pós‐graduação em Biologia Comparada da Faculdade de

Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto –  USP por ajuda no financiamento em

participaçõesemeventos, comooXVIIEncontro BrasileirodeIctiologia, realizadoem

Itajaí.RessaltoaimportânciadoscoordenadoresProfs.Drs.JohnCampbellMcNamara

e Márcia Maria Gentile Bitondi, além da secretária Renata Aparecida de Andrade

Cavallari e funcionários da secretaria de pós‐graduação Míriam Cristina Osório de 

Souza e Carlos Augusto C. de Carvalho Almada por invariavelmente auxiliarem nos

assuntosadministrativos.

Ao Departamento de Biologia da FFCLRP‐USP, por oferecer espaço para o

desenvolvimentodoatualprojeto,assimcomo a todos osdocentes,cujaconvivência

foidevalorsubstancialparameucrescimentopessoaleprofissional.

Por fim, mas com a mesma importância, ao Conselho Nacional de

DesenvolvimentoCientíficoeTecnológico(CNPq)doMinistériodaCiênciaeTecnologia

(MCT),pelaconcessãodoProgramadeCapacitaçãoemTaxonomia,aoqualabolsade

doutorado(pr

oc.nº140415/2006‐8)estávinculada.



 



Conteúdo

vii

C ONTEÚDO

RESUMO................................................................................................................................I

ABSTRACT.............................................................................................................................II

AGRADECIMENTOS.................................................................................................................III

CONTEÚDO..........................................................................................................................VII

INTRODUÇÃO........................................................................................................................1

Ostariophysi..................................................................................................................1

OntogeniaeEvolução...................................................................................................4

TrabalhosontogenéticosemOstariophysi,comênfaseemSiluriformes..................12

Sinapomorfiasdecrânio,aparelhodeWebereesqueletocaudaldeOstariophysi..15

CrâniodosSiluriformes...............................................................................................17

OBJETIVOS..........................................................................................................................29

MATERIALEMÉTODOS.........................................................................................................31

MaterialExaminado....................................................................................................31

Fasesdedesenvolvimento..........................................................................................36

Técnicasdepreparação..............................................................................................39

ProtocolosdeHistologia.............................................................................................42

Procedimentoinicial...............................................................................................42

ColoraçãocomHE...................................................................................................43

ColoraçãocomTricrômicodeMallory....................................................................44

ColoraçãodeVonKossa..........................................................................................45

Ilustraçõesefotografias.............................................................................................47

Terminologiaanatômica.............................................................................................49

RESULTADOS–DESENVOLVIMENTO DOESPLANCNOCRÂNIO..........................................................54

Desenvolvimento do esplancnocrânio de Prochilodus argenteus, incluindo

condrocrânioeosteocrânio........................................................................................54

Desenvolvimento do esplancnocrânio de Pseudoplatystoma coruscans, incluindo

condrocrânioeosteocrânio........................................................................................91

Desenvolvimento do esplancnocrânio de Lophiosilurus alexandri, incluindo

condrocrânioeosteocrânio......................................................................................113

DISCUSSÃOECONCLUSÕES–DESENVOLVIMENTODOESPLANCNOCRÂNIO.....................................128



Conteúdo

viii

Consideraçõesgerais.............................................................................................128

Condrocrânio............................................................................................................131

Arcopré‐mandibular.............................................................................................131

Arcomandibular....................................................................................................132

Arcohioide............................................................................................................135

Arcosbranquiais....................................................................................................137

Elementosmedianosdosarcosbranquiais.......................................................137

Elementospareadosdosarcosbranquiais........................................................140

Osteocrânio...............................................................................................................156

Arcopré‐mandibular.............................................................................................158

Arcomandibular....................................................................................................158

Arcohioide............................................................................................................166

Elementosmedianosdacestabranquial..............................................................167

Sériesopercularepreopercular............................................................................170

Arcosbranquiais....................................................................................................171

RESULTADOS–DESENVOLVIMENTO DOAPARELHODEWEBER.....................................................174

DesenvolvimentodosossículosdoaparelhodeWeberemProchilodusargenteus.174

Desenvolvimento dos ossículos do aparelho de Weber em Pseudoplatystoma

coruscans..................................................................................................................184

Desenvolvimento dos ossículos do aparelho de Weber em Lophiosilurus alexandri.

..................................................................................................................................194



DISCUSSÃOECONCLUSÕES–DESENVOLVIMENTODOAPARELHODEWEBER..................................210

Consideraçõesgerais.............................................................................................210

Scaphium...............................................................................................................213

Intercalarium.........................................................................................................214

Claustrum..............................................................................................................217

Tripus.....................................................................................................................220

Ossuspensoriumeparapófisedaquartavértebra...............................................223

Complexoneural...................................................................................................226

Porçãodorsaldacinturapeitoral..........................................................................229

RESULTADOS–DESENVOLVIMENTO DOESQUELETOCAUDAL.......................................................232

DesenvolvimentodoselementosdoesqueletocaudalemProchilodusargenteus.232



Conteúdo

Desenvolvimento dos elementos do esqueleto caudal em Pseudoplatystoma

coruscans..................................................................................................................240

Desenvolvimento dos elementos do esqueleto caudal em Lophiosilurus alexandri.

..................................................................................................................................247

DISCUSSÃOECONCLUSÕES–DESENVOLVIMENTODOESQUELETOCAUDAL....................................254

Consideraçõesgerais.............................................................................................254

Formaçãodocentrovertebralcomplexodoesqueletocaudal............................255

Espinhosneuraiseepurais....................................................................................260

Arcosneuraiscaudaiseuroneural........................................................................262

Arcoshemaisearcodoparipural.........................................................................265

Espinhoshemais,paripuralehipurais..................................................................265

Finfolderaiosdanadadeiracaudal......................................................................270

APÊNDICE.........................................................................................................................271

Esqueletodérmicoeendoesqueleto........................................................................271

Esqueletocranianoepós‐craniano..........................................................................271

Componentesdoesqueletocraniano...................................................................272

Condrocrânio.....................................................................................................272

Esplancnocrânio.................................................................................................273

Dermatocrânio...................................................................................................274

Esqueletopós‐craniano.........................................................................................275

CartilagenseOssos–detalhamento........................................................................278

LITERATURACITADA...........................................................................................................284

FIGURAS..........................................................................................................................329 



Introdução

I NTRODUÇÃO

Ostariophysi

A superordem de  Teleostei, Ostariophysi (Fig. 1) possui 5 ordens, 68 famílias, 

1.075 gêneros e mais de 7.931 espécies descritas. Isto representa 68% da ictiofauna

mundialdeáguadoceou28%dototaldeespéciesconhecidasdepeixes(Fink&Fink,

1981, 1996; Lauder & Liem, 1983; Nelson, 1994; 2006). Suas espécies ocorrem em

todas as massas de terras ao redor do mundo, exceto Antártica,Groenlândia e Nova

Zelândia (na Austrália estão presentes algumas poucas espécies de bagresderivados,

secundariamente, de grupos marinhos),  sendo praticamente restritas à água doce,

com apenas 123 espécies marinhas (Nelson, 2006). Uma série de espécies são

encontradas em ambientes subterrâneos, conforme reportado por Proudlove (2006)

quelistoucercade135espécieshipógeasdescritasatéaanode2004.

Regan (1911a, 1911b) propôs uma classificação para Ostariophysi, que incluía

quatro grandes grupos, hoje  elevados a categoria de ordens: Cypriniformes (carpas,

dojôs), Characiformes (tetras, lambaris, pacus, piranhas), Siluriformes (bagres,

cascudos) e Gymnotiformes (tuviras, sarapós, poraquês). Greenwood  et al. (1966)

concluíram que Gonorynchiformes e os então Ostariophysi compartilhavam um

“padrãocomum”,sugerindo ummesmoancestral“salmoniforme”.Maistarde,Rosen

& Greenwood (1970), em um estudo mais extenso sobre as relações filogenéticas

destes dois grupos concluíram que Gonorynchiformes e Ostariophysi  seriam grupos‐

irmãos. Então, criaram o nome Anotophysi para os Gonorynchiformes, que seria o

grupo‐irmão do clado Otophysi, que incluiria as ordens que compartilhavam entre si

complexas modificações nas quatro vértebras anteriores, que adquiriram estreita

associação com o ouvido interno, chamadas coletivamentedeaparelhodeWeber (v.

abaixo). Esta nova hipótese foi criticada por alguns autores (e.g. Gosline, 1973;

Roberts, 1973a), que diziam que as evidências apresentadas não eram conclusivas,

tornando,destemodo,Ostariophysiumgrupoartificial.Fink&Fink(1981)estudaram

as intrarrelações dos Ostariophysi com uma abordagem cladística, corroborando seu

monofiletismo e postulando algumas mudanças nas suas relações internas. Algumas

hipótesessobrerelaçõesentreseusgrupos queeramamplamenteaceitas,comopor



Introdução

exemplo, os ‘gimnotoides’ serem considerados ‘caracídeos’ altamente derivados (e.g.

Regan, 1922; Weitzman, 1962), foram refutadas por estes autores. Segundo Fink &

Fink (1981), Cypriniformes seria a ordem mais basal de Otoph ysi, seguido por

Characiformes, Siluriformes e Gymnotiformes, comogrupos‐irmãos menos inclusivos,

sucessivamente(Fig.1).

Entre os principais caracteres compartilhados pelos representant

es de

Ostariophysi estão as modificações das vértebras e costelas anteriores. Nos

Gonorynchiformes, a primeira costelapleural,que articula com a terceira vértebra,é

expandida e suporta um peritônio espessado, que contata anteriormente a bexiga

natatória(Lauder&Liem,1983).EstegrupofoiextensamenteestudadoporGrande&

Poyato‐Ariza (1995, 1999) que corroboraram seu monofiletismo. Supõe‐se que estas

modificações nas vértebras mais anteriores sejam precursoras daquelas que

configuramoaparelhodeWeber,presentenos

Otophysi.OcomplexodeWeber(Fig.

2)éconstituídoporelementosósseoshomólogosaosarcosneurais,costelaspleuraise

suas parapófises (Rosen & Greenwood, 1970). Estas estruturas são fortemente

conectadas umas às outras por ligamentos e servem de ligação entre a bexiga

natatória e o ouvido interno. Com isso, movimentos diferenciais da membrana da

bexiga natatória causam oscilações no complexo de Weber que são transmitidas ao

ouvidointerno,permitindoaospeixesperceberemvibraçõesdiferenciadas.

Patterson (1984) conclui que o táxon por ele descrito, a espécie fóssil

Chanoidesmacropoma,doEocenodaItália,seriaogrupomaisbasaldeOtophysi,pois

apresentariamodificaçõesnasquatroprimeirasvértebraseestruturasassociadasque

seriam precursoras do aparelho de Weber, numa condição mais avançada do que

aquelapresentenosGonorynchiformes.

Em uma série de trabalhos, Gayet (e.g. 1980, 1982a, 1982b) criticou as

hipóteses de Fink & Fink (1981), postulando diversas origens independentes do

aparelho de Weber em Ostariophysi. Estas suposições não tiveram respaldo de

nenhum outro trabalho e foram refutadas por Fink et al. (1984). Além disso, Fink &

Fink (1996), em uma reanálise de seu trabalho prévio de 1981, reafirmaram suas

hipótesessobreomonofiletismodeOstariophysiesesuasinter‐relações.



Introdução

Algunstrabalhosposteriores,emqueforamanalisadoscaracteresmoleculares

(e.g. Dimmick & Larson, 1996; Ortí, 1997; Saitoh et al., 2003), propuseram relações

diferentes entre os Ostariophysi, com Gymnotiformes e Characiformes formando um

clado,oqualseriaogrupo‐irmãodeSiluriformes.Contudo,estesconcordaramcoma

posiçãobasaldeCypriniformes.Saitohetal.(2003)sugeriram,ainda,queOstariophysi

não seria monofilético, uma vez que  Gonorynchiformes seria o grupo‐irmão de

Clupeomorpha e estes, juntos, constituiriam o grupo‐irmão de Otophysi. Porém, este

clado possui baixa sustentação,  como citado pelos próprios autores. Di Dario (2004)

concordou que Ostariophysi seria parafilético,  porém, demonstrou, com base em

caracteres morfológicos, que Clupeomorpha seria o grupo‐irmão de Otophysi –

tambémrelatadoporLecointre(1995),baseadoemdadosmoleculareseporLecointre

& Nelson (1996) – e que Gonorynchiformes seria o grupo‐irmão do clado

Clupeomorpha+Otophysi.

Dentre os Ostariophysi, Siluriformes é uma das ordens mais diversificadas e

com várias modificações anatômicas fisiológicas e comportamentais. Vulgarmente

conhecidos como bagres, cascudos, piraíbas, filhotes, jaús, mandis etc., esta ordem

inclui 36famílias,commaisde478 gênerosaproximadamente3.093espéciesválidas

(Ferraris, 2007). Os seus membros possuem ampla distribuição por todos os

continentes, inclusive o Antártico, com representantes fósseis (Grande & Eastman,

1986).Contudo,amaiordiversidadeencontra‐senaregiãoTropical,principalmentena

AméricadoSul,Áfricasub‐SaharianaesudestedaÁsia(dePinna,1998).Somentenas

Américas registram‐se cerca de 1.727 espécies (Nelson, 2006). As espécies habitam

principalmenteáguasdoces,masduasfamíliassãoprimariamentemarinhas(Ariidaee

Plotosidae), cujos representantes também são encontrados

 em águas salobras e,

secundariamente, em água doce (alguns Ariidae). Algumas espécies que possuem

sabidamente glândulas de veneno, que podem infligir sérios problemas, decorrentes

deferimentoscomseusespinhos(principalmenteosdanadadeirapeitoral).Oveneno

é produzido por células glandulares no tecido da epiderme que recobre os espinhos.

Destacam

‐seasespéciesHeteropneustesfossilisdaÍndia,quetemumcomportamento

agressivo e cuja perfuração pelo espinho causa terríveis dores. Adicionalmente,



Introdução

ferimentos pelos espinhos de Plotosus lineatus podem ser fatais (Perrière & Goudey‐

Perrière,2003).

Emboraomonofiletismodaordemsejaumahipótesemuitobemcorroborada,

existe pouco consenso sobre as relações interfamiliares. São também aceitas as

hipóteses sobre a posição de Diplomystidae como a linhagem mais basal de

siluriformes(e.g.Arratia,1987),arela

çãodeHypsidoridaecomogrupo‐irmãodetodos

osbagresexcetoDiplomystidae(Grande,1987,aindaquecontestadaporMo,1991),e

omonofiletismodassuperordensLoricarioideieDoradoidei(e.g.dePinn a,1993,1998;

Britto, 2003). No entanto, apenas a primeira hipótese é amplamente aceita, e

dificilmenterefutável.Alguns autoresaquestionaram (cf.Diogo,2005;

Sullivanet al.,

2006)masestesquestionamentosnãoforam seguidospordeficiênciasnasevidências

apresentadas.Asprincipaishipótesessobreasintrarrelaçõesdossiluriformes,comoos

trabalhos citados acima são baseadas exclusivamente em caracteres anatômicos.

Recentemente, novas hipóteses para as intrarrelações desta ordem têm sido feitos

baseados em dados moleculares (e.g. Hardman,2005;Sullivan etal.,2006, 2008). As

hipóteses baseadas em morfologia e em DNA  mitocondrial são amplamente

divergentesentresi.

OntogeniaeEvolução

ComoreportadoporGilbert& Levit(2007),aideiade que o desenvolvimento

está intimamente relacionado com evolução data dos tempos da proposta formal da

teoria da evolução por Darwin. Thomas H. Huxley, em 1893, já pensava em um nível

diferente deDarwin,assumindoquemudanças anatômicasnosorganismosdeveriam

resultar de mudanças durante seus desenvolvimentos. Pode‐se dizer que a atual

abordagem entre a ontogenia e filogenia teve início após o livro de Gould (1977) –

OntogenyandPhylogeny– noqualoautordescreveosprocessosdodesenvolvimento

conforme foram sendo conhecidos, assim como os paralelos traçados historicamente

entreeleseoentendimentodasrelaçõesdeparentescodosorganismos.

A metodologia cladística é hoje o paradigma para o estabelecimento de

hipóteses sobre as relações filogenéticas entre os organismos. O conhecimento do

sentido das transformações entre os diferentes estados, ou seus diferentes níveis de



Introdução

homologia, é um aspecto fundamental para a construção de hipóteses sobre as

relações filogenéticas entre os organismos. Complementando o tema levantado por

Gould (1977), Humphries (1988) edita o livro Ontogeny and Systematics, onde a

discussão do tema ont ogenia  e seu uso para os estudos evolutivos é feita sob a

perspectiva cladística da época. Destacam‐seo capítulo de Kluge (1988) que sumaria

conceitos do desenvolvimento e o capítulo de Roth (1988), no qual são discutidos

definições e problemas de homologia. O tema homologia em si é tratado de forma

detalhada em um livro mais recente editado por Hall (1994) – Homology: The

Hierarchical Basis of Comparative Biology. Discute‐se a homologia desde contextos

históricos,conceitosrelacionadoscommorfologia,função,desenvolvimentoebiologia

molecular. Este tema nunca alcançou uma opinião unânime e continua sendo

debatido. Como apontado por Wiley (2008), “os conceitos de homologia são como

conceitos de espécies; o debate parece durar eternamente sem qualquer resolução

real”. A discussão de  conceitos de homologia, principalmente aliada a estudos de

biologiacomparadadodesenvolvimento,voltouàtonaemdiversosartigospublicados

em números especiais da revista Theory in Biosciences (e.g. Ghiselin, 2005; Richter,

2005;Rutishauser&Moline,2005;Scholtz,2005),entreoutros(e.g.Haszprunar,1992;

Shubin, 1994). Estes artigos mantêm a discussão da relação entre homologia e

ontogenia. Neste aspecto a ontogenia é normalmente vista como uma sequência de

estágiosevolutivosindependentes(e.g.Brigandt,2007;Graham,2010).

A informaçãoontogenéticapossuitrêsusos básicos. Pode esclarecer questões

de homologias primárias (Wiley, 1981; Mabee, 1989), servir como fonte adicional de

caracteres para se elucidar as relações históricas ou servir para a polarização das

transformações dos caracteres. Esta última muito mais usada na cladística (Kluge,

1985;Williamsetal.,1990),aindaqueoesclarecimentodashomologiasprimáriasseja

o seu uso mais comum. Independente do usodaontogenia para se inferir filogenias,

sempreháasuposiçãoqueosestadossãosempremodificados umporvez,atravésde

adiçõesoudeleçõesduranteasequênciadeformação(Mabee,1989).Algunsautores

postulam ainda que a ontogenia propriamente dita constitui o único critério válido

para a obtenção de cladogramas que é totalmente livre de suposições apriorísticas



Introdução

sobre o monofiletismo do grupo‐interno ou sobre as relações em níveis mais

abrangentes(cf.Nelson&Platnick,1981;Pinna,1994).

Para a determinação da polaridade dos caracteres, algumas metodologias

forampropostas.Dentreestasmetodologias,oscritériosontogenéticos(acessodireto

ao tempo) e de grupo‐externo (acesso indireto ao tempo) são as mais utilizadas e

aceitas como logicamente válidas (cf. Nelson, 1978; Watrous & Wheeler, 1981;

Weston,1988).Hácontrovérsiassobrequantoométodoontogenéticopodesermais

precisoqueométododogrupo‐externo(“acessoindiretoaotempo”)( e.g.deQueiroz,

1985;Kluge,1985).Historicamente,ocritérioontogenético, asemelhançadométodo

do grupo‐externo, foi mais frequentemente abordado como um método de

polarizaçãoindividual de caracteres para seraplicadoantesda análise de parcimônia

(Ferrarezzi & Marques, 1997). Contudo, Pinna (1994) propôs que sua aplicação

também pode ser vista sob uma perspectiva de enraizamento de árvores. De acordo

com este autor, a incorporação de informações sobre sequências de transformações

ontogenéticas, impõe restrições aos possíveis pontos de enraizamento,

preferencialmenteaumaúnicaposiçãoquesejaamaisinclusiva.

Para a avaliação da polaridade  dos estados dos caracteres é frequentemente

recomendado analisar o curso do desenvolvimento ontogenético do caráter (Kluge,

1985;Wägele,2005).EstaideiapodeseratribuídaaocritériodaLeiBiogenética(ouLei

daRecapitulação),propostaporHaeckel(1866):“ontogeniaéumarecapitulaçãocurta

e rápida da filogenia”. De  acordo com este critério, um estado embrionário de um

caráterpodeserconsideradomaisprimitivoqueemestadoqueocorremaistarde

no

desenvolvimentodoindivíduo.Narealidade,arelaçãodaontogenia comosendouma

recapitulação das transformações evolutivas, já havia sido proposta por von Baer no

final da década de 1820, que observou que as características dos estágios

embrionários iniciais seriam compartilhadas por um grande grupo que

compartilhassem o mesmo ancestral e que as caracterís

ticas mais tardias, seriam

exclusivas de um grupo mais restrito. Como discutido por Løvtrup (1978), uma

generalizaçãodasleisdeVonBaerpoderiaserdequeoembrião,duranteaontogenia,

passasse por mudanças graduais a partir de um estágio mais geral para um mais

especializado. A discussão sobre as leis da recapitulação de Haeckel e Von Baer é



Introdução

amplaetemsidomantidapordécadas,estandoforadoobjetivodopresenteestudo.

Sugiro o acesso a alguns artigos e às referências lá citadaspara um aprofundamento

nestetema(e.g.Holmes,1944;Løvtrup,1978;Poe,2006).

Destaco,adicionalmente,aimportânciadoanatomistaalemãoCarlGegenbaur

(1826‐1903) em seus estudos sobre anatomia e desenvolvimento comparados. A

grandereputaçãodeGegenbaurfoibaseadamaisemsuasideiassintéticasqueemsua

pesquisa anatômica propriamente dita. Seus ideais eram estudos de morfologia

comparada baseados  nas teorias evolutivas de Darwin e nos métodos comparativos

desenvolvidospreviamentepor pesquisadorescomoGeorge Cuvier,JohannesMüller,

entre outros(Hofeldetal.,2003). Entre suas inúmeras contribuiçõesparaa ciência,

destaca‐se a fundação do periódico “Morphologische Jahrbücher”, no qual foram

publicados diversosartigossobremorfologiacomparada,além de suasideiassobrea

segmentação da cabeça dos vertebrados. Fora isso, com sua linha  de pesquisa

integrando dados de diversas áreas do conhecimento, com colaborações com outros

grandes pesquisadores da época, como Haeckel, foi fundada a “Gegenbaur school”.

Esta escola teve fundamental importância na formação de estudos comparados,

integrando anatomia comparada e embriologia sob uma perspectiva evolutiva.  Os

desdobramentos da influencia de Gegenbaur fogem ao escopo do presentetrabalho,

mas recomendo a consulta a diversos artigos sobre o tema (e.g. Di Gregorio, 1995;

Breidbach, 2003; Ghiselin, 2003; Hofeld et al., 2003; Laubichler, 2003; Mitgutsch,

2003;Nyhart,2003).

As leis de ‘recapitulação’, no entanto, não são válidas, necessariamente, para

todos os caracteres nem para todos os organismos, uma vez que modificações

ontogenéticas, como heterocronia, podem levar a interpretações errôneas sobre

polaridade dos estados (e.g. Fink, 1982; Mabee, 1993; Kovác, 2002). Nelson (1978)

propôsqueparaumadadatransformaçãoontogenéticadeumcaráter,deumestado

mais geral para um estado menos geral, a condição mais geral seria a primitiva e a

menos geral, a derivada, seguindo, de certo modo, o proposto por von Baer. Vário s

trabalhostratamdestepostulado(e.g.Watrous&Wheeler,1981;Meier,1997).



Introdução

EmumarespostaàLeiBiogenética,Garstang(1922)lançaafrase“aontogenia

não recapitula a filogenia, ela a cria”. Com isso, fica clara a mudança de perspectiva

com relação à interpretação de mudanças durante o desenvolvimento e seus

significados evolutivos. Northcutt (1990; 1992) em um artigo com abordagem

filogenética atual reafirma o postulado de Garstang, no sentido em que toda

ontogeniaevoluieafilogeniarealdeveserbaseadanastransformaçõesevolutivasna

ontogenia. O sucesso de Garstang em unir informações de áreas até então distantes

entre si em um único esquema foi um dos principais responsáveis pelo atual

entendimento, em última instância, da origem dos vertebrados e relações com os

gruposmaispróximos–e.g.equinodermas(cf.Gee,1996).

Durante o progresso do pensamento relacionando as informações

ontogenéticas com as relações de parentesco, alguns pontos de discussão foram

levantados. Destaco a lei de Dollo, tratando sobre a irreversibilidade da perda de

caracterescomplexos,ouseja,aimpossibilidadedeumorganismoretornaraoestado

idêntico à condição ancestral, e a lei de Cope, dos estados não especializados que

seriam novidades evolutivas em novos táxons e que aparentemente derivariam de

ancestrais mais generalizados ao invés de ancestrais mais especializados. A regra de

Cope, de que há uma tendência dos animais aumentarem em tamanho durante a

evolução carrega conotações de progresso, tendências e aumento na complexidade,

enquantoaregradeWilliston(1914,1925)sugerequeháumadiminuiçãononúmero

de partes serialmente repetidas conforme as diferentes partes dos indivíduos se

especializam durante a evolução No entanto, os conceitos básicos já estavam

presenteshátemposnospensamentosdenaturalistascomoTreviranus,MeckeleVon

Baer (década de 1820). Adicionalmente, várias exceções a estas regras já foram

reportadasparaváriosgruposdeorganismosconformecomentadoporMinelli(2003)

eindicoaconsultaaestaliteraturaparaumaprofundamento.

Dollo (1893) propôs que órgãos, outras estruturas complexas e, logo,

organismos como um todo, não podem retornar auma condição idêntica à condição

ancestral. Este princípio  foi também enunciado pelo anatomista e zoólogo Hans

Gadow.ApropostadeDolloeraaaplicaçãodeseuprincípioparaaperdadeestruturas



Introdução

complexas e órgãos inteiros. No entanto, atualmente, a lei de Dollo é geralmente 

aplicadaparaqualqueraspectodereversibilidadenaevolução.

A lei de Dollo se aplicava particularmente à paleontologia, que estuda, quase

queexclusivamente,amorfologiaeinterpreta suasaparentestendênciasdemudanças

evolutivas.Oreaparecimentodeestruturas perdidas nosancestrais(como o segundo

molar em felídeos), estruturas atavísticas (como membros em serpentes, membros

posterioresembaleiasedígitosadicionaisemcavalos), ou reversões filogenéticasde

caracteresdeixamclaroqueaperdadeumaestruturanãonecessariamentesignificaa

perda da capacidade de se formar tal estrutura. Logo, a lei de Dollo tem uma

implicaçãoontogenéticafundamental:traçosde estágios de desenvolvimentopodem

estarretidosnosdescendentes,especialmentecomoestruturasancestraisemestágio

iniciaisdaontogenia(Hall,1999).

AregradeCope,propostaporEdwardCopeemtrabalhosnasdécadasde 1870

e 1880, postula que os animais tendemaaumentarde tamanho durante a evolução.

Cope via as leis da evolução firmemente apoiadas em mudanças regulares da

embriologia,aoinvésdevariaçõesaleatórias.

Aideiadequeosprocessosevolutivos,culminandoemeventosdeespeciação,

frequentementeocorrammaisrapidamenteemespéciesanimaisdepequenoportefoi

testadaecorroboradaporalgunstrabalhosmaisatuais.Stanley(1973)levantaaideia

dequenovaslinhagenssãofundadaspororgani smosdetamanhoreduzido.Emoutro

trabalho (Arnold et al., 1995), os autores concluíram que o aumento de tamanho

proposto pela regra de Cope seria uma consequência de uma maior resposta

adaptativa das espécies de menor porte com gerações curtas. O tamanho estaria

relacionado com as mudanças evolutivas, mas não as causava. As características

ontogenéticasde geraçõescurtasenãoaadaptaçãorelacionadaaotamanhodocorpo 

emsi,resultarianospadrõesdeaumentodocorpoduranteaevolução.

A lei de Dollo ilustra como, no nível dos mecanismos do desenvolvimento, as

transformaçõesontogenéticasproduzemmudançasfilogenéticas.Diantedetaisleise

regras lidando mais com desenvolvimento que com evolução, Patterson (1983)

argumenta que a ontogenia difere da filogenia por ser “conservadora”, enquanto a



Introdução

filogenia seguiria “trilhas aleatórias”. Este autor, em sua extensa revisão sobre as

discussõesdorelacionamentodaontogeniacomafilogenia,enfatizaqueamaioriadas

leisevolutivastambémenglobaaontogenia,poistratamdecrescimento,tamanhose

especializações dos indivíduos. Atavismos,  reversão de caracteres filogenéticos, e a

reativação de genes “silenciados”, também indicam como o conhecimento dos

processosdodesenvolvimentorevelaabaseontogenéticadaleideDollo.

Alguns aspectos da evolução dos organismos são mediados pelo

desenvolvimento, incluindo o desenvolvimento em si, estágios e processos

embrionários, morfologia (seja embrionária, larval ou de adultos) e plasticidade

fenotípica(Hall,1999).Aplasticidadefenotípica,incluindoasmudançasresultantesde

interações entre tecidos embrionários (cf. Maderson, 1975), tem sido alvo de vários

estudos recentes para se compreender seu papel nas respostas a mudanças

ambientaisque, emumaescalamaisampla,estádiretamenterelacionadaàevolução

dosorganismos(e.g.Fusco&Minelli,2010etodaliteraturalácitada).

Todoindivíduoé criadodurantesuaontogenia,conformeelasedesenvolvede

umprimórdiofenotipicamente homogêneopara umadultocomplexoeheterogêneo,

de acordo com o programa genético, herdado dos pais e de acordo com leis

(independentes do tempo) de geometria, física e química. Originalmente, o termo

evoluçãosereferea todo desdobramentoontogenético.Porém,atualmente,seu uso

implica em um processo filogenético de transformação (cf. Bowler, 1975). Ontogenia

cria complexidade estrutural e, ao fazê ‐lo traduz um programa genético que inclui

informações históricas, em relações físico‐químicas e posicionais. Os genes servem

comotransmissoresdestainformaçãodeumageraçãodeorganismosparaapróxima,

querepresentaumalinhagemevolutiva.Logo,osignificadoduplodotermo‘evolução’ 

mostra a relação de reciprocidade entre ontogenia e filogenia (Rieppel, 1988; 1990).

Rieppel(1990)sintetizaemumparágrafo:“Qualquermudançanas‘leisdaconstrução’,

mudanças nos padrões de desenvolvimento, causam uma mudança filogenética na

linhagem representada pelo desenvolvimento do(s) organismo(s): ontogenia cria a

filogenia.Cadamudançafilogenéticaqueafetaumalinhagemevolutivaé refletidana

mudançadaontogeniado(s)organismo(s)querepresentamaquelalinhagem:filogenia

criaontogenia”.



Introdução

Emboraaontogeniasejaodesenvolvimentoindividualeafilogenia,asrelações

evolutivas, uma vez que se consideram os mecanismos das mudanças através do

tempo em diferentes organismos, as duas estão conectadas. Esta “nova” abordagem

científica foi sintetizada por Hall (1999) dentro da “biologia evolutiva do

desenvolvimento” ou “evolutionary developmental biology”, mais conhecida como

“evo‐devo”.Estaescolamultidisciplinarsintetizaoconhecimentogenômicoebiologia

molecular do desenvolvimento doorganismo(comoopapeldosgenesHox–Carroll,

1995), da população e abordagens de seleção natural para o entendimento das

mudanças evolutivas. Esta área tem recebido muita atenção nos últimos anos, com

tentativas de propostas que  unifiquem  o conhecimento evolutivo (cf. Carroll, 2000).

Como normalmente acontece com propostas novas em ciência, o assunto tem sido

debatidoequestionado(cf.Sandvik,2000;Pigliucci,2007;Müller,2007).

Dentreasdiscussõesmaisrecentessobreoentendimentododesenvolvimento

comparado no intuito de se recuperar possíveis transformações históricas, está a

questão da modularidade. As mudanças envolvidas no desenvolvimento podem ser

vistas em quase todos os níveis hierárquicos, desde padrões anatômicos até genes e

suas funções nos programas de desenvolvimento. A noção da modularidade é vista

recentemente como um possível complemento entre os genes e o resultado

fenotípico. Os módulos são definidos como “unidades semiautônomas” conectadas

entre si formando o sistema final (e.g. Klingenberg, 2008; Kuratani, 2009). Estes

módulos são definidos em diferentes contextos, como genéticos, morfológicos,

desenvolvimentoefuncionais.Alémdisso,osmódulosfrequentementepodemevoluir

(no sentido de sofrerem mutações) independentemente. Por exemplo, as asas dos

morcegos como sendo uma modificação de um módulo da cintura peitoral,

 ou a

mandíbuladosgnatostomadossendoumamodificaçãodomódulodeumarcovisceral

(arcomandibular).

O conceito de homologia morfológica está profundamente associado à

modularidade. Os corpos dos animais são modificados a partir de um plano básico

corporal, que é, por sua vez, constituído de elemento

s comparáveis que são

entendidos como módulos homólogos (cf. Hall, 1999). Logo,  entender como as inter‐

relações entre os diferentes tipos de módulos e como eles se modificaram com os



Introdução

processosevolutivos,passaaseropontodemaior interessenestaabordagem,sendo

alvodediversosestudosatuais(e.g.Bolker,2000;Schlosser&Thieffry,2000;Amodeo

et al., 2001; Gilbert & Bolker, 2001; Beldade et al., 2002; Kuratani, 2009). O

entendimento desta questão ainda não pode ser concluído, mas o conceito de

modularidade deixa claro que a evolução tende a ser muito sutil e lenta e sempre

modificando estruturas previamente presentes, sem a necessidade deexplicaçõesde

grandessaltosdetransformaçãoou“macroevolução”nosentidomaisamplo.

TrabalhosontogenéticosemOstariophysi,comênfaseemSiluriformes

Trabalhos que utilizam a informação ontogenética são produzidos há muito

tempo,masemsuagrandemaioria,comumenfoquenabiologiadodesenvolvimento

ou biologia molecular, nos quais os objetivos são voltados para o conhecimento de

expressões de genes ou de como determinadas proteínas demarcam os eixos ou 

posições nos embriões (e.g. Burke et al., 1995; Ahn & Gibson, 1999; Jeffrey et al.,

2000; Davis et al., 2004; Davis et al., 2007; Keller et al., 2008; Ghosh et al., 2009).

Existem,poroutrolado,algunstrabalhosdecunhodescritivo,deimportânciaparaas

indústrias da piscicultura e pesca que são focalizados principalmente no

reconhecimentodamorfologiaexternadealgunsestágioslarvares(e.g.Mago‐Lecciaet

al., 1986; Moser, 1996; Nakatani et al., 2001; Arockiaraj et al., 2003; Richards, 2006;

Fahay, 2007; Taguti et al., 2009) ou ainda em alimentação das larvas (e.g. Cobcroft,

2002). Outros se restringem aos aspectos da morfologia externa, como o estudo de

Lundbergetal.(2004),quedescrevem,pelaprimeiraeúnicavez,jovensdeum bagre

primitivo da família Diplomystidae. Sob abordagem cladística, a maioria dos estudos

ontogenéticos são realizados com intuito de esclarecer problemas particulares de

homologia de determinadas estruturas (e.g. Britz & Johnson, 2002, 2003, 2005a,

2005b; Johnson  & Britz, 2005; Pinna & Grande, 2003). Fora isso, os grupos mais

estudados não são representantes de Ostariophysi. Há alguns trabalhos mais

descritivos de desenvolvimento embrionário e/ou morfologia de larvas, até  mesmo

cominformaçõessobreososurgimentograndescomplexosanatômicos(formaçãoda

boca, SNC, olho, etc.), porém pouco ou nada é comentado sob aspecto de biologia 

comparadaoumesmodecunhototalmentedescritivo(p.ex.descrevendoemdetalhes

os tecidos que formam determinadas estruturas) (cf. Godinho et al., 1978; Santos &



Introdução

Godinho, 1994, 2002; Borçato et al., 2004; Ninhaus‐Silveira et al., 2006; Alexandre et

al.,2009;Guimarães‐Cruzetal.,2009;Gomesetal.,2010).

Rarossãoosestudosontogenéticosquepossuemumenfoqueevolutivo,onde

comparaçõescomgrandesgrupossãofeitasafimdesesolucionardúvidasmaisgerais

com relação às filogenias. Além disso, alguns destes trabalhos são meramente

descritivos anatomicamente (ainda que bem elaborados) e não utilizam uma

metodologia cladística, a  qual foi proposta por Hennig (1950), mas que só foi

largamente utilizada após a tradução e revisão de sua obra (Hennig, 1966, 1968).

Exemplos de alguns trabalhos importantes sobre ontogenia de Ostariophysi são

arroladosaseguir.Kindred(1919)estudouaspectosdodesenvolvimentodocrâniode

Amiurus [=Ameiurus], um  bagre ictalurídeo. Outra grande contribuição foi a de

Bamford(1947),comseuestudodedesenvolvimentocranianodeGaleichthys[=Arius]

felis,umbagreariídeomarinho.Bertmar(1959),estudandocrâniosdecaracídeoscom

enfoque filogenético muito próximo do atual (sintetizado por Hennig) também

elucidou várias lacunas no conhecimento do desenvolvimento de certas estruturas.

Posteriormente, alguns autores indianos publicaram vários estudos importantes com

representantesdealgumasfamíliasdebagres(e.g.Srinivasachar,1955,1956a,1956b,

1958,1959a,1959b).Maisrecentementeumcentroquetemsedestacadoemestudos

ontogenéticos mais descritivos é a Ghent University, na Bélgica, de onde são

publicadostrabalhosprincipalmentecom um bagreafricanoqueé criadonestelocal,

dogêneroClarias(e.g. Adriaensetal.,1997;Adriaens&Verraes,1994,1996;1997a;

1997b; 1997c; 1997d; 1997e, Geerinckx et al., 2005, 2007a, 2007b; 2008, 2009;

Geerinckx&Adriaens,2007,2008;Huysentruytetal.,2008,2009a;2009b).Foraestes,

um grupolideradoporRalfBritz também colaboracomoaumento do conhecimento

nestaárea(e.g.Bartsch&Britz,1997;Britz,1994;Britz,1996;Britz,1997;Britzetal.,

2000; Britz & Bartsch, 1998; Britz & Bartsch, 2003; Britz & Hoffmann, 2006; Britz &

Johnson,2002;Britz&Johnson,2003;Britz&Johnson,2005a;Britz&Johnson,2005b;

Britz&Johnson,2010;Gemballa&Britz,1998;Hiltonetal.,2007a;Hoffmann&Britz,

2006;Johnson&Britz,2005;Johnson&Britz,2010;Moritz&Britz,2005;Rüberetal.,

2007; Schnell et al., 2010), assim como trabalhos isolados de outros autores (e.g.

Grande&Pinna,2004;Pinna&Grande,2003;Pinna&Ng,2004;Royero,1987).



Introdução

Adicionalmente, trabalhos com ontogenia podem fornecer dados diretamente

aplicados em taxonomia, principalmente para os grupos que possuem

desenvolvimento indireto e as formas larvais não são conhecidas. Existem espécimes

queforamdescritoscomonovasespéciesouatémesmonovosgênerosefamílias,mas

que na verdade não passam de formas juvenis ou larvais de adultos previamente

descritos. Destaca‐se o trabalho de Johnson et al. (2009) que descreve um exemplo

extremode metamorfoseempeixesmarinhosdeprofundidade.Com isso,osautores

concluem que espécies, originalmente descritas em três famílias distintas, são, na

verdade,formaslarvais, machoefêmeada mesma espécie.Nestamesmalinhapode

sercitadoo trabalho deIwatsukiet al.(2001)quesinonimizaram espéciesdeGerres,

após constatarem que eram variações de forma que ocorriam durante o

desenvolvimento. Outro exemplo de estudos de desenvolvimento em peixes é o de

Baldwin & Johnson (1995), no qual o conhecimento da morfologia de estágio iniciais

dodesenvolvimentoajudanoentendimentodasrelaçõesentreosBeryciformes.Entre

os siluriformes, um exemplo é o pimelodídeo Pteroglanis manni, descrito por

Eigenmann&Pearson(1924)comoumnovogêneroeespécie.Lundbergetal.(1989)

verificaramque este peixe tratava‐se de um representantejuvenilde Sorubimichthys

planiceps (Agassiz, in Spix & Agassiz, 1829). Neste mesmo trabalho os autores

reafirmam a importância de estudos na sistemática filogenética, que enfatizem

informaçõesdedesenvolvimento.

É relevante mencionar que a morfologia dos Siluriformes adultos, em

particular,é,quandocomparadaàsdosdemaisOtophysi,maissimplificada.Assume‐se

quemuitoselementosusualmentep

resentesnosdemaisOtophysiforamperdidosou

estãofundidosaoutroselementosnosbagres.Éocaso,porexemplo,doparietal,que

seacreditaestarcoossificadoaosupraoccipital(Bamford,1947),edaausênciadoosso

simplético (Fink & Fink, 1981). No entanto, estas generalizações são baseadas em

poucos trabalhos, especialmente naqueles de Kindred (1919) e Bamford (1947). Mais

rece

ntementealgunstrabalhostêmcontribuídoemespecialparaoentendimentodas

transformações nos bagres.DestacoasériesdeartigosdeArratia(e.g.Arratia, 1982;

1990;2003a;2003b;2003c; Arratia&Schultze,1990; 1991;Schultze&Arratia, 1989)

osquaissãodiscutidosnopresenteestudo.



Introdução

Sinapomorfiasdecrânio,aparelhodeWebereesqueletocaudaldeOstariophysi.

Aseguirsãoenunciadasediscutidasalgumascaracterísticassinapomórficasdo

crânio e do esqueleto pós‐craniano dos Ostariophysi, com especial ênfase naqueles

atributos que são passíveis de ser investigados sob a perspectiva da ontogenia

comparada.

O aparelho de Weber, originalmente descrito por Weber (1820) é

sinapomórfico do subgrupo Otophysi (sensu Rosen & Greenwood, 1970). O aparelho

deWeberéderivadodeumasériedemodificaçõesdoscentrosvertebraisanteriorese

elementosassociados, comoosarcosneurais, supradorsais,supraneuraise processos

transversosqueterminamporconectarabexiganatatóriaaoouvidointerno.

Desteselementos,destacam‐sequatroparesdeossículos,emsequêncialinear,

dispostoscontralateralmentenaporçãoanteriordacolunavertebraleconectadospor

ligamentos interossiculares: claustrum, scaphium, intecalarium e tripus (Chranilov,

1926; Alexander, 1962). Alguns experimentos demonstraram como esses ossículos

atuam, possibilitando a audição nos peixes, através da condução de vibrações da

bexiga natatória ao ouvido interno (e.g. von Frisch, 1923; 1938; Stetter, 1929; von

Frisch&Stetter,1932).Otripuscaptaasvibraçõesdabexiganatatóriaeastransmite

ao intercalarium. Deste, as vibrações são transmitidas ao scaphium e, finalmente,  ao

ouvidointerno(Rosen&Greenwood,1970;Ladich&Wysocki,2003).Oclaustrumestá

posicionado dorsalmente ao scaphium. Sua origem é controversa e discutida em

alguns trabalhos recentes (e.g. Pinna & Grande, 2003; Grande & Young, 2004;

Hoffmann&Britz,2006;Britz&Hoffmann,2006).

As origens durante o desenvolvimento e homologias do aparelho de Weber

têm sido debatidas desde sua descrição, em 1820 por Weber. Bamford (1947), por

exemplo, reportou que o scaphium em siluriformes seria formadopelo basidorsal do

primeirocentrovertebral,enquantoVandewalleetal.(1990)disseramqueoreferido

ossículoseriaformado,emcipriniformes,peloprimeirobasidorsalcomadiçãodeuma

ossificação do mesênquima do crânio. Alguns trabalhos atuais até mesmo sugerem

que,emalgunsgrupos,oaparelhodeWeberpodenãoserestruturalmentehomólogo

(e.g.Coburn&Futey,1996;Chardon&Vandewalle,1997;Grande&Shardo,2002).No



Introdução

entanto,admitirqueumaestruturatãocomplexacomoessatenhasurgido,durantea

evolução,diversasvezes,semprecoma mesmafunçãoearticulações,nãoéahipótese

mais parcimoniosa e, consequentemente, não teve aceitação na comunidade

científica. Diante disso, o atual estudo vem adicionar mais informações sobre o

desenvolvimentodestecomplexoestrutural,visandoajudaroseuentendimento.

A literatura sobre os padrões de desenvolvimento do crânio (compreendendo

condrocrânioeesplancnocrânio)edoesqueletoaxial (incluindoaparelhodeWebere

esqueleto caudal), compartilhados pelos Ostariophysi é relativamente escassa. Com

relação aos complexos morfológicos acima mencionados, os seguintes caracteressão

considerados sinapomórficos de Ostariophysi (e.g. Fink & Fink, 1981; 1996): ausência

da porção dérmica do palatino (ou dermopalatino). Nos teleósteos primitivos, como 

Elops e Denticeps, o palatino consiste de uma porção condral (autopalatino) e uma

porçãodérmica(dermopalatino)queestãofundidas.Ausênciadosupraneuralanterior

ao arco neural da vértebra mais anterior (supraneural 1). Ausência do arco neural

destacado,anterioraoarcodoprimeirocentrovertebral.Fusãodetodososespinhos

hemaisanterioresaoespinhodosegundocentropré‐uralaosseusrespectivoscentros.

OcladodosOtophysié sustentadoporalgumassinapomorfiascomo:oformato

da porção condral do metapterigoide em forma de machado, com duas cabeças

(maioria dos cipriniformes e caraciformes) ou uma, quando a parte posterior foi

perdida (siluriformes e gimnotiformes). Em teleósteos primitivos, o metapterigoide

tem forma aproximadamente retangular com uma borda cartilaginosa contínua ao

longo da hiomandíbula, simplético e quadrado. A formação do complexo neural

(“neural complex”, sensu Nelson, 1948), a partir de modificações da área acima do

cordão nervoso; modificação do primeiro arco neural, formando o scaphium e o

claustrum. O claustrum seria formado pela porção dorso‐medial deste arco neural,

tambémconhecidacomoprimeirosupradorsal(Britz&Hoffmann,2006).Oclaustrum

está secundariamente ausente em gimnotiformes. O segundo arco neural está

modificado e reduzido, tendo perdido seu respectivoespinho.Assupostasestruturas

que derivam desta modificação estão voltadas ventralmente e contribuiriam para a

formação do intercalarium (i.e. Coburn & Futey, 1996). As duas parapófises mais

anteriores, quando presentes, estão fundidas aos centros. Nos teleósteos primitivos,



Introdução

essas parapófises estão presentes como elementos livres. A costela e parapófise do

terceiro centro são alongadas anteriormente. A costela está truncada  distalmente e

um processo posterior fino e curvado posteriormente (processo transformador)

contataa bexiganatatória.Aossificaçãoresultanteformaotripus.Acostelapleuralda

quarta vértebra está reduzida e fundida à parapófise, apresentando um processo

mediano,oossuspensorium.Oesqueletocaudalpossuiumcentroterminalcomplexo,

consistindo da fusão doprimeiro centro pré‐ural, primeiro e segundo centros urais e

umpardeuroneurais.

Parao cladoCharaciphysi(Characiformes+Siluriformes+Gymnotiformes)são

consideradas sinapomorfias: o único supraneural modificado está inclinado

anteriormente e se articula com a margem posterior do crânio. O scaphium se

estendendo anteriormente até a borda do primeiro centro vertebral. A margem

anterior do terceiro arco neural situando‐se próxima da borda posterior do

neurocrânio, devido ao encurtamento das primeiras três vértebras. Fusão do arco

neural da quinta vértebra ao seu centro. Tal fusão não é observada nas vértebras

anterioresànadadeiradorsalnamaioriadosteleósteosprimitivos.Ligaçãodaporção

que corresponde à parapófise  do tripus ao centro vertebral por uma fina e flexível

lamelaósseaque seprojetapóstero‐dorsalmentedocentro.Fusão doespinho hemal

do primeiro centro pré‐ural, juntamente  com o paripural e o primeiro hipural ao

centrovertebralcomplexo.

OcladodosCharaciformesésustentadopelapresençadeumprocessoântero‐

dorsaldoterceiroarconeural,queseprojetalateralmenteaoprocessoascendentedo

intercalarium. Outros teleósteos normalmente possuem uma pequena pré‐zigapófise

nestaposição.Ohipural1encontra‐selivredocentrocomplexo.

NosGymnotiformesoclaustrumestáausente.

CrâniodosSiluriformes

Geralmente, o estudo do crânio de vertebrados, particularmente, de peixes

Osteichthyes é restrito a partes do esqueleto de animais adultos. Compilações das



Introdução

contribuições ao conhecimento da ontogenia do condrocrânio de peixes podem ser

encontradasemalgunsestudos(cf.deBeer,1937;Daget,1964).

Ocrâniodosbagres(Siluriformes)apresenta‐semuitomodificadoeclaramente

distintosecomparadoàquelesdeoutrospeixesteleósteos(e.g.clupeomorfos,outros

ostariofisianosetc.).Apesar das variações,ocrânio derepresentantesdesiluriformes

apresentam um padrão de depressão dorso‐ventral, com consequente redução dos

olhos(cf.Adriaens&Verraes,1997d).

O “achatamento” precoce do crânio faz com que as barras trabeculares

contralaterais permaneçam separadas da região orbito‐temporal durante a maior

parte do desenvolvimento. Uma placa intertrabecular as une, anteriormente,

formandoumagrandefenestrahipofisal(“hypophyseal”)(cf.Arratia,2003a).Estetipo

decrânioéchamadodeplatibásico(=plati‐trabecular),quediferedotipotropibásico

(=tropido‐trabecular)encontradona maioriadosteleósteos(Daget,1964).Otetodo

crânioégeralmenteespessoe possuisomenteumelementoalinhadocomosfrontais

posteriormente, o osso supostamente  complexo parieto‐supraoccipital (cf. Bamford,

1947; Fink & Fink, 1981; 1996). Acredita‐se que o parietal se funde ao supraoccipital

duranteodesenvolvimento(cf.Bamford,1947),porémaindanãohánenhumtrabalho

conclusivo a esse respeito. Junto a isso há um característico osso achatado

anteriormente,omesetmoide,comoqualapré‐maxila,tambémachatada,seconecta.

O osso maxilar está geralmente atrofiado e, com exceção de Diplomystidae e

Hypsidoridae,nãoportadentes,característicatambémderivadadaordem.

Acredita‐se que a maior parte das mudanças estruturais no crânio platibásico

estão associadas, de alguma forma, às adaptações ao modo de vida bêntico,

aumentando a estabilidade quando o peixe fica no fundo, ajudando também a

diminuir o arrasto nas águas com maior correnteza (Alexander, 1965). Adriaens &

Verraes(1994)citamtambéma perda,duranteaontogenia,dointer‐hialemalgumas

linhagenscomosendooutraadaptaçãodosbagresparaavidaemambientesbênticos.

Alia‐seaissoohábitonoturno,implicando,emalgunscasosnareduçãodosolhosou

atémesmosuaperda,caráteressecompartilhadopelosgimnotiformes.Areduçãoda

capacidade visual é provavelmente compensada pela presença de um grupo de



Introdução

barbilhõesorais, que possuem órgãos gustativos e sensoriais (Alexander, 1965; Ghiot

& Bouchez, 1980). Os barbilhões maxilares fazem parte do mecanismo palatino‐

maxilar, que possibilita uma mobilidade controlada. Esse mecanismo se desenvolve

pelaseparaçãotantodoselementosesqueléticosquantomuscularesdapartepalatina

nopalato‐quadrado(Gosline,1975;Fink&Fink,1981;Arratia,1992)(vidediscussão).

Outrasestruturasósseasdocrâniosãomuitodistintasnosbagres,comoasdo

suspensório‐mandibular. Em Teleostei, o suspensório e o arco palato‐quadrado,

juntos, correspondem a sete ossos: a hiomandíbula, o simplético, o quadrado, o

metapterigoide, o entopterigoide (também referido como mesopterigoide), o

ectopterigoide(referidotambémcomopterigoide)eopalatino.Destes,sãoossospré‐

formados em cartilagem (condrais), a hiomandíbula, o quadrado, o simplético e o

metapterigoide. O ecto‐ e entopterigoide se ossificam dentro da fascia palatal (ossos

membranosos)eopalatinotemorigemdupla.NosSiluriformes,oquadradonuncase

desenvolve como um elemento separado, sendo mantido fundido à hiomandíbula

(Srinivasachar,1958;1959b).

EmSiluriformes,o“ectopterigoide”eoentopterigoide,segundoArratia(1992),

exceto em Diplomystidae, possuem uma  origem ontogenética diferente de seus

homônimosnosdemaisteleósteos,sendoformadosporossificaçõesmembranosasde

um ligamento. O ectopterigoide se ossifica como uma placa, ventralmente à porção

média da cartilage

m pterigo‐quadrada (de Beer, 1937). Somente Diplomystidae

apresenta um verdadeiro ectopterigoide dérmico, homólogo ao ectopterigoide dos

outros Teleostei (Arratia & Schultze, 1991). O chamado “ectopterigoide” dos outros

Siluriformes(‘ectopterygoid’ type1,sensuArratia,1992)seria umanovaformação.O

entopterigoide é uma ossificação “mem brano‐dérmica” ao longo da borda dorsal da

cartilag

em palato‐pterigoide (Howes & Teugels, 1989). O entopterigoide de

Diplomystidae foi considerado homólogo ao seu homônimo nos peixes teleósteos e

não‐teleósteos (Arratia & Schultze, 1991). Posteriormente (Arratia, 1992), o

“entopterigoide” dos demais Siluriformes foi também considerado homólogo ao de

Diplomystidae e, consequentemente, ao dos demais peixes (vide discussão para

detalhes).



Introdução

O osso palatino, referindo à ossificação mais anterior do palato‐quadrado

primordial, em Teleostei, é constituído de dois elementos distintos: o autopalatino,

que é a parte derivada da cartilagem palato‐quadrada que se ossifica, e o

dermopalatino, que é uma ossificação dérmicase desenvolve ventro‐lateralmente ao

autopalatino e porta dentes. Em Siluriformes, o dermopalatino está ausente (cf.

Arratia,1992)restandosomenteoautopalatino.

Com relação à cesta branquial, também há características marcantes em

Siluriformes. Há somente dois basibranquiais e acredita‐se que o primeiro

basibranquial foi perdido ou está reduzido a um bastão cartilaginoso. Com isso, o

primeiro cilindro ossificado é tido como o segundo basibranquial (cf. Pinna, 1989;

1993; Bockmann, 1998). Quanto ao primeiro e segundo faringobranquiais dos

Siluriformes

,aindanãoexisteconsensonaliteratura.Oprimeirofaringobranquialdos

siluriformes adultos é costumeiramente identificado como sendo uma estrutura

cilíndrica, ossificada na maior parte de sua extensão, usualmente disposta

paralelamente ao epibranquial I e unida à extremidade mesial deste osso e à face

internadohiomandibular(Bockmann,1998).Arratia(1992)rejeitouahomologiadeste

elemento com o primeiro faringobranquial dos caraciformes e gimnotiformes e

considerouestaestruturacomosendoneomórficadebagres.Entretanto,Pinna(1993)

considerou sua posição diferenciada como sinapomorfia da ordem, não invalidando 

suahomologiacomoprimeirofaringobranquialdosdemaisteleósteos(cf.Bockmann,

1998). O segundo faringobranquial dos siluriformes é, na maior parte das vezes,

reconhecidocomosendoumamassacartilaginosalocalizadapróximaàsextremidades

mesiais dosepibranquiais Ie II eàextremidadeanteriordoterceirofaringobranquial

(e.g. Fink & Fink, 1981). Esta identificação baseia‐se no fato que o segundo

faringobranquial típico, i.e., com aspecto de haste tal como o primeiro

faringobranquial, é incomum nos siluriformes (cf. Pinna, 1993). Conforme apontado

peloreferidoautor,emborararo,osegundofaringobranquial,comformatodehaste,

está presente em alguns representantes de siluriformes. Logo, a interpretação que o

nódulo cartilaginoso seja homólogo ao referido faringobranquial está errada, pois



 O nome faringo‐branquial, se referindo aos elementos esqueléticos mediais e dorsais dos arcos

branquiais, é comumente usado por conveniência (cf. Springer & Johnson, 2004), sendo uma

“abreviação”deinfra‐faringobranquial,sériehomólogadaslinhagensprimitivas.



Introdução

nestes exemplares o típico segundo faringobranquial e o nódulo cartilaginoso

coexistem. Segundo Bockmann (1998), como o elemento com formato de haste é,

morfologicamente e topograficamente, mais similar ao segundo faringobranquial dos

demais membros de Euteleostei, é mais parcimonioso considerá‐lo como sendo seu

homólogo nos siluriformes. Consequentemente, o nódulo cartilaginoso, presente em

todosossiluriformeséconsideradoneomórfico,sendoumaprovávelautapomorfiada

ordem(Bockmann,1998).

Uma cartilagem nodular situada próxima às extremidades distais dos

ceratobranquiais IV e V é comumente identificada como sendo o epibranquial V (cf.

Lundberg & McDade, 1986; Bockmann et al., 2004; Bockmann & Sazima, 2004; Di

Dario, 2004; Pinna & Di Dario, 2010). No entanto, este elemento está conectado à

extremidade distal do ceratobranquial IV, sendo, de acordo com Bockmann (com.

pess.)possivelmenteumelementoneomórfico.

O uro‐hial é outro elemento que merece comentários. O chamado “uro‐hial”,

em sarcopterigianos é pré‐formado em cartilagem e não é considerado homólogo a 

seuhomônimoemteleósteos.Nestes,ouro‐hialforma‐secomoumaossificaçãoúnica

do tendão do músculo sternohyoideus, sem precursores cartilaginosos (Arratia &

Schultze,1990).Nossiluriformes,foiverificadaumasupostanovaestruturadeorigem

complexa,o“paruro‐hial”,que se forma a partir de umaossificaçãodupladotendão

domúsculosternohyoideus e suaregiãoântero‐mediana dorsalossifica

‐seapartirde

uma invasão de células cartilaginosas da região anterior ao segundo basibranquial

(Arratia & Schultze, 1990). Apesar de sua natureza complexa, esta sim sinapomórfica

de Siluriformes, o paruro‐hial foi considerado pelos refe

ridos autores (Arratia &

Schultze,op.cit.)comohomólogoaouro‐hialdosdemaisteleósteos.Oparuro‐hialde 

siluriformes se articula com o hipial ventral, embora em alguns bagres, como

Diplomystidae e Ictaluridae, seja articulado com os hipiais  dorsal e ventral e com a

região basibranquial. Outra característica única dos Siluriformes é  a presença do

forâmenhipobranquial,parapassagemdaartériahipobranquial,alémdaausênciado

ossobasi‐hial(Arratia&Schultze,1990).



Introdução

Nosbagres,umasériedeossostipicamentepresenteemoutrosostariofisianos

foi perdida ou se encontra fundida a outros ossos. A seguir são citadas algumas

sinapomorfias do clado Siluriformes + Gymnotiformes e algumas sinapomorfias de

Siluriformes, que estão relacionadas a  estes processos ontogenéticos,

costumeiramenteencontradasnaliteratura:

‐ Perda de ossos: o intercalar, o processo basi‐pterigoide, o parietal,

supraesfenoide,parededacâmaratrigêmeo‐facial,supraorbital,ossosescleróticos,

um

“verdadeiro” ectopterigoide e/ou entopterigoide, simplético, subopérculo. Destas

perdas,aausênciadointercalar,supraorbitaleossosescleróticossãosinapomorfiasdo

cladoSiluriformes+Gymnotiformes(cf.Fink&Fink,1981;Arratia,2003a).

‐ Redução da série infraorbital, na maioria dos bagres, à pa

rte portadora do

canal. Logo, a lâmina infraorbital e os ossos infraorbitais presentes nos outros

teleósteosestãoreduzidosouausentes(cf.Bockmann,1998;Arratia,2003a).

‐Reduçãodequatropara apenas umaplacadentígera  faringobranquial; fusão

de 2‐4 centros vertebrais anteriores formando o centro complexo do aparelho de

Weber;parapófisedosegundocentroausente.

Háumaextensalistadetrabalhosquejáforamfeitos comestudosdescritivos

sobreaosteologiacranianaemSiluriformes,sendo,amaioria,baseadaemespécimes

adultos (e.g. Kindred, 1919; Hubbs & Miller, 1960; Tilak, 1961; 1963a; 1963c; 1963d;

1964;1965b;1965c;1967b;1970;Rastogi,1963;Gauba,1966;1967;1970;Lundberg,

1975; Srinivasa Rao & Lakshmi, 1984; Pinna, 1988; Kobayakawa, 1992; Chen &

Lundberg, 1995; Pinna  & Vari, 1995; Schaefer, 1987; 2003; Huysentruyt & Adriaens,

2005;Schaefer&Provenzano,2008)

As mudanças esqueléticas que ocorreram durante a história evolutiva dos

Otophysi, que originaram o aparelho de Weber, estão entre as mais complexas

modificaçõesestruturaisdosvertebrados.

Este complexoósseo,localizadoanteriormentenacolunavertebraldos peixes

ostariofisanos,foiprimeiramentedescritoporWeber(1820).Esteautorpostulavaque

este complexo de ossículos que conectavam a bexiga natatória ao ouvido interno



Introdução

estivesse relacionado com a transferência de vibrações sonoras. Deste modo, propôs

que estas modificação eram “análogas” [= homólogas nos dias atuais, v. Rieppel &

Kearney, 2002) aos ossículos auditórios dos mamíferos, incluindo o homem. Esta

relação direta entre os ossículos do aparelho de Weber e aqueles dos mamíferos foi

rejeitada poucos anos depois (cf. Huschke, 1822; Geoffroy‐Saint‐Hilaire, 1824). A

contribuição de Weber (1820) foi importante no sentido de se postular que estes

elementos estivessem, de algum modo, desempenhando uma atividade na audição

destes peixes. No entanto, Fischer (1795) já havia especulado que estes pequenos

elementospudessemserresponsáveispelaconduçãodasvibraçõessonoras,massem

uma ampla descrição como aquela de Weber. Uma detalhada revisão histórica a

respeitodadescriçãodosossículosdoaparelhodeWeber,assimcomosuafunçãona

audiçãodospeixes,foifeitaporHoffmann(2006)emsuatese,demodoquenãoserá

repetidaaqui.Refiram‐seaelaparadetalhamento.

Emboratenhasidoobjetodeestudodeváriospesquisadoresesobrediferentes

perspectivas,ahomologiadosdiferenteselementosenvolvidosnoaparelhodeWeber

éaindadebatida,semumconsenso.Destacam‐seasseguintesdiscussões:

‐NúmerodevértebrasquecontribuemparaaformaçãodoaparelhodeWeber.

O aparelho de Weber, que consiste de modificações das vértebras anteriores e

elementos associados, é compartilhado por cerca de 7000 espécies de peixes (i.e.

Otophysi).Apesardesuaestruturasermuitoconsistentenestegrupo,cercade15‐20%

dospeixesotofisianos,incluindomuitosSiluriformes,apresentamváriascaracterísticas

redutivas. Como reportado por Coburn & Grubach (1998), essas características são

muito marcantes em Loricarioidea (i.e. Loricariidae, Astroblepidae, Scoloplacidae,



Callichthyidae, Trichomycteridae e Nematogenyidae; sensu Pinna, 1992), como, por

exemplo, a ausência de um primeiro centro distinto nos adultos (cf. Chardon, 1968;

Baskin, 1973). Ao que se parece, apenas Diplomystidae possui quatro vértebras



integradas ao aparelho de Weber (Arratia, 1987; Pinna, 1993), enquanto os demais

siluriformes possuem cinco vértebras envolvidas. Apesar disso, é possível que esta

condiçãoplesiomórficaseja compartilhadapelosLoricarioidei (Bockmann,com. pess.;

Hoffmann&Britz,2006).



Introdução

‐Homologiadoclaustrum.Estaestruturaéoprimeiroossículo(omaisanterior)

doaparelhodeWebere,originalmente,nãofoiincluídaporWeber(1820)comosendo

parte da série “ossicula auditoria”. Conforme  discutido acima, apesar de ter sido

objeto de estudo de vários trabalhos, ainda não existe um pleno consenso sobre a

homologia do claustrumnosOstariophysi (e.g.Pinna&Grande,2003;Bird&Mabee,

2003;Coburn&Chai,2003;Grande&Young,2004;Grande&Pinna,2004;Hoffmann

&Britz,2006;Britz&Hoffmann,2006).ComoresumidoporBritz&Hoffmann(2006),

seishipótesesforam propostasporestudos anterioresparaa origemdoclaustrum: I)

sendo parte da região occipital do crânio; II) representando o espinho neural

modificadodoprimeiroarco; III) sendo o primeirosupraneuralmodificado;IV)sendo

partesdissociadasdoprimeiroarco neural; V) representandooarconeuralacessório

modificado; VI) sendo supradorsais modificados. O referido estudo conclui que a

hipótese mais provável é que o claustrum seja homólogo ao primeiro supradorsal

modificado.

‐Homologiadotripus.Poucoseconhecesobrea homologiaeorigemdotripus

nosOtophysi.Alguns trabalhoscomoos deRosen&Greenwood(1970)e Fink&Fink

(1981)reportaramqueotripusseriaformadopordoiscomponentes,aparapófiseea

costela da terceira vértebra. Grande & Young (2004) concluem que, em Danio rerio

(Cypriniformes),amaiorcontribuiçãoparaaformaçãodotripusvemdaparapófise(i.e.

basiventral)doterceirocentro.Grande&Pinna(2004)tambémsustentamahipótese

de homologia entre a parapófise do terceiro centro de alguns Clupeomorpha (i.e.

Pristigasteroidea)comaqueladosOtophysi.

‐ Homologia do complexo neural (sensu Nelson, 1948), evidenciando que

primórdios estruturais cartilaginosos estão envolvidos em sua formação. Como

resumido por Hoffmann & Britz (2006), seis hipóteses foram lançadas na literatura

sobrea homologiadocomplexoneural:I)seriaformadoporespinhosneurais;II)seria

formado pelo segundo arco neural e pelo segundo e terceiro espinhos neurais; III)

formado exclusivamente por arcos neurais; IV) formado exclusivamente por

supraneurais; V) formado por arcos neurais e supraneurais; VI) formado por uma

contribuição de supraneurais. Esta última hipótese foi corroborada pelos referidos

autores. As cartilagens supradorsais, são cartilagens autógenas, bilateralmente



Introdução

pareadas, que se desenvolvem medialmente nos topos dos arcos neurais. Em

Otophysi, ossupradorsaissedesenvolvem somente nosarcosneurais1, 3 e 4, sendo

que ossupradorsais3e4sãoosmaisimportantes na formação do complexoneural.

No entanto, a significância desta contribuição para a formação do complexo neural

varia entre os Otophysi. Em alguns Siluriformes o complexo neural está ausente e o

quarto arco neural está fundido com o “occiput” (parte posterior do crânio que se

articula com a coluna vertebral). Aliado a isso, os Siluriformes apresentam a maior

variação, entre os Otophysi, na estrutura e no desenvolvimento do complexoneural.

Esse estudo adiciona informações importantes sobre esta estrutura em táxons não

estudadosatéomomento(e.g.Hoffmann&Britz,2006).

Apesardeumagrandevariaçãodentrodaordem(normalmentesinapomorfias

de clados menos inclusivos), o esqueleto caudal dos Siluriformes apresenta várias

características que o distingue dos demais teleósteos (cf. Lundberg & Baskin, 1969;

Arratia,2003b):

‐ Arcos neurais e hemais das vértebras pré‐urais são fundidos com os

respectivoscentros.

‐ O primeiro centro pré‐ural e, possivelmente, um ou dois centros urais

fundidos no centro complexo, nos primórdios do desenvolvimento. No entanto, não

estáclaroseafusãoocorresemprecomoprimeirocentrouralouseosegundocentro

ural também está fundido. Isto parece variar entre os bagres (cf. Lundberg & Baskin,

1969;Arratia,1982;Schultze&Arratia,1989).

‐ O arco neural do centro complexo é  normalmente incompleto dorsalmente

(cf.Lundberg&Baskin,1969;Arratia,1983).

‐Umsegundocentro,pequenoeseparadoéencontradoemcertosbagres.Este

segundo centro ural pode corresponder ao centro ural 3, ou centro ural 3+4 (na

terminologia poli‐ural) (cf. Schultze & Arratia, 1989). Em certos casos, este centro

aparece como centro independente em estágios iniciais do desenvolvimento, mas se

funde ao centro complexo, podendo ou não permanecer no adulto (cf. Pinna & Ng,

2004).



Introdução

‐Oparipuraleoshipurais1e2estãofundidosaocentrocomplexo.

‐Presençadehipurapófisesnassuperfícieslateraisdoarcohemaldoparipural

que servem como ponto de origem da porção ântero‐lateral do músculo longitudinal

hipocordal(Nursall,1963).

‐ Máximo de seis hipurais. O lobo dorsal tem um máximo de quatro hipurais

independentes. A maioria dos bag

res possui três hipurais dorsais, que podem ser

independentes ou estarem fundidos entre si. Há uma tendência de redução nos

númerosdehipuraisporperdaoufusão,quepodeenvolveroparipuraleouroneural

(cf.Lundberg&Baskin,1969).

‐ Um uroneural fundido com a parte dorso‐posterior do centro complexo,

formandoopleuróstilo

(sensuMonod,1968).

‐Umúnicoepuralsobreoarconeuraldocentrocomplexo.

‐Nadadeiracaudalcom9raiosdorsaise9ventrais(Diplomystidae).Amaioria

dos bagres possuem 8 raios dorsais e 9 ventrais. No entanto esta contagem é muito

variável,podendoserinconsistenteatéemnívelintra‐específico.

O estudo ontogenético pode esclarecer dúvidas sobre a presença ou ausência

de ossos, uma vez que possibilitam a obtenção de informações sobre fusões ou

reduções destes elementos durante os estágios iniciais de vida. Por outro lado, o

desenvolvimentodeestruturasósseaspareceestarrelacionadoàsdemandasdomodo

devidadaslarvasdecadaespécie(e.g.Weisel,1960;1967;Verraes,1977;Verraes&

Ismail, 1980; Hunt von Herbing et al., 1996a; 1996b; Mabee &Trendler, 1996). Além

disso, estudosontogenéticosdetalhadosdediferentesestruturas em diversos grupos

sãonecessárioscombaseparaumafuturainterpretaçãofilogenéticadasrelaçõesdas

famíliasdeSiluroidei.(Arratia,1987).

Alguns trabalhos descrevem a ontogenia craniana de determinados grupos de

Siluriformes: Ictaluridae (Kindred, 1919; Arratia, 1992), Callichthyidae (Hoedeman,

1960a,Howes&Teugels,1989,Huysentruytetal.,2008),Loricariidae(Geerinckxetal.,

2005),Ariidae(Bamford,1947;Srinivasachar,1959b;Tilney&Hecht,1993),Plotosidae

(Srinivasachar, 1959b), Schilbeidae (Srinivasachar, 1956a), Bagridae (Srinivasachar,



Introdução

1956b); Clariidae (Surlemont & Vandewalle, 1991; Adriaens & Verraes, 1997e;  1998;

Vandewalle et al., 1997), Heteropneustidae (Srinivasachar, 1958, 1959a); Claroteidae

(Vandewalle et al., 1995; 1999); Siluridae (Kobayakawa, 1992); Pangasiidae

(Srinivasachar,1956a).Outrosartigoslidamapenascommorfologiaexterna(i.e.Ward,

1957; Chaves, 1994; Watanabe, 1994; Reis et al., 1998). Alguns artigos descrevem a

ontogenia de estruturas pós‐cranianas (Radermaker et al., 1989; Vandewalle et al.,

1990; Fujita, 1992c; Tilney & Hecht, 1993; Coburn & Grubach, 1998) ou de tecidos,

comomusculatura(Surlemont&Vandewalle,1991;Geerinckx&Adriaens,2007;2008;

Geerinckx et al., 2009) e nervos (Bamford, 1947; Roth, 2003). Há também toda uma

gama de estudos feitos  com períodos embrionários (pré‐eclosão), porém, diante do

escopodopresenteestudo,estalinhanãoseráabordada.

Osestágiosparaa eclosãodaslarvas de Siluriformesvariamsubstancialmente

paracadaespécie,assimcomootamanhoeaduraçãodoperíodopré‐eclosão(cf.Sato

etal.,2003;Adriaens&Vandewalle,2003).Oscasosdeeclosãomaisrápidastendema

serodasespéciesmigradoras,cujosovosnãosãoadesivosenãohácuidadoparental,

como em Pseudoplatystoma coruscans (Cardoso et al., 1995; obs. pess.) e Clarias

gariepinus(cf.Legendre&Teugels,1991),ondeesteintervaloédemenosde24horas

após a fertilização. O oposto a isso, em Siluriformes, pode ser encontrado nos

representantes da família Loricariidae, como em Sturisoma aureum (Riehl & Patzner,

1991),Pterygoplichthysetentaculatuse  Rhinelepisaspera(Godinho&Godinho, 2003;

obs. pess.) e Liposarcus pardalis  (Leite et al., 2007). Em casos extremos, como nos

bagresmarinhos– Ariidae –Galeichthys(cf.Tilney& Hecht,1993),pode levar até75

diasparaaeclosão.Logicamente,otempodeeclosãorefletediretamentenaformação

das estruturas larvais. Nas larvas das espécies de eclosão rápida, não há indício ao

menos de estruturas cartilaginosas. Já em Ariidae, p. ex., a larva recém‐eclodida

assemelha‐se muito ao adulto, até mesmo com ossificações em estágios tardios de

formação,assimcomonadadeirasdesenvolvidaseatuantesparaanataçãoativa.

Assim como o tempo de eclosão, também há variações expressivas entre as

espéciesdebagresquantoaotamanhoeduraçãodosacovitelínico.Há,emgeral,uma

correlaçãoentreotamanhoe duraçãodosacovitelínico,assimcomoaimplicaçãode

sua perda. Normalmente, quanto menor o saco vitelínico mais rapidamente ele é



Introdução

consumido(absorvido),“forçando”alarvaaumaalimentaçãoexógena.Paratanto,há

a necessidade de que várias estruturas já estejam formadas ou em fase avançadade

formação, que incluem musculatura – em especial o músculo adutor mandibular –

alémdeossificaçõesquefortalecemaregiãobucal/faringianae “ancoram”ostendões

e ligamentos. No entanto, é sabido que variáveis ambientais e variações metabólicas

espécie‐específicasinfluenciemnesteintervalo(cf.Kamleretal.,1994;Arratia,1983).





Objetivos

O BJETIVOS



Gerais: Descrever em detalhes o desenvolvimento do esplancnocrânio,

aparelho de Weber e  esqueleto caudal de três espécies de Otophysi (Prochilodus

argenteus, Pseudoplatystoma coruscans e Lophiosilurus alexandri) em cada estágio

obtido,comintuitodetestarhipótesesdehomologiaprimariasobrecertoselementos,

bem como levantar novas proposições de homologia com base nas observações

originaisdesteestudo.

Específicos:

‐ Investigar o número de vértebras que contribuem para a formação do

aparelhodeWeber;

‐Investigarahomologiadoclaustrum;

‐Investigarahomologiadotripus;

‐ Investigar a homologia do complexo neural (sensu Nelson, 1948),

evidenciando que primórdios estruturais cartilaginosos estão envolvidos em sua

formação;

‐ Investigaraconstituiçãodoelemento cilíndrico daporçãoanteriordocrânio

dosbagres,chamadodeautopalatino;

‐Investigaraorigemcomplexadouro‐hial(ouparuro‐hialemSiluriformes);

‐InvestigarahomologiadoectopterigoideeendopterigoideemSiluriformes;

‐ Investigar as estruturas originadas da cartilagem hio‐simplética‐

pterigoquadrada (sensu Arratia, 1992) em Siluriformes: hiomandíbula, quadrado e

metapterigoide;

‐Investigarahomologiadaplacacartilaginosamedialventraldacestabranquial

dosSiluriformes,identificadacomoquartobasibranquial;



Objetivos

‐Investigarodestinodoquartohipobranquialedosdoisfaringobranquiaismais

anterioresnosSiluriformes;

‐Investigarahomologiadoelementochamadodequintoepibranquial;

‐Investigarodestinodocentroural2;

‐Investigarahomologiadouroneural;

‐ Investigar a homologia dos espinhos hemais e neurais, associados com a

nadadeiracaudal;

‐Investigaracomposiçãoehomologiadasplacashipurais;

‐Investigaracomposiçãodocentrocaudalcomplexo.





MaterialeMétodos

M ATERIAL E  M ÉTODOS

MaterialExaminado

AEstaçãodePisciculturadeTrêsMarias(CODEVASF),MGfoiamaiorfontedas

séries ontogenéticas aqui estudadas. Nesta estação foram realizadas induções para

desova e  o desenvolvimento dos ovos e alevinos, a partir de matrizes selvagens 

(coletadas na natureza) e sem qualquer hibridização. Esta etapa foi feita sob

supervisão do Dr. Yoshimi Sato que, gentilmente cedeu o material, o qual foi

posteriormente tombado na coleção ictiológica do Laboratório de Ictiologia de

RibeirãoPreto(LIRP).

Na fase inicial, as larvas foram fixadas no intervalo de 24 horas. A fixação foi

feita,principalmente,comformoltamponadoa4%por24a48horasdependendodo

tamanhodalarva.Foiutilizadootampãofosfato

porsuaspropriedadesconhecidasde

perfeita preservação estrutural das células e até receptores celulares, possibilitando,

até mesmo, futuros estudos com técnicas de imuno‐histoquímica (i.e. Markle, 1984).

Saliento a importância da fixação por este método, pois há uma preservação quase

perfeitadosestágios iniciais deossificação.Sefor utilizado formolnãotamponado,o

pHficarámuitobaixoeosácidosreagemcomosdepósitosminerais–principalmente

o carbonato de cálcio. Em espécimes maiores a perda de minerais ósseos (que serão

coradosposteriormente)émínima,masemestágiosiniciaisdodesenvolvimento,esta

perda pode levar a resultados “falsos negativos”, onde os inícios da ossificação não

serãopercebidos.

Em seguida o material foi conservado em álcool 70%. Adriaens (1998)

descreveudetalhadamentediversastécnicasdefixaçãoepreservação,assimcomoas

composições das soluções e critérios de utilização. Este referido trabalho é

extremamente útil para preparação de exemplares muito delicados, como larvas de

peixes.



 Para a preparação do tampão fosfato, utilizam‐se dois sais: o NaH

O (fosfato de sódio

monobásico) e Na

HPO

 (fosfato de sódio dibásico anidro). Para o volume final de 1 litro de solução

(0,2M),diluir5,52g defosfatomonobásico e22,72gde fosfatodibásicoanidro.É recomendadofazer

esta diluição com 800 mL de água destilada levemente aquecida (apx. 50ºC), com agitador. Após,

completepara1litro.Ofor

mollíquidode

veserdiluídoem1partepara9partesdotampão.Asolução

finalpossuiumpH6,8(neutro).



MaterialeMétodos

Alistagemdomaterialquefoiutilizadonopresenteestudosegueabaixo:

AMIIFORMES

Amiidae

Amia calva, MZUSP 46123 (sem dados de coleta). 5 ex. Exemplares

juvenis(31,2–34,9mmCP);MZUSP104454(semdadosdelocalidade).1ex.Exemplar

jovem(66,8mmCP);

CHARACIFORMES

Anostomidae

Leporinus obtusidens, LIRP 5990 (Rio São Francisco, represa de Três

Marias (CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 14 ex. Séries de

desenvolvimento.1ºao6ºdias,mais8estágiossemdatação;

Characidae

Brycon orthotaenia, LIRP 5983 (Rio São Francisco, represa de Três

Marias (CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 10 ex. Séries de

desenvolvimento.1ºao9ºe15ºdia.SérieduplicadafixadaemBuan;

Salminus sp., LIRP 5991 (Rio São Francisco, represa de Três Marias

(CEMIG/CODEVASF),TrêsMarias,MGBrasil).3ex.Sériesdedesenvolvimento.4º,6ºe

8ºdias;

Prochilodontidae

Prochilodus argenteus, LIRP 5993 (Rio São Francisco, represa de Três

Marias (CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 20 ex. Séries de

desenvolvimento.1ºao7ºdias,maisdias:9,10,12,15,16,18,19,21,25,28,36,46e

49; MZUSP 42718 (Riacho e Lagoa de Mocambinho, margem direita do Rio São

Francisco,ProjetoJaiba,Manga,MG,Brasil17a22/07/1990).2ex.c&sjuvenis.



MaterialeMétodos

GYMNOTIFORMES

Gymnotidae

Gymnotus carapo, LIRP2126(ÁguasClaras,trechoMédio,AltoParaná,

TeodoroSampaio,SP,Brasil).10ex.;

Gymnotussylvius,MZUSP85947(córregoafluentedocórregoBatistade

Ferraz,DistritodeFerraz,RioClaroSP,Brasil);

Hypopomidae

Brachyhypopomussp.,LIRP2080 (ChácaraJunqueira,Jd.dasPalmeiras.

Nascenteetanques,várzeas(esq.)RioPardo,RibeirãoPreto,SP,Brasil).21ex.;

Hypopomidae sp., LIRP 3845 (Primeiro riacho após Vila  União, na

estradaprincipal(RiodasMortes‐Araquaia),PrimaveradoLeste,MT,Brasil)3ex.;

Hypopomidae sp., LIRP 3955 (Riacho aproximadamente 20 Km após o

VilarejoSãoJosé(B.Xingu),MT,Brasil).7ex.;

Gymnotussylvius,MZUSP85947(córregoafluentedocórregoBatistade

Ferraz,distritodeFerraz,RioClaro,SP,Brasil).23ex.larvasejuvenis;

SILURIFORMES

Incertaesedis

Conorhynchusconirostris,MZUSPnãocatalogado(semdadosdecoleta)

1ex.esqueletoseco.

Doradidae

Franciscodoras marmoratus, LIRP 5988 (Rio São Francisco, represa de

Três Marias (CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 1 ex. Séries de

desenvolvimento.65ºdia;



MaterialeMétodos

Loiricariidae

Pterygoplichthysetentaculatus,LIRP5986(RioSãoFrancisco,represade

Três Marias (CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 10 ex. Séries de

desenvolvimento.1ºa3ºdia,mais7estágiosseminformaçãoprecisadedata;

Rhinelepisaspera,LIRP5985(RioSãoFrancisco,represadeTrêsMarias

(CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 1 ex. Séries de desenvolvimento. 61º

dia;

Pimelodidae

Bergiariasp.,MZUSP85627(coletafeitadodia28‐31deagostode2004

nascidadesdeBuritizeiroePirapora,MG,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Brachyplatystoma filamentosum, MZUSP 92020 (comprado de

pescadoresemBelém,PA,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Brachyplatystomavaillanti,MZUSP92019(compradodepescadoresem

Belém,PA,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Calophysusmacropterus,MZUSP 91666(portodo CEASA,Manaus,AM,

Brasil)1ex.esqueletoseco.

Hemisorubimplatyrhynchus,MZUSP91980(RioCuluene,nafuturaárea

daPCHParanatingaII,Paranatinga,MT,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Leiarius sp., MZUSP 91664 (porto do CEASA, Manaus, AM, Brasil) 1 ex.

esqueletoseco.

Phractocephalus hemioliopterus, MZUSP 100027 (Rio Teles Pires, a

jusantedasSetesQuedas,Jacareacanga,PA,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Pimelodus maculatus , LIRP 5984 (Rio São Francisco, represa de Três

Marias(CEMIG/CODEVASF),TrêsMarias,MG,Brasil).1ex.Sériesdedesenvolvimento.

66º dia; MZUSP 85624 (coleta feita do dia 28‐31 de agosto de 2004 nas cidades de

BuritizeiroePirapora,MG,Brasil)1ex.esqueletoseco.



MaterialeMétodos

Pinirampus pirinampu, MZUSP 100024 (Rio Teles Pires, a jusante das

SetesQuedas,Jacareacanga,PA,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Platynematichthys notatus, MZUSP 91662 (Belo Monte do Xingu, PA,

Brasil)1ex.esqueletoseco.

Propimelodus eigenmanni, MZUSP 91554 (Abaetetuba, PA, Brasil) 2 ex.

esqueletoseco.

Pseudoplatystoma sp., MZUSP 91664 (Rio Verde, afluente do rio

Araguaia, Luís Alves Tocantins, GO, Brasil) 1 ex. esqueleto seco; MZUSP 91667(porto

doCEASA,Manaus,AM,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Pseudoplatystoma coruscans, LIRP 5987 (Rio São Francisco, represa de

Três Marias (CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 14 ex. Séries de

desenvolvimento.2ºao9ºdia,mais13º,16º,19º, 25º,26º e39º dias;MZUSP 96283

(Tanquesdepsicultura daCODEVASF,RioSão Francisco,represadeTrês Marias,Três

Marias,MG,Brasil).1ex.juvenil(118,9mmCP).

Steindachneridionparahybae,MZUSP103722(exemplarprovenientedo

ParquedaLuz,SãoPaulo,SP,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Sorubim lima, MZUSP 91668 (Rio Tocantins, na UHE de Serra da Mesa,

Minaçu,GO,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Sorubim trigonocephalus, MZUSP 94965 (Rio Culuene, fazenda do Sr.

Zezé(ca.2Kmacimadaponte),GaúchadoNorte,MT,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Zungaro zungaro, MZUSP 100023 (Rio Teles Pires, a jusante das Sete

Quedas,Jacareacanga,PA,Brasil)1ex.esqueletoseco.

Pseudopimelodidae

Lophiosilurus alexandri , LIRP 5992 (Rio São Francisco, represa de Três

Marias (CEMIG/CODEVASF), Três Marias, MG, Brasil). 42 ex. Séries de

desenvolvimento. 1ºao25ºdias, mais dias: 26, 28,33,35,38,42,44, 47, 50, 56, 61,



MaterialeMétodos

71,82,88,99,105,116;MZUSP40223(semdadosdecoleta–materialantigo).1ex.

esqueletoseco.

Microglanis cottoides, MZUSP 101311 (Rio Batatal, afl. Ribeira de

Iguape,naSP‐165(Eldorado‐Iporanga),apósaViladeItapeúna,Eldorado,SP,Brasil)3

exs.esqueletoseco.

Pseudopimeloduscharus,LIRP5989 (RioSãoFrancisco,represa de Três

Marias(CEMIG/CODEVASF),TrêsMarias,MG,Brasil).1ex.Sériesdedesenvolvimento.

Somente1estágio,semdatação.



Fasesdedesenvolvimento

Para os estudos de desenvolvimento é necessária a definição dos diferentes

estágios (fases) dos ovos e larvas. Existem diversos tipos de estudos sobre as fases

iniciais de desenvolvimento de peixes, sob diversas perspectivas. Alguns estudos

focalizam exclusivamente em embriologia, ontogenia tardia, morfologia funcional,

estruturaslarvais,aplicaçãode característicaslarvais àtaxonomia,ecologia deovose

larvas etc. Todos esses estudos têm a necessidade de subdividir as diversas fases do

desenvolvimento para poderem comunicar os eventos que ocorrem durante todo o

processo até o estágio adulto. Na literatura envolvendo desenvolvimento de peixes

existeumaenormequantidadedetermos,muitossemdefiniçãoclaraeváriosoutros

que são quase sinônimos. Kendall Jr. et al. (1984) faz uma revisão das terminologias

para os estágios iniciais de desenvolvimento em peixes, disponíveis até aquele

momento(Fig.3).Éimportantequeaterminologiautilizadareflitaaspectosdahistória

devidadospeixes,tantomorfologicamente comofuncionalmenteequeoslimitesdos

estágios sejam os mais claros possíveis. Entre as mais utilizadas, principalmente em

estudosdedesenvolvimentocomenfoquepesqueiro,estãoaspropostasporAhlstrom

& Moser (1976), que se baseia nas mudanças primárias da nadadeira caudal

homocerca,edeSnyder(1976),baseadanamorfogênesedasnadadeirasembrionárias

atéqueestassetransformememnadadeirasindependentes.Existemoutrostrabalhos

que propõem terminologias distintas para a descrição dos estágios larvais em peixes.



MaterialeMétodos

Destacam‐se entre  esses os estudos de Hubbs (1943; 1958 ), Sette (1943), Nikolsky

(1963),Balon(1975)Bartschetal.(1997).Nogeral,podem‐seresumirosperíodosde

desenvolvimentonasseguintesfases:embrionária,larval,juvenil, adultoesenescente

(Balon,1975;Helfmanetal.,2009).Valedestacarqueafaselarval(amaisimportante

nos estudos de ontogenia comparada) é delimitada do período de eclosão até sua

metamorfose (cf. Helfman et al., 2009). A aplicação deste termo é um problema em

potencial para os grupos que possuem o desenvolvimento direto – i.e. não passam

peloestágiodemetamorfose–comoasespéciesaquiestudadas.

Mesmo para espécies de um mesmo grupo monofilético, p.ex. Siluriformes,

ainda é muito difícil definir o limite mais tardio do estágio larval. Logo, é mais

interessante,doaspectocomparativo,utilizaroaumentodecomplexidade estruturale

nãoocrescimentoemsi(cf.Adriaens&Vandewalle,2003).Diantedisso,nopresente

estudo, as terminologias utilizadas seguem, com grande proximidade, aquelas

adotadasporAdriaens (1998), que utilizouconceitosdevários estudos,comenfoque

nosprocessosontogenéticoseremodelagemdocorpo.Tambémfoiadotada,quando

necessária,a subdivisãodoestágio larval,comosugeridoporKendall Jr.et al.(1984),

possibilitandoumacomparaçãomaisprecisaentreasespécies:

‐ Estágio de ovo, que inclui a desova (fertilização) até a eclosão

. Adriaens

(1998)tambémserefereaesteestágiocomo“estágioembrionário”,caracterizadopor

processosembrionários,comoclivagens,estágiodemórula,blástula,gástrula,nêurula

e formação de somitos. Entretanto, como discutido por K endall Jr. et al. (1984), o

termo “estágio de  ovo” é preferível ao termo “estágio embrionário”, uma vez que

existem car

acteres adicionais presentes neste estágio, além dos propriamente

embrionários,como,porexemplo,aquelesassociadosaoenvelopedoovo.

‐ Estágio de larva, que ocorre entre a eclosão e a perda total dos caracteres

embrionários. Neste estágio os raios das nadadeiras estão formados, iniciando a

escamação. Um dos eventos mais marcantes no desenvolvimento da maioria dos

peixes é a fle

xão dorsal da notocorda, que induz o desenvolvimento hipocordal da

nadadeira caudal homocerca. Portanto, é conveniente subdividir o estágio larval em



 Há vários autores que subdividem este estágio (cf. Nakatani et al., 2001). Porém, isso não será

detalhado,umavezquefogeaoescopodopresentetrabalho.



MaterialeMétodos

estágiodepré‐flexão,flexãoepós‐flexão.Osestágiosdeflexão,namaioriadospeixes,

éacompanhadodeumrápidodesenvolvimentodosraiosdasnadadeiras,mudançana

forma do corpo, mudanças na habilidade de locomoção e em técnicas alimentares

(KendallJr.etal.,1984).

‐ Larva no estágio de pré‐flexão: fase que vai da eclosão até o

surgimento dos primeiros raios da nadadeira caudal. Nesta fase serão

enquadradasaslarvasquesemantémcomviteloouresíduosdomesmo,com

boca parcial ou totalmente aberta e que ainda não apresentam vestígios dos 

elementosquedarãosuporteànadadeiracaudal.

‐ Larva no estágio de flexão: compreende o estágio em que se inicia a

flexão dorsal da notocorda. Nesta fase começam a surgir os elementos

secundáriosdesuportedanadadeira caudal eaindanãoocorreuosurgimento

dosraiosdasdemaisnadadeiras.

‐ Larva no estágio de pós‐flexão: são consideradas as larvas que

apresentam a nadadeira caudal formada e que já apresentam pelo menos

vestígios dos elementos de suporte das nadadeiras dorsal, anal, peitorais e

pélvicas. Quando as larvas apresentam apenas os raios da nadadeira anal são

denominadascomolarvaseminíciodepós‐flexão.

‐Estágiojuvenil:imediatamenteapósotérminodoprocessolarval,emquese

encerram os processos de remodelagem larval (sensu Copp & Kovác, 1996). Estes

processospodemserrestritosàdiferenciaçãodasnadadeiras(comodesenvolvimento

dosraios) eescamação.KendallJr.etal.(1984)tambémincluinessa  lista,amudança

nasproporçõesdo corpo, pigmentaçãoehábitos de um adulto.Adriaens(1998) opta

pela utilizaçãodaremodelagemdo

sprocessoscraniais.Dessemodo,o períodolarval

coincidecomomomentoemqueamorfologiadocrânioseassemelhaàdeumadulto,

emtamanhoreduzido,envolvendoa presençadetodasasestruturas,assimcomosuas

ossificações. Neste contexto, o final da fase larval acaba sendo mais longa do que o

propostoporoutroscritérios.



MaterialeMétodos

‐Estágioadulto,comoadefiniçãogeralmenteaceita,esteestágiocorresponde

ao início da gametogênese. Este estágio não fez parte deste estudo, mas, de acordo

com a  literatura, aparentemente não ocorrem eventos de metamorfose (como os

presentes em salmão) nas espécies estudas, dificultando a precisão do início deste

estágio.

Técnicasdepreparação

Apreparaçãodosexemplaresparaanálisesdesuasestruturasinternasfoifeita

através do método de diafanização compilado por Taylor & Van Dyke (1985). Tal

processo consiste em clarear o material através de enzimas proteolíticas e corar

cartilagem através do corante Azul de Alcian 8GX (vide Redfern et al., 2007 para

discussões e usos das diferentes variações do corante azul de Alcian) e ossos através

do corante Alizarina‐S Vermelha. Quando ne cessário, foi seguida a modificação

proposta por Springer & Johnson (2000) com relação à diluição da Alizarina, que ao

invés de ser diluída em hidróxido de potássio (KOH) (que destrói a musculatura) foi

diluídaemálcooletílico(quepreservamelhoramusculatura).

Na prática, os trabalhos que descrevem procedimentos de diafanização são

destinados, principalmente, a animais de maior porte. O único trabalho que faz uma

menção e algumas recomendações para preparações de larvas é aquele de Taylor & 

Van Dyke (1985). Quando os protocolos existentes foram seguidos precisamente, os

resultados obtidos foram insatisfatórios, em alguns casos ocasionando perda deste

raro material, devido à sua fragilidade. Como decorrência desse fato,  foi feita uma

extensa revisão na literatura, incluindo trabalhos dirigidos para preparação de

pequenosanimais,embriõeselarvas(cf.Bechtol,1948;Burdi&Flecker,1968;Cason,

1950;Conn&Cunningham,1932;Dingerkus,1981;Dingerkus&Uhler,1977;Gavaiaet

al.,2008;Hanken&Wassersug,1981;Jensh&Brent,1966;Knox,1954;Markle,1984;

Miller&vanLandingham,1969;Ojedaet al.,1970; Park& Kim,1984;Potthoff,1984;

Redfern et al., 2007; Song & Parenti, 1995; True, 1948; Vandewalle et al., 1998;

Williams, 1941) para o entendimento de cada passo dos processos a fim de se obter

variaçõesnosintervalosdetempoemcadaetapa,assimcomonasquantidadesetipos

dosreagentesaseremutilizados.



MaterialeMétodos

Abaixoestãodescritosasequênciaemqueosprocedimentosdevemserfeitos

(coluna “Passos”), solução utilizada em cada passo (coluna “Solução”) e o tempo em

que os exemplares devem permanecer nas mesmas (coluna “Tempo”). Apesar deste

tempo funcionar para a maioria dos exemplares, para alguns, de tamanho muito

reduzido(estágioimediatamentepós‐eclosão)eexemplaresmaiores(jovens),otempo

de permanência nas soluções devem ser alterados para menos ou para mais,

respectivamente. Os passos que devem ser ajustados são o 4º, o 8º 10º, que são

respectivamente, etapas de coloração de cartilagens, digestão de musculatura e

coloraçãodeestruturasmineralizadas.Paraexemplaresemestágiopós‐eclosão,deve‐

sediminuirotempodepermanênciaemsoluçãoácida(4ºpasso)esoluçãobásica(10º

passo).Paraestesmesmosexemplares,opassodedigestãodamusculatura(8º)pode

até mesmo ser descartado, uma vez que esses exemplares possuem um corpo

transparente e muito delicado que seria facilmente destruído pela enzima. Saliento

alguns pontos que são muito importantes nesta preparação: a desidratação tem que

ser a mais perfeita possível (por isso as 2 trocas de álcool absoluto), pois qualquer

quantidadedeágua,pormínimaqueseja,iráreagircomoácidonoprocesso4eisso

resultará em perda do material mineralizado. A quantidade de corante azul deve

respeitaros10mg/100mldesolução,afimdeseevitarquetecidosoutrosquenão

cartilaginososfiquemmarcados.Opasso7paraclareamentodeveserfeitocommuito

cuidado e com pouco água oxigenada para não formar bolhas internas. O passo da

enzima(8‐maceração)damusculaturapodeserfeitocomKOH,oqueéindicadopara

exemplaresrecém‐eclodidos.

O corante vermelho, como está ligado a tecidos cuja mineralização é mínima,

se desprende facilmente sob agitação e/ou exposição à luz. Recomendo cuidado ao

transportar os exemplares e estocá‐los em local escuro. Para evitar essa perda, as

larvasforamestocadasemumamisturade6partesde glicerina100%para1partede

alizarina (sol. KOH 0,5%). Para fotografias, se necessário, pode‐se colocar em uma

mistura mais forte de alizarina por algumas horas e deixar “descansar” em glicerina

100%atéatransparênciaretornar.Após,aestocagemdeveserfeitanovamentecomo

citadaacima.



MaterialeMétodos

Pode‐se, opcionalmente, utilizar xilol para a remoção de tecido gorduroso. O

xilol possui propriedades de dissolver, eficientemente material oleoso. Seu uso, no

processo de diafanização se dá em alguns pontos específicos, conforme consta na

tabelaabaixo,podendo,atémesmo,serusadomaisdeumavez,senecessário.Utilizá‐

lo sempre em recipientes de vidro, uma vez que o xilol dissolve material plástico. O

xilolpodeserutilizadopuroouemsolução1:1comálcoolabsoluto.Foiverificadoum

melhor efeito quando o material estava bem desidratado antes da solução de xilol.

Após,reidratarparacontinuacomospassosseguintes(3:1,1:1,1:3).

Passos Solução Tempo(h)

1º Álcool80%(1a3h) 1:30

2º Álcool90%(1a3h) 1:30

3º Álcoolabsoluto(1a3h)–2trocas 1:30

Opcional:Xilol,banhoatéclareamento(cf.Taylor& VanDyke,1985).

4º

Azul de Alcian 20% ac. ("overnight" – 10 mg corante/100 ml sol.) (9 a

16h)



13:30

5º

Solução Saturada de Bórax (várias trocas ‐com 'lavagem' inicial)‐

Deixarsoluçãodescansarparaeliminaçãodebolhas

1:30

6º H

ODestilada 0:30

7º

Clareamento‐10~20% H

 (3%) + 80~90% KOH (0,5~1%) – somente

paralarvascompigmentação(cromatóforos)

0:00

8º

Enzima (30% S.S. Bórax + 70% H

O de stilada) – ¼ colher chá tripsina

/100mlsol.Paralarvasmenores,deixarpoucotempo(20min.)–36ºC



1:15

9º EnxáguerápidoemH

Odestilada 0:10

Opcional:Xilol,banhoatéclareamento.

10º

Vermelho de Alizarina + KOH (0,5 ~ 1%)‐"vermelho escuro"‐se

necessáriaapreservaçãodemusculatura,diluiremálcool

11:30



Opcional:Xilol,banhoatéclareamento.

11º

LavagememH

O destiladaouvolta rápida para enzima pararemoção

doexcessodecorante‐opcional

0:00

12º

Para remoção de guanina,  solução KOH 2 a 4%, algumas horas,

acompanhando...Opcional



0:00

13º

Glicerina25%(1:3)emH

O,ouKOH(0,5~1%)paramaisclareamento–

Todasassoluçõesde glicerinadevemdescansarpara aeliminação  das

bolhas

3:00

14º Glicerina50%(1:1)emH

O,ouKOH(0,5~1%)paramaisclareamento. 3:00

15º Glicerina75%(3:1)emH

O,ouKOH(0,5~1%)paramaisclareamento. 3:00

16º Glicerina100%emH

O+timol

 3:00





 O timol pode ser diluído em uma gota (literalmente) de álcool absoluto e, então, adicionado à

glicerina.Destemodo,melhora‐seasolubilizaçãodotimolsemalteraçãoaconcentraçãodaglcerina.



MaterialeMétodos

ProtocolosdeHistologia

Procedimentoinicial

Oprotocoloabaixoserefere asequênciade preparação que antecedeascolorações.

Foiutilizadoindependentementedotipodetécnicadecoloraçãoempregada.

Desidratação

Álcool50% 1h

Álcool70% 2h

Álcool80%(

2h(podeserdeixadoovernight/ouatépor2dias,

poisnãoémuitoconcentrado)

Álcool90% 2h

Álcool95% 2h

ÁlcoolAbsoluto1,2e3 2hcada

Misturaálcoolabsoluto+benzol (overnight oupor2dias)

Benzol1,2e3 2hcad

Incl

usão

Parafina1 2h(Estufa)

Parafina2 2h (58ºC‐60ºC)

Blocagem

*Osblocosprontosparaseremcortadosecoradosoupodemserarmazenados

Cortesepreparaçãodaslâminas 6µm

*UsaralbuminadeMayer

paradistenderoscortesnalâmina,emcimadeplacaaquecida

Lâminasnaestufa 2h

Desparafinização

Xilol1e2 5mincada

Hidratação

ÁlcoolAbsoluto+xilol 3min

ÁlcoolAbsoluto 3min

Álcool95% 3min

Álcool90% 3min

Álcool80% 3min

Álcool70% 3min

Álcool50% 3min

Colocaremágu

adetorneira,corrente 5min

Colocar

emáguadestilada

Coloração(escolherotipo)



Desidratação

Álcool95%,comácidoacético1% 2min

Álcool95% 2min

ÁlcoolAbsoluto1e2 2mincada

ÁlcoolAbsoluto+xilol 2min

Xilol 2min

Diafanização

Xilol1,2e3 5mincada

MontagemdaLâmina

LâminacomPermount



AsoluçãodealbuminadeMayerpodeserpreparadacomamisturade50%declaradeovose50%de

glicerina100%.Bateremliquidificador,comumpoucodetimol.Paraouso,diluiraproximadamente10

gotasdasoluçãomãeemáguadestilada.Asoluçãodiluídadeveserdescartadaacad

adia.



MaterialeMétodos

ColoraçãocomHE

Preparodassoluçõescorantes

HematoxilinadeHarris

1) Dissolver2gdeHematoxilinaem20mldeálcoolabsoluto–24h

2) AlumendePotássioSulfato20g.Dissolverem400mldeáguadestilada–24h

3) Para o dia seguinte pesar: 1g de Hidragirum oxidatum rubrum cryst (óxido de

mercúriovermelho)

Preparo:

‐Juntarassoluções1e2,misturarbem.Adicionara3.

‐Colocarparaferver.Quandoestiverfervendo,deixarpor5min.



Eosina‐Floxina

A) SoluçãostockdeeosinaYa1%,emáguadestilada

B) SoluçãostockdeFloxinaa1%emáguadestilada

Soluçãocorante:

SolucaoA–50ml

SolucaoB–5ml

Álcool95º‐390ml

Ácidoacéticoglacial–2ml

Coracom30a40seg.



SequênciadebanhosparaacoloraçãocomHE:

Hematoxilina‐Eosina(HE)

Hematoxilina

(filtrarantesdeusar) 1min

Águadetorneira,corrente 10min

Águadestilada lavagem

Eosina

 2min

Águadetorneira,corrente 10min

Águadestilada lavagem







MaterialeMétodos

ColoraçãocomTricrômicodeMallory

Preparodassoluçõescorantes(Sols.AeB)

A) Fucsinaácida–0,5g

Águadestilada–100ml

B) Azuldeanilina–0,5g

LaranjaG–2g

Ácidofosfotungstico–1g

Águadestilada–100ml

Obs. O ácido fosfotungstico pode ser substituído por ácidofosfomolibídico 1g

ouácidooxálico2g.



SequênciadebanhosparaacoloraçãocomTricrômicodeMallory:

TricrômicodeMallory

CoraroscortesnasoluçãoA 2min

PassardiretamentenasoluçãoB 15min

Águadetorneira,corrente 10min

Águadestilada lavagem



Nota:comacoloraçãocomTricrômicodeMallory,asfibrascolágenas,retículo

de tecido conjuntivo, substância amiloide e muco coram em Azul. Núcleos:

protoplasma–fibroglia,neurogliacoramemvermelho.Eritrócitosebainhademielina

coramemamarelo.Fibrasdeelastinacoramemrosapálido.





MaterialeMétodos

ColoraçãodeVonKossa

Esta técnica foi compilada e adaptada de algumas fontes (cf. Sheehan &

Hrapchak, 1987; Crookham & Dapson, 1991). Também foi utilizado o sítio de

protocolos de histologia – http://www.protocol ‐online.org. A técnica final que foi

utilizadanopresentetrabalho,encontra‐sedescritaabaixo.

Descrição: Esta técnicadestina‐seademonstrar depósitos de cálcioousaisde

cálcio. Não é especifica para íons de cálcio. Neste método, seções de tecido são

tratadascomsoluçãodenitrato de prata e a prataédepositadapelasubstituiçãodo

cálcio reduzido pela luz, e então, visualizada como prata metálica. Pode ser utilizada

para encontrar depósitos anormais de cálcio em qualquer área do corpo. Método

muitomaiseficientequeacoloraçãodeHE,ondeecálcioaparececomoumazul‐lilás

escuro. É importante ter um material “controle” – tecido contendo conhecidos

depósitospositivosdecálcio,ouossonãodescalcificado.

Na coloraçãode Von Kossa, os ossos ou elementos mineralizados com  sais de

cálcio apresentam‐se pretos (ou marrom escuro), osteoides (núcleos) em vermelho e

citoplasmaemrosa.Esteéométodomaiseficiente esimplesparasepoderafirmara

presençadetecidosósseos.

Fixação: fixação em formalina (salina) 10%, cortes dos tecidos incluídos em

parafinaoufixaçãoemálcool,cortescongelados.Fixadoresácidosdevemserevitados,

poistendemadescalcificarasestruturas.

*Trataroscortescomsoluçãosaturadadecarbonatodelítiopararemoveruratos,se

presentes(20min.)

Preparodassoluções:

VANGIESON

‐Fucsinaácida1%‐7,5ml

‐Ácidopícricosaturado–92,5ml

‐Águadestilada–100ml



SoluçãodeNitratodePrata1%

:

NitratodePrata–1g



Existemvariaçõesdométodoutilizandosoluçãodenitratodeprataa5%.



MaterialeMétodos

Águadestilada–100ml

Misture bem, Colocar em garrafa marrom, limpa com ácido. Armazenar na

geladeira.Soluçãoéestáveldurante1ano.

ATENÇÃO:Eviteocontatoeainalação.

Nitrato de prata é um severo irritante da pele e olhos. Ingestão irá produzir

violentosproblemasgastrointestinais.Oncogenicidade.Oxidante.



Tiossulfatodesódio5%:

Tiossulfatodesódio–5g

Águadestilada–100ml

Useluvas,óculoselaboratóriocasaco.Evitarocontactoeainalação.

Otiossulfatodesódioé umpóirritanteaosolhos,peleesistemarespiratório.A

ingestãopodecausardistúrbiosgastrointestinais.



SoluçãoNuclearFastRed0,1%:

Nuclearfastred–0,1g

Sulfatodeamônia–5g

Águadestilada–100ml

Dissolver o sulfato de amônia em água. Adicionar  nuclear fast red e aquecer

lentamenteatéfervuraeresfrie.Filtreaadicionetimolcomoconservante.



SequênciadebanhosparaacoloraçãodeVonKossa:

‐ Incubar os cortes em solução de nitrato de prata 1% (ou 5%) em um recipiente de

vidro sob luz ultra‐violeta (por 20 a 45 min), ou sob sobluzbrilhante(60‐100Watts)

direta (por 30 min a 1h ou mais). Pode‐se usar folhas de papel branco, espelhos ou

papelalumín

iopararefletiraluz,diminuindootempodepermanêncianestesolução.

Aofinal,ocálciodeve‐seapresentarpretonomaterialcontrole;

‐Lavaremváriastrocasdeáguadestilada;

‐ Remover a prata não reagida com tiossulfato de sódio 1% ( ou 5%), em água

destilada,por5min;

‐Lavaremáguadestilada;

‐Contra‐corarcomalgumasdassolu

ções

vanGiesonpor5min,ou



MaterialeMétodos

nuclearfastredpor5min,ou

vermelhoneutro1%emáguadestilada

‐Lavaremágua;

‐Prosseguircomasequênciapadrão(desidratando)atéamontagempermanente.



Ilustraçõesefotografias

O processo de ilustração e fotografias começa com o correto posicionamento

dos exemplares. Além disso, uma vez posicionados, devem manter sua posição

estática,semqualqueroscilação.Paraoestudodelarvasdepeixes,istoéumgra

nde

desafio.Paracontornaresteproblemaforamutilizadasduastécnicasdistintas,asquais

foram igualmente muito úteis durante as dissecções. No caso de exemplares recém‐

eclodidos, estes foram posicionados sobre o gel de KY® (lubrificante), pois esta

substânciaémuitoviscosaeosmantêmimóveis.Contudo,nãoérecomendadodeixar

muitotempo,  umavezqueomaterialpodesofrerdeformações.Paraexemplar

esum

pouco maiores ou estruturas isoladas foi utilizado silicone industrial totalmente

transparente (Sylgard® 184 fabricado por Dow Corning ) para formar uma base nas

placas de Petri. Deste modo, os exemplares podem ser fixados com alfinetes micro

entomológicos(0,1x9mme0,2x15mm)semqualquerprejuízoquantoàiluminação.

Osexemplaresforamfotografadossobváriasampliaçõesembasicamentedois

métodos,deacordocomacomplexidadedomaterial.

Para o material de tamanho diminuto (recém‐eclodido a poucos dias pós

eclosão)foinecessárioequipamentoespecial,comgrandequalidadeópticaesistema

de captura eficiente, além de possibilidade de mudança da incidência da luz para a

visualizaçãodeestruturasnãocoradas.Nestecaso,omaterialfoifotografadocomum

estereomicroscópioLeicaMZ16,acopladocomumacâmeradigital paramicroscópios

Leica DC 500, conectada a um computador PC. Devido à pequena profundidade de

campo em grandes ampliações, foram feitas varias fotografias, em diferentes planos

focais. Então, estas imagens foram alinhadas emontadasutilizandoosoftwareAuto‐



MaterialeMétodos

Montage®, resultando em uma imagem completamente focada e preservando a alta

resolução.

Para o material mais corado foi utilizado a captura a partir de um

estereomicroscópio Coleman XTB‐3AT. A este equipamento foi acoplado um tubo

confeccionado em alumínio para a sustentação de uma câmera Sony Cybershot DSC‐

P72. Com isso, as fotografias são fei

tas exatamente na mesma ampliação que está

sendo observada pelas oculares.Igualmente, foram feitas várias fotos, em diferentes

planos focais. Estas imagens foram então alinhadas e montadas com o auxílio do

software CombineZP, desenvolvido e distribuído  gratuitamente (GNU Public Licence)

por Alan Hadley (http://www.hadleyweb.pwp.blueyonder.co.uk/). Neste programa,

apósoalinhamentodasimagens foiutilizadaa macro“softstack”queapresentou  os

melhores resultados finais. O arquivo

 gerado foi exportado em alta resolução no

formatoTIFF,semperdadequalidade.

As fotografias das lâminas histol ógicas foram feitas com microscópio Leica

(DM2500),acopladocomacâmeradigitalparamicroscópiosLeicaDC500,conectadaa

um computador PC. Quando necessário, várias imagens, em diferentes planos focais

foramfeitasemontadascomosoftwareAuto‐Montage®.

Todas as imagens foram tratadas no programa Adobe Photoshop® CS4 para a

eliminação de “resíduos” e melhora no “foco”

. Em seguida, no programa Adobe

Illustrator®CS4,asimagensreceberamaslegendas.

As ilustrações foram sempre feitas a partir de fotografias, as quais não eram

clarasapontodeserempublicadas,comoprogramaAdobeIllustrator®CS4

.

Omaterialmuitodelicadodevesermantidoomínimotempopossívelexposto 

à luz, principalmente a luz transmitida (por baixo), devido ao aquecimento. Tal fato

podedanificarirreversivelmenteosespécimes.Umavezque,duranteasdissecçõeso



Esteajustede“foco”temumefeitoexcelentenaqualidadedaimagemfinal,realçando‐ainteiramente.

Oprocedimentoésimples:gera‐seumacópiadacamadadaimagem>atribui‐seaestanovacamadao

blendmode,overlay>seleciona‐seofiltroother,highpass>ajusteatéoresultadoideal.

Emalgunscasosfoitestado,comsucesso,aimportaçãodedesenhos“tradicionais”noIllustrator®CS4,

possibilitando sua edição vetorial precisa. Uma vez inseridos no programa foi utilizado a metodologia

live trace, com os parâmetros em default, exceto: mode=black&White; threshold: 200; fills e strokes:

ativadoseminimumar

ea:0.



MaterialeMétodos

tempo é longo, esse “problema” foi contornado pelo uso de um negatoscópio

(MedalLightLP‐100),funcionandocomoumamesadeluzfria,oquetambémfacilitaa

fixação de balanço de branco em fotos digitais, uma vez que a temperatura de cor é

conhecidaehomogênea.



Terminologiaanatômica

Uma vez que os exemplares foram devidamente diafanizados foi possível a

observação de sua anatomia. Nos exemplares menores, especialmente os recém‐

eclodidose/oucompoucos dias apósaeclosão,não énecessáriasua dissecção.Para

os exemplares de tamanho maior, a  dissecção se dava pela remoção da cesta

branquial,sendosuficienteparaoestudocompletodocrânio.Nosexemplaresjuvenis

adissecçãoseguia,namedidadopossível,atécnicapropostaporWeitzman(1974).

Osnomesdeestruturaseórgãosnosanimaisnãoé coordenadoporumcódigo

internacional,fazendocomquenovostermossejamcriadosexcessivamente.Estefato

pode gerar várias confusões, principalmente pelas traduções das várias línguas.

Ultimamente, tem sido adotada a criação de novos nomes latinizados, a fim de se

evitar traduções errôneas. Desse modo, o presente estudo emprega, na medida  do

possível,anomenclaturajáexistentenaliteraturaparaocontextoontogenético.

Aterminologiaparaoscanaislátero‐sensoriaiséfeitadeacordocomNorthcut

t

(1989).Anomenclaturaeashomologiasdossistemasdecanaissensoriaissupraorbital

e infraorbital são aquelas de Arratia & Huaquin (1995). A terminologia anatômica

osteológica seguem aquelas propostas por Weitzman (1962), Lundberg & Baskin

(1969),Schaefer(1987)e Mo(1991).Paraanomenclaturadamusculaturafoiseguida

a proposta de Winterbottom (1974). A  identificação das artérias branquiais foi

baseada,principalmente,notrabalhodeAnker(1984).

Anomenclaturadasestruturasassociadasànotocorda,

especialmenteaquelas

presentes na porção anterior, relacionadas ao desenvolvimento do aparelho de

Weber, seguiu a proposta primariamente por Hoffman (2006). Este autor analisou a

diversa nomenclatura aplicada a estes elementos que estava disponível na literatura



MaterialeMétodos

compilando‐a. Abaixo segue a transcrição desta, traduzida para o português. Para

referencia ilustrativa vide a figura 4, que foi retirada e adaptada deste mesmo

trabalho.

Os basidorsais são estruturas cartilaginosas pareadas localizadas dorso‐

lateralmenteaoscentros vertebrais.Os arcos neuraisconsistemde metades direitae

esquerda, resultantes de ossificação (pericondral, membranosa) dos basidorsais da 

direita e esquerda, r

espectivamente. Os espinhos neurais se referem à parte da

vértebra que está situada dorsalmente à medula espinhal e aos supradorsais. Ele se

projeta do ponto de contato mediano entre as partes contralaterais do arco neural,

sendoumaestruturaímpareformadaporossificaçãomembranosa[aolongodosepto

mediano] nas vértebras anteriores dos Ostari

ophysi. Os espinhos neurais podem

tambémserpré‐formadosemcartilageme sedesenvolveremapartirdotopodecada

arco e podem, inclusive, ser pareados nos teleósteos basais (cf. Hoffmann, 2006;

Hoffmann & Britz, 2006). Gadow & Abbott (1895) usam o termo supradorsal para as

cartilagens autógenas pareadas bilateralmente que se condrificam medialmente nas

extremidadesdorsaisdecada metadedosarcosneuraisaabaixo doligamentodorsal

longitudinal.Esteselementosossificam‐seduranteodesenvolvimentoefundem‐seàs

facesmediaisdosarcos respectivosneurais(Grassi,1883). Entreosteleósteosbasais,

os supradorsais estão presentes nos arcos neurais das vértebras abdominais e,

geralmente, naqueles das vértebras caudais anteriores, variando nos táxons. Nos

otofisianos, os supradorsais somente se desenvolvemnasvértebras1, 3e4.Aqueles

dasvértebras3e4contribuemparaaformaçãodocomplexoneural.Ossupraneurais

(Goodrich,1930)sãoelementosóss

eosímpares,pré‐formadosemcartilagemnosepto

mediano,entre doisespinhosneuraisdasvértebrasabdominaisenãosãohomólogos

aosradiaisdospterigióforosdanadadeiradorsal(Mabee,1988).Ocomplexoneuralfoi

originalmentepropostoporNelson(1948;1949)comoumtermoparadesignaroosso

que,emalgunsOtophysi,cobreocanalneural

acimadasvértebras3e4.Hoffmann&

Britz (2006) estendem ousodeste termo para designar também apeça cartilaginosa

acima das quatro vértebrasmaisanteriores,precursora do complexo neural ósseo. A

formaçãodestaestruturaécomplexaenvolvendoelementoseprocessosdeformação

distintosnosváriosgrupos,conformediscutidopelosreferidosautoreseapresentado



MaterialeMétodos

no presente trabalho. O termo ossificação membranosa segue o sugerido por

Patterson (1977), designando um elemento ósseo que não é pré‐formado em

cartilagem.

Ostermosparapófiseeprocessotransversomerecemesclarecimentos.Ambos

referem‐se, tradicionalmente, às abas que se projetam lateralmente dos centros

vertebrais.Patterson(1984)e Fink&Fink(1981; 1996)propuseramqueeste

stermos

seriam sinônimos. Bird & Mabee (2003) definiram parapófise como um tipo de

processotransversoprojetadoventralmenteservindodepontodearticulaçãoparaas

costelas. Estes autores também definiram o processo lateral (transverso)

propriamente dito, como sendo uma parapófise modificada que se estende

lateralmente, partindo do centro vertebral. No entanto, conforme discutido por

Mayrinck(2010ecom.pess.)epelosresultadosdopresenteestudo,asparapófisese

os processos transversos têm origens ontogenéticas distintas, assim como

desempenham funções nos indivíduos adultos, invalidando as suposições previasque

seriamsinônimos.Mayrinck(2010)reportaque,analisandooexpostoporHoffmann

&

Britz (2006), a parapófise teria uma origem pré‐formada em cartilagem, enquanto o

processo transverso seria formado por ossificação lamelar (=dérmica). Outro aspecto

seria que as parapófises servem para articulação das costelas e os processos

transversos, para inserção de tendões. Estas últimas afirmações foram, de fato,

observadasnopresenteestudoejáreportadasporBritz&Bartsch(2003).Otrabalho

deHoffmann&Britz(2006)nãode

ixaclaro,notexto,asdiferençasexatasemambas

estas estruturas, mas, analisando as imagens ali presentes (cf. Fig. 5 daquele artigo),

pode‐se observar a formação do processo transverso aproximadamente na  linha

mediana horizontal docentrovertebral,enquantoaparapófiseseformaaoredorda

cartilagembasiventral.Osresultadosdopresentetrabalhosugeremqueaparapófise,

apesar de se relacionar com a  cartilagem basiventral, tem início como um filamento

ósseo dérmico e esta ossificação progride “cobrindo” o basiventral e se fundindo ao

centro vertebral. Com isso, o basiventral te

rmina por se degenerar completamente.

Nãoficaclaro,portanto,seessaformaçãopode,defato,serconsideradapericondral.

Um estudo anatômico completo destas estruturas foi feito por Gamble (1922), em

salamandras, suportando o discutido acima. No entanto, esse estudo foi



MaterialeMétodos

aparentemente ignorado pelos vários autores acima citados, uma vez que este

trabalhonãoconstanasreferênciasutilizadas.

Os nomes dos ossículos relacionados ao aparelho de Weber foram mantidos

emlatim(claustrum,scaphium,intercalarium,tripuseossuspensorium),semtradução

para o português, seguindo o exposto por Britto (2003). Estes nomes seguem a

nomenclaturamaistradicionalparaesteselementos,aqualfoipropostaporBridge&

Haddon (1889) e difere daquela originalmente descrita por Weber (1820). Devido ao

fatodeostextosdeBridge&Haddonserememinglês(agrandemaioriadaliteratura

anatômica no início do século XX era em alemão) a nomenclatura  foi amplamente

utilizada na comunidade americana. Alémdisso, comorelatadopor Krumholz(1943),

ela evita quaisquer possíveis confusões com os ossículos auditórios, não homólogos,

demamíferos

.

Para a identificação e nomenclatura das estruturas presentes nas lâminas

histológicas foi utilizada, na medida do possível, a escassa literatura específica para

peixes(Hibiya,1982;Gentenetal.,2009).

A tradução da nomenclatura para o português seguiu, na medida do possível,

aquela proposta por Castro & Castro (1987) para Characiformes com modificações

propostasporBritto(2003).Todososnomesdeestruturascitadasnotextoseguema

grafia no novo acordo ortográfico da língua portuguesa (e.g. Azeredo, 2008), que

entrou em vigor em 1º de janeiro de 2009. De acordo com esta nova ortografia são

feitosalgunscomentáriogerais.

Pelasnovasregrasdehifenação,apropostadeCastro&Castro(1987)continua

válidaparapalavrascomprefixos“pré‐“,“pós‐“e“pró‐“(e.g.pré‐maxilar;pós‐cleitroe

pró‐ótico).Paraamaioriadosprefixos,somenteusa‐seohífenquandoapalavraqueo

sucede começar com “h” ou com vogal igual à última do prefixo. Então, continua



–AnomenclaturadeWeber(1820)utilizavaosmesmosnomes,emlatim,queaquelesdesignadospara

osossículosauditóriosdemamíferos.Naquelaépocaerausualacomparação(“homologias”)dacoluna

vertebral, incluindo todas as modificações Weberianas com a dos demais vertebrados e postulava‐se

que os ossículos de Weber “correspondessem” aos do ouvido inter

o dos mamíferos (humanos) (cf.

Mueller,1842;Müller,1853).Noentanto,poucosanosapósapublicaçãodotrabalhodeWeber,alguns

autores já postulavam que os ossículos de Weber não seriam homólogos àqueles auditórios dos

mamíferos(cf.Huschke,1822;Geoffroy‐Saint‐Hilaire,1824).



MaterialeMétodos

correto a grafia basi‐hial, cerato‐hial, inter‐hial, uro‐hial e perdem o hífen as demais

(e.g. extraescapular; faringobranquial; infraorbital; supraoccipital). Britto (2003)

propõe cerato‐hial; ptero‐esfenóide e retro‐articular. Porém hífen nesses casos

também deixa de existir. A grafia de hipo‐hial está correta, assim como hipial e

considero de livre escolha. Aqui foi adotada hipial. Também é correta a grafia

interopérculo (para o prefixo “inter‐“ o hífen é utilizado somente quando a palavra

seguinte começa com “h” ou “r”). Seguindo Britto (2003), as palavras suspensor e

suspensóriosãosinônimos(cf.Houaissetal.,2001)eescolhe‐seoúltimoporsermais

semelhanteàgrafiaemlatimeinglês(suspensorium).

Quantoàacentuação,amaiormudançaparaostermospropostosporCastro&

Castro (1987) é sua perda nos ditongos abertos éi e ói das palavras paroxítonas (e.g.

coracoide;ectopterigoide;metapterigoide).

As discussões do presente estudo foram feitas, em sua totalidade, sob o

enfoque cladístico (Hennig 1950, 1966, 1968), conforme previamente discutido

(Introdução>TrabalhosontogenéticoscomOstariophysi).

 



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

R ESULTADOS –  DESENVOLVIMENTO DO ESPLANCNOCRÂNIO

Desenvolvimento do esplancnocrânio de Prochilodus argenteus, incluindo

condrocrânioeosteocrânio.



‐1ºdiaapóseclosão(3,2mmCP):

Nenhuma estrutura esquelética, cartilaginosa ou óssea (i.e. dentes) pode ser

vista. Mesmo em cortes histológicos verifica que há somente células mesenquimais

(indiferenciadas)(Fig.5).Acabeçaaindanãoestádespendidadosacovitelínico.



‐2ºdiaapóseclosão(4,4mmCP,Fig.6):

A região ocular está definida, mas o olho ainda não está formado. Apesar de

fracamente corada, é possível observar a cartilagem de  Meckel, como barras

cilíndricas,emambososladosdabordaposteriordaboca(queaindanãoestáaberta),

masnão secontatammedianamente.Posteriormente, alinhadascomacartilagemde

Meckel, surgem, sutilmente mais coradas, as cartilagens pares primordiais da cesta

braquial‐cartilagemdoarcohioideedosceratobranquiaisI–IV.Acartilagemdoarco

hioideéamaisespessadestasequasesecontatammedianamente.Ascartilagensdos

ceratobranqu

iais têm forma de bastões, e estão dispostas diagonalmente ao eixo

transversal do corpo. A cartilagem do primeiro ceratobranquial é a  maior delas e o

tamanho das mais posteriores reduz progressivamente, sendo a menor delas, a

cartilagemdoquartoceratobranquial(muitosutile fracamentecorada).Talfatoindica

a sequência de formação na direção ântero‐posterior. Os demais elementos da cesta

branquial,i.e.hipobranquiais,epibranquiais,faringobranquiais,assimcomoouro‐hial

eoshipiaisestãoausentesnesteestágio.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

‐3ºdiaapóseclosão(5,1mmCP,Fig.7):

A região ocular está definida e o olho está formado, com a retina (escura)

definida. A boca está aberta. A  cartilagem de Meckel está bem definida (corada),

possuindo um formato cilíndrico, em ambos os lados da mandíbula (maxila inferior).

Estão mais desenvolvidas que no estágio anterior, se curvando (acompanhando a

borda da boca) e se contatam medianamente. A região mais anterior é  mais fina e

menoscorada,indicandoserumaestruturacompoucamatrizcartilaginosa.Articula‐se

comolimiteposteriordacartilagemdeMeckel,umabarra cartilaginosacilíndricamais

delgada que aquela, alinhada longitudinalmente. Trata‐se da cartilagem palato‐

quadrado. Na sequência, evidencia‐se uma placa cartilaginosa diferenciada das

demais, cujo eixo principal está disposto dorso‐ventralmente e seu limite posterior

(mais expandido) articula‐se com a região da cápsula ótica (que já está bem

delimitada).Estaéacartilagemhio‐simplética,comocaracterísticoforâmenlocalizado

na região central desta, permitindo a passagem do ramo hioideo‐mandibular ( sensu

Arratia, 1992) do sétimo par  de nervos cranianos (n. facial). Dorsalmente, na borda

posterior, há o processo, opercular. No limite mais ventral, esta  placa cartilaginosa

afinaeestende‐seligeiramenteàfrente,ficandoventralmenteàmetadeposteriordo

palato‐quadrado.Estaéaregiãodaporçãosimplética(parssymplectica)

Surge um elemento cartilaginoso, articulado com o limite ventral da borda

posterior da cartilagem hio‐simplética e com o limite distal da barra cartilaginosa do

arco hioide. Trata‐se do inter‐hial, que possui um formato elíptico e encontra‐se

fracamentecorado.

Acestabranquialestámaisbemformada.Asestruturasmaisevidentessãoas

barrascartilaginosasdoarcohioide, comaproximadamenteodobrodaespessuradas 

cartilagens posteriormente subsequentes (ceratobranquiais). As cartilagens do arco

hioide estão dispostas diagonalmente ao eixo longitudinal e estão muito próximas

entre si na linha mediana. No limite  proximal, na face dorsal, existe um pequeno

processodorsal (regiãodosfuturoshipiais). Ascartilagensparesdosceratobranquiais

têmformadebastões,eestãodispostasparalelamenteàsdoarcohioide.Acartilagem

do primeiro ceratobranquial é a maior e mais corada de todas. O tamanho das



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

cartilagensmaisposterioresreduzprogressivamente.Nesteestágioestãopresentese

coradas as cartilagens dos quatro ceratobranquiais mais anteriores, sendo, a menor

delas, a cartilagem do quarto ceratobranquial. Articulando‐se na extremidade medial

das cartilagens dos ceratobranquiais I e II há nódulos cartilaginosos pares sutilmente

corados.SãoascartilagensprecursorasdoshipobranquiaisIeII,respectivamente.

Osdemaiselementosda cestabranquial,i.e.,epibranquiais,faringobranquiais,

assimcomoouro‐hialeoshipiaisestãoausentesnesteestágio.

Osteocrânio:Nabordabucalsuperiorencontram‐sealgunsdentescônicos(3–

5). Estão ancorados, em um filamento ósseo sutil e não corado, o os pré‐maxilar,

localizadonaregiãoanteriordacabeça(regiãodacartilagemetmoidal),logoabaixodo

neurocrânio.Namaxilainferior tambémháalgunspoucosdentes(3–6),suportados 

porumaossificaçãodérmicaquecircundaacartilagemdeMeckel(semsefundiraela),

oosdentário,queseestendedesdequase asínfiseatéoterçoanteriordacartilagem

deMeckel.

Naháindíciosdosraiosbranquiostégios.



‐4ºdiaapóseclosão(5,6mmCP,Fig.8):

A cartilagem de Meckel está mais robusta  (espessa) se comparada com o

estágio anterior e o processo, voltado ventralmente, em seu limite posterior, está

evidente(regiãoarticularcomopalato‐quadrado).

O palato‐quadrado sofre algumas mudanças importantes. A barra cilíndrica

primordial está mais espessa, pouco mais alongada e ligeiramente curvada

dorsalmente.Permanecena mesma posição. Estaporçãoprimordial agora constitui a

porção ventral do palato‐quadrado, uma vez que uma nova região de cartilagem se

desenvolve em sua face dorsal (porção dorsal do palato‐quadrado). Esta nova

cartilagem inicia seu desenvolvimento anteriormente, próximo à articulação com a

cartilagem de Meckel, e se estende dorso‐medialmente e, então, contata a parte

posterior da porção ventral do palato‐quadrado. Com isso, delimita‐se a fenestra

pterigoide(oufenestrametapterigoide‐quadrado,sensuRoberts,1969;Gosline,1973;



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Varietal., 1995; Zanata&Vari, 2005). Nasequência,surge um finoprocessoa partir

desuafaceântero‐dorsalqueseestendeanteriormente,nosentidodaplacaetmoidal.

Este é o chamado processo pterigoide. Todas estas novas estruturas cartilaginosas

associadasàporçãodorsaldopalato‐quadradosãomuitosutisefracamentecoradas.

A placa hio‐simplética também está ligeiramente modificada. Sua porção 

dorsal, articulando com oneurocrânio (região da capsula ótica) está mais expandida,

principalmentenaregiãoanterior.Suaporçãoventral(porçãosimplética)tambémestá

mais alongada anteriormente. O processo oper cular está ligeiramente mais alonga

posteriormente.Ointer‐hialestámaislongonoeixodorso‐ventralemaiscorado.

Acestabranquialapresentanovoselementoscartilaginosos.Naporçãomedial

dasbarrasdoarcohioide,sedesenvolveumaflangedorsalqueseráosprimórdiosdos

hipiais (dorsais). As cartilagens dos ceratobranquiais I a IV estão mais nítidas e bem

coradas e surge a cartilagem do ceratobranquial V. Apesar de fracamente corada é

possível definir seus limites. Possui em sua face medial, uma expansão, tomando

forma grosseiramente triangular. Surge o terceiro hipobranquial, na extremidade

medial do ceratobranquial III. Os hipobranquiais I a III ainda não está perfeitamente

definidos, e permanecem conectados aos respectivos ceratobranquiais e  à cópula

anteriorporumtecidocartilaginosomuitodelicadoetransparente.Nalinhamediana,

estãodefinidasduasbarrascartilaginosasímpares.Amaisanteriorseestendedoarco

hioide até o terceiro arco branquial. Esta é a cópula anterior e, posteriormente a ela

encontra‐seacópulaposterior.Apesarseestarcomseuslimitesdefinidos,encontra‐se

conectada, como uma massa cartilaginosa contínua, ao quarto e quinto arcos

branquiais.

Nas extremidades distais dos ceratobranquiais I a IV, se desenvolvem os

respectivosepibranquiais.OsepibranquiaisIaIIIsãofinashastes,fracamentecoradas,

enquantooquarto epibranquialestábemdefinido, apesardenãotãocoradoquanto

os ceratobranquiais. O epibranquial IV possui um formato grosseiramente triangular,

comsuafacemedialexpandida.Nãohásinaldosfaringobranquiais.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Osteocrânio:Osdentesassociadosàbordabucalsuperior(ospré‐maxila)estão

maisnumerosos(5–7).Posteriormente,surgeumnovofilamentoósseo,nãocorado.

Localiza‐separaleloàpré‐maxila.Trata‐sedoos‐maxilarenãoportadentes.

Namaxilainferiortambémsurgemmaisalgunsdentesassociadosaodentário.(6–8).

Este permanece circundando a cartilagem de Meckel em quase toda sua extensão,

com exceção da sínfise e  da região articular com o palato‐quadro. No entanto, não

estáconectadoeela.

A borda posterior do processo opercular está no início de ossificação e

aparecemosprimeirosfilamentosósseos,precursoresdoos‐opérculo.

Surgem os dentes faringianos (2)  associados à placa dentígera suprafaríngea,

que, neste estágio, é um simples filamento ósseo na base destes dentes. Um único

dente, maior que os faringianos, está presente na face dorsal do quinto

ceratobranquial.

Encontra‐se 1 a 2 raios branquiostégios na membrana branquiostégia,

associadosàbordaposteriordoarcohioide.Oprimeiroasurgiréomaislaterale,em

seguida,surgeomaismedial.Sãodelicadosfilamentosósseosnãocorados.



‐5ºe6ºdiasapóseclosão(5,9–6,3mmCP):

A únicanenhuma mudança nasestruturascartilaginosas é muitosutilavisível

somente em alguns exemplares. Consiste na formação de uma pequena barra

cartilaginosa na linha medial da cesta branquial. Está alinhada anteriormente com a 

cópula anterior e se projeta até logo após o limite anterior da cartilagem do arco

hioide.No entanto,estáposicionadaemum planomaisdorsalqueeste.Esteéoinício

de formação da cartilagem do basi‐hial. As estruturas tanto cartilaginosas quanto os

processos de ossificação dérmica estão ligeiramente aumentados e surge, em alguns

exemplares,umraiobranquiostégioadicional.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

‐7ºdiasapóseclosão(10,9mmCP,Fig.9):

Neste estágio destacam‐se as mudanças nas ossificações tanto dérmicas

quantocondrais,alémdoiníciodedegeneraçõesdascartilagensprimordiais.

AcartilagemdeMeckelnãosofrevariaçõesemseuformatonememespessura.

No entanto, a região mais anterior, logo após a sínfise está mais transparente,

indicando que esta  re

gião está se degenerando. Posteriormente, na região articular,

umpequenoprocessocartilaginososurgenafacedorsal.

A porção ventral da cartilagem do palato‐quadrado apresenta uma área de

cartilagem degenerada (transparente) logo após sua articulação com a cartilagem de

Meckel.Aporçãodorsalestácontínuacomaporçãoventral,sendodifícilsepararseus

limites,pr

incipalmentenaregiãoposterior.Oprocessopterigoide também apresenta

certa degeneração em seu terço médio. A extremidade  anterior deste processo se

espessadelimitandoaáreadeformaçãodacartilagemdoautopalatino.

Na placa hio‐simplética são percebidas mudanças em duas regiões. A porção

dorsal (hiomandibular) se alonga no eixo dorso‐ventral, fazendo perder o formato 

triangularinicial.Sua porçãoventral,regiãosimplética,tambémsealonga,porém,no

eixo ântero‐posterior. O processo opercular, na face posterior da cartilagem hio‐

simpléticaestámaisdesenvolvido.

A cartilagem do inter‐hial continua praticamente imutável com rel

ação ao

estágioanterior,semsinaldedegeneração.

Na cesta branquial surgem as cartilagens dos demais elementos, ausentes no

estágio anterior. Na extremidade medial das barras do arco hioide, as flanges

cartilaginosas, precursoras dos hipiais estão mais evidentes, quase se contatando

medialmente.Evidencia‐seumapequenasaliência,localizadaântero‐ventralmente,na

extremidad

emedialdacartilagemcerato‐hial,nopontoondeseiniciaaflangemedial.

Estaésaliênciacartilaginosaprecursoradohipialventral.

As cartilagens dos ceratobranquiais I a V estão praticamente imutáveis,

destacandoumaligeiradegeneraçãonopontomédiodacartilagemdoceratobranquial

I. Os hipobranquiais I a III continuam muito sutis e fracamente corados, mas estão



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

praticamente destacados dos respectivos ceratobranquiais. Os epibranquiais I a IV

estãomaisalongadosecomseuslimitesbemdefinidos.O epibranquialIVpermanece

sendo diferente dos demais, com sua extremidade medial expandida. Localizada

posteriormente e no mesmo plano que o epibranquial IV, surge, intimamente

associada à extremidade lateral do ceratobranquial IV, uma cartilagem cilíndrica,

sutilmente corada. Esta é a cartilagem do pseudoepibranquial V (usualmente

identificada como epibranquial V –  v. discussão). Nas extremidades mediais dos

epibranquiaisIIaIV,surgemosfaringobranquiais.Sãoestruturasdedifícilvisualização

devido à sua delicadeza e transparência. O faringobranquial II e III são finas hastes

cartilaginosas,enquantooIVéumcilindromais“robusto”.

Nos elementos medianos da cesta branquial,  destaca‐se a completa formação

da cartilagem do basi‐hial. Apesar de muito próxima, ela é uma cartilagem

independente da cópula anterior. Sua extremidade anterior apresenta

prolongamentos laterais, conferindo um formato de  “T”. Esta região situa‐se em um

plano mais dorsal que as cartilagens do arco hioide a região posterior se curva

ventralmente,sealinhado,nomesmoplano,comacópulaanterior.Acópulaanterior

permanece como uma estrutura contínua, enquanto a cópula posterior permanece

maissutil.

Osteocrânio

: Os dentes, tanto os bucais quanto os faringianos permanecem

indiferenciados,comformatocônico.

A pré‐maxila, apesar de não apresentar crescimento significativo em seu eixo

principal,apresentaumafinalâminaósseaemsuafacedorsal,comformatosemilunar,

voltada posteriormente. A maxila está mais robusta, com a extremidade mais dorsal

maisespessa.

Na maxila

 inferior, o dentário se expande notadamente, principalmente na

regiãodorsal,ondesuperaemaproximadamenteduasvezesaespessuradacartilagem

de Meckel. Esta, apresentar regiões mais claras. No entanto, não se define zonas de

ossificação (i.e. os mento‐meckeliano). Na  extremidade posterior da cartilagem de

Meckel,oprocessovoltadoventralmentecomeçaasofrerumaossificaçãopericondral



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

que tem início ventralmente e se expande pela cartilagem. Este é o primórdio do os

retroarticular.

Nacartilagemarticuladaposteriormente(palato‐quadrado)oosquadradoestá

seformandonoterçoanterior.Suaformaçãoderivadedoisprocessosdeossificação,

os quais, neste estágio, estão independentes. Ossifica‐se um fino filamento

lateralmente e ventral à cartilagem palato‐quadrado, que se esten

de do ponto de

articulação com a cartilagem de Meckel até a extremidade anterior da porção

simplética da cartilagem hio‐simplética. Em seguida, ossifica‐se endocondralmente  a

cartilagempalato‐quadrado,aproximadamenteemseuterçoanterior(Fig.10).

Nas séries opercular e pré‐opercular surgem alguns elementos. Todos muito

sutis

 e delicados, praticamente transparentes, como fina camada de pele. O os‐

opérculo é o mais desenvolvido com seus limites bem definidos, ainda que muito

fracamente corado e sem rigidez. Sua região mais anterior, articular com o processo

opercular da cartilagem hio‐simplética, está mais corada, indicando o ponto onde se

iniciaaossificação.Lateralmenteeacompanhandoolimiteposteriordoopérculoestá

o subopérculo. Inicia sua ossificação na região ventral, que está maisdesenvolvida,e

expande póstero‐dorsalmente, alcançando pouco acima da metade do opérculo. O

interopérculoestápresentesituadoemumplano lateral,ventralà porçãosimplética

da cartilagem hio‐simplética. Possui um formato triangular, com a extremidade

posteriormaisampla.

Estápresentetambém opré‐opérculo.Com um formatoligeiramentecurvado

anteriormente, situa‐se no eixo dorso‐ventral, se estendendo desde o processo

opercularatéaregiãosimplética.Suaossificaçãoteminícioventralmente,regiãomais

definidaeseespalhadorsalmentee,emseguida,posteriormente.

Na barra do arco hioide, dois centros de ossificação são distintos. Um dos

centros, bem evidente, localiza‐se na região média, sendoo primórdio do cerato‐hial

anterior. Na extremidade lateral da barra do arco hioide está o outro centro, bem

pequeno, responsável pela formação do cerato‐hial posterior. Na borda medial‐

anteriordaflange cartilaginosamedial,localizada naextremidademedial dabarrado

arcohioide,teminícioaossificaçãodohipial ventral.Nesteestágio estaossificaçãoé



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

muito sutil e difícil  de ser detectada. Esta região de ossificação coincide exatamente

comopontodeinserçãodotendãodomúsculosternohyoideus.

Posteriormente à barra do arco hioide, em um plano mais dorsal, surge um

filamento ósseo pareado, que se estende,aproximadamente,da extremidade medial

do primeiro ceratobranquial até a extremidade medial do terceiro ceratobranquial.

Este elemento, precursor do uro‐hial, é resultado de uma ossificação do tendão do

músculo sternohyoideus. (Fig. 11). Este tipo de ossificação é denominada de

sesamoide. Para um detalhamento sobre a formação de ossos sesamoides, sugiro a

consultaaorecentetrabalhodeJerezetal.(2010)eàliteraturalácitada.

Surgemmaisalgunsdentesfaringianos–totalizando3a5–associadosàplaca

dentígera suprafaríngea. Esta, apesar de ainda ser um simples filamento ósseo, está

intimamenteassociadaàplacacartilaginosadoquartofaringobranquial.

Encontram‐sequatroraiosbranquiostégios,bemespaçadosentresi.



‐9ºdiaapóseclosão(12,9mmCP,Fig.12):

Neste estágio o condrocrânio está completamente formado e as cartilagens

primordiaisestão,demodogeral,emprocessodedegeneraçãodevidoaoseventosde

ossificação.

A cartilagem de Meckel está completamente degenerada no seu terço mais

anterior, restando um pequeno nódulo na região sinfiseana. Este nódulo, ainda que

normalmentecoradocomazul,nãoéumacartil

agempropriamenteditaesimcélulas

mesenquimais em constante processo mitótico, produzindo células precursoras de

cartilagem. Este é o processo que permite o crescimento da maxila inferior. A

cartilagem de Meckel propriamente dita se afina na extremidade anterior, mas a

porçãoposteriorpermaneceinalt

erada.

A porção ventral da cartilagem do palato‐quadrado está quase totalmente

degeneradaanteriormente,naregiãoarticularcomacartilagemdeMeckel.Preserva‐

se uma região cartilaginosa no ponto de articulação. A porção dorsal, totalmente



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

fundida com a ventral, também está se degenerando, ficando palidamente corada,

principalmente na região do processo pterigoide. A extremidade anterior deste

processo,regiãodoautopalatino,permanecebemcorada.

As degenerações na placa hio‐simplética são mais evidentes em sua região

média, se estendendo desde logo ventral à sua articulação com o neurocrânio (na

região da  casula ótica) até quase a articulação com o inter‐hial. A cartilagem na

extremidade dorsal está preservada na região articular com o neurocrânio. Também

está quase imutável a região entre a porção dorsal  e a porção ventral – região

simplética. O processo ventral, apontado anteriormente da cartilagem hio‐simplética

(região simplética) está quase transparente, indicando início de degeneração

cartilaginosa.

A cartilagem do inter‐hial se mantém sem modificações, se comparada ao

estágioanterior.

Na cesta branquial, a cartilagem da barra do arco hioide está altamente

degenerada em seus centros de ossificação, principalmente na região média. A

extremidademedial,regiãodoshipiais,estáinalteradaemrelaçãoaoestágioanterior.

As cartilagens dos ceratobranquiais I – V, assim como dos epibranquiais I – IV

estão em início de ossificação e, consequentemente,bemdegeneradas. Em especial,

as cartilagens primordiais dos ceratobranquiais estão restritas às extremidades. Já as

cartilagens dos epibranquiais estão mais conservadas, exce

to por uma área

transparente na região média. Adicionalmente, todos os epibranquiais estão com os

processos uncinados cartilaginosos bem evidentes. Estes processos localizam‐se na

face ântero‐dorsal das barras, na região mais medial. O pseudoepibranquial V

(usualmente identificado como epibranquial V – v. discussão) está mais alongado,

quase alcanç

ando o processo uncinado do epibranquial IV. Mesmo neste estágio, a

íntima ligação (em nível histológico) do pseudoepibranquial V com o ce ratobranquial

IVaindapodeserobservada(Fig.13).

As cartilagens dos hipobranquiais I a III estão bem definidas e sem sinal de 

degeneração. A extremidade medial da barra cartilaginosa do ceratobranquial IV se



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

estende anteriormente. No detalhe, é possível perceber, no entanto, que esta

extensão não é homogeneamente continua com o ceratobranquial. Há uma pequena

área de densidade de matriz cartilaginosa menor, que se cora mais sutilmente. Isto

indicaqueestaextensãoseja,naverdade,ohipobranquialIVquenãosedesprendeno

seurespectivoceratobranquial.

Dorsalmente, nas extremidades dos epibranquiais II a IV, as cartilagens dos

faringobranquiais estão evidentes. Neste estágio surge também o faringobranquial I,

sendo um pequeno nódulo cartilaginoso. Os faringobranquiais II e III são maiores e

mais espessos. O quarto faringobranquial  é menor, ainda que mais espesso que os

maisanteriores.

A cartilagem do basi‐hial está bem nítida e corada com seus limites bem

definidos. Existe uma continuidade com a cópula anterior, porém completamente

transparente. A cópula anterior já apresenta degeneração em dois pontos distintos,

alinhadoscomo segundoeterceiroarcosbranquiais.Acartilagemdacópulaposterior

também está bem corada se estendendo desde a extremidade posterior da cópula

anterioratéolimiteanteriordascartilagensdosceratobranquiaisV.Posteriormentea

ela, está presente uma barra cartilaginosa mais sutil, porém independente, que se

estende na linha mediana, por entre os ceratobranquiais V, sendo identificada como

cartilagempós‐ceratobranquial (sensu Engeman et al.,

 2009). Esta barra cartilaginosa

seposicionaemumplanoligeiramentemaisventralqueacópulaposterior.

Osteocrânio:Osdentes,tantoos bucais quantoosfaringianos continuam com

formatocônico(indiferenciados).

A lâmina óssea dorsal da pré‐maxila está mais desenvolvida posteriormente,

conferindoàestaestruturaumformatogrosseiramentetriangularemvistaventral.A

maxila está mais espessa (não tão corada quanto a pré‐maxila) e se alonga

ventralmente.Aregiãodorsalcontinuamaisdesenvolvidaqueaventral.

Na maxila inferior, o dentário está mais espesso em toda sua extensão,

notadamente,naregi

ãoanterior,localemqueacartilagemdeMeckeldesapareceue

este osso se solidificou. Na extremidade posterior, o centro de ossificação do



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

retroarticularcontinuaimutável.Estáposicionadonoexatopontoemqueseinserem,

ao menos, dois ligamentos (mandíbulo‐interopérculo e mandíbulo‐hioideo).

Adicionalmente, surge dorsalmente um filamento ósseo na região côncava de

articulaçãocomopalato‐quadrado(os‐quadrado,nesteestágio).Esteéoprimórdiodo

osângulo‐articular.

Na porção ventral da cartilagem palato‐quadrado, o os quadrado está mais

desenvolvido,comaadi

çãodaossificaçãonaporçãodorsal.Ofilamentoósseolateral

se expande e alcança até o terço posterior da porção dorsal do palato‐quadrado. Na

porção dorsal do palato‐quadrado tem início as ossificações dos elementos da série

pterigoide.Oosmetapterigoideiniciaaossificaçãopericondralnaparteposterior.Esta

ossificação é muito sutil neste estágio. Anteriormente, acompanhando o processo

pterigoide,duasossifica

çõesdérmicassãovisíveis.Ventralmente forma‐seoinício do

ectopterigoide,cujaossificaçãoémuitofinaeseestendedesdearegiãoarticularatéo

terçoanterior.Oentopterigoideseformadoladodorso‐medialdoprocessopterigoide

e se estende da região anterior à ossificação do metapterigoide até o terço mais

anteriordoprocessopterigoide.Nãohásinaldaossificaçãodoautopalatino.

Na placa hio‐simplética, há um centro de ossificação ao redor do forâmen

central e circundando a região dorsal desta placa (pericondral). Este é o início da

formação do os‐hiomandibular. A região simplética está muito degenerada em sua

região central, indicando a formação do os‐simplético. No entanto, nos exemplares

desteestágio,nãoháevidencia(coloração)dedeposiçãodecamadamineralizada.

Nas séries opercular e pré‐opercular os elementos estão mais corados e com

seuslimitesbemdefinidos.Oos‐opérculocontinuasendooelementomaisdestacado,

mantendo o formato anterior, porem se tornando mais espesso, principalmente na

extremidade articular com o processo opercular e em sua borda anterior. O

subopérculo,queacompanhaamargemventro‐posteriordoopérculo,permanecesem

alteraçõessignificativas.Ointeropérculo,que ficasituadolateralmente aoselementos

condrais e medialmente ao pré‐opérculo, também permanece inalterado. O pré‐

opérculo, apesar de não se alongar anteriormente, se desenvolve rapidamente na



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

borda posterior, conferindo um formato triangular. Esta extremidade alcança o

subopérculo.

Nabarrahioide,oscentrosdeossificaçãotantodocerato‐hialanterior,quanto

doposteriorestãomaisdesenvolvidos.Nocentromedial(cerato‐hialanterior),naface

dorsal, surgem pequenas dobras ósseas, conferindo a  esta região um aspecto

tridimensional mais complexo. A ossificação do hipial ventral está mais nítida, ainda

que seja

 um simples “ponto” ósseo na borda medial‐anterior  da flange cartilaginosa

medialdabarradoarcohioide,coincidindocomopontodeancoragemdotendãodo

músculo sternohyoideus. Ainda ao longo da extensão deste tendão, localizada,

posteriormente,aossificaçãodouro‐hialestámaisnítidaecorada.Distinguem‐sedois

filamentosnaextremid

adeanteriordestaossificaçãoquesecontatam medianamente,

aproximadamentenaalturadoprimeiroarcobranquialeseestendemposteriormente

(como um filamento ímpar) até o nível da extremidade medial do terceiro arco

branquial.Comrelaçãoaoestágioanterior,háumpequenoespessamentodouro‐hial

Nosarcosbranquiais,ascartilagensdosceratobranquiaisI–V,assimcomodos

epibranquiais I – IV estão em início de ossificação. O processo de ossificação nestas

estruturasteminícionaregiãomédiade cadabarraeseestendeatéasextremidades.

As cartilagens dos ceratobranquiais estão mais ossificadas, com tecido mineralizado

sendo corado na região média. A partir deste ponto, até as extremidades, as

cartilagensestãotransparentes,indicandodegeneração.

Medianamente, a cópula  anterior  apresente dois centros distintos de

ossificação.Umanterioreoutroposterior,coincidindocomolimitemedialdosegundo

e terceiro arcos branquiais, respectivamente. São os centros responsáveis pela

formaçãodosbasibranquiaisIIeIII,respectivamente.

Existem inúmeros dentes faringianos, cônicos. A borda posterior do

ceratobranquial V está bem ossificada servindo de base sólida para o suporte dos

dentes. Dorsalmente a ela, os dentes suprafaringianos, também são suportados pela

ossificaçãodaplacadentígerasuprafaríngea,associadaàfaceanteriordaextremidade

medialdoquartoepibranquialeextremidadeposteriordoquartofaringobranquial



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Os quatro raios branquiostégios estão mais grossos devido à constante

ossificaçãolateralemedialemcadaum.



‐10ºdiaapóseclosão(13,0mmCP):

Nenhumamodificaçãorelevantenascartilagensouossificações.



‐12ºdiaapóseclosão(14,1mmCP,Fig.14):

Neste estágio as cartilagens primordiais do condrocrânio estão em fase

avançada de degeneração, enquanto as ossificações progridem, sejam dérmicas ou

condrais.

A cartilagem de Meckel está praticamente como descrita no estágio anterior,

i.e., terço anterior degenerado. O nódulo na região sinfiseana também permanece,

ainda que muitosutilmentecorado.Emcortehistológico suapresençaficaclara(Fig.

15).

Aporçãoventraldacartilagemdopalato‐quadrado,na regiãodaossificaçãodo

quadrado foi totalmente degenerada, assim como a cartilagem da porção dorsal, na

regiãoda ossificaçãodo metapterigoide,queestámuitodegenerada.Acartilagemna

extremidade articular com a cartilagem de Meckel está intacta. As demais regiões,

incluindo o processo pterigoide permanecem pouco degeneradas. A região do

autopalatino(extremidadeanterior)nãoapresentaqualquermudança.

A cartilag

em primordial da placa hio‐simplética, principalmente na região

dorsal, onde se ossifica o hiomandibular e  na região ventral – simplético – quase

desapareceu.Portransparênciaépossívelverum resquíciosempreao longodalinha

média. A  cartilagem primária (da placa hiosimplética) preserva‐se dorsalmente

(articulação com o neurocrânio), entre a ossificação do hiomandibular e simplético e

anteriormenteaosimplético.Nestasregiõesapresentam‐serazoavelmentecoradas.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

A cartilagem do inter ‐hial continua sem modificações, nem sinal de processos

deossificação.

Nacestabranquial,nãohámuitasmodificaçõesnascartilagens.Estastambém

continuamdesaparecendoconformeavançamosprocessosdeossificação.

Nos cerato e epibranquiais as cartilagens primordiais se restringem às

extremidades articulares. Nos epibranquiais I a III, as cartilagens dos processos

uncinados também permanecem inalteradas. No processo uncinado do epibranquial

IV, a cartilagem fica preservada somente na extremidade. A cartilagem do

pseudoepibranquial V (usualmente identificado como epibranquial V – v. discussão)

está mais evidente e mais alongada, sem nenhum sinal de degeneração e/ou

ossificação.

As cartilagens dos hipobranquiais I a III estão bem definidas e sem sinal de

degeneração. A expansão anterior na extremidade medial do ceratobranquial IV

continua não segmentada (i.e. sem delimitação do hipobranquial IV). Além disso, ela

estácomcoloraçãomaisuniforme,dificultandoaidentificaçãodossupostoslimitesdo

hipobranquialIV.

Na regiãodorsal da cestabranquial,as cartilagensdosfaringobranquiaisIaIII

estãoimutáveis.Jáoquartofaringobranquialapresentaumasutildegeneração.

A cartilagem do basi‐hial está bem nítida e corada com seus limites bem

definidos. Desapareceucompletamente a delicada cartilagem que aconectavacoma

cópula anterior. Ambas as cópulas não apresentam maiores modificações quando

comparadas ao estágio anterior. Em corte histológico evidencia‐se que  a cópula

anterior,naalturadoprimeirobasibranquialéumaestruturacilíndrica,semnenhuma

extensãoventral(comoencontradoembagres) (Fig.16).A barracartilaginosaquese

estende na linha mediana, por entre os ceratobranquiais V – cartilagem pós‐

ceratobranquial– estámalcorada,aindaqueevidenteecomlimitesdefinidos.Nãohá

sinaisdedegeneração.

Osteocrânio:Osdentes,tantoos bucais quantoosfaringianos continuam com

formatocônico(indiferenciados)ealinhadosemsomenteumafileira.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

O pré‐maxilar está mais desenvolvido, se aproximando da forma no adulto. A

extremidademedialestábemexpandidadorso‐ventralmente,conferindoumformato

grosseiramente triangular. O maxilar está mais alongado e com várias projeções

ósseas, de formas irregulares, principalmente na face posterior. Com isso, esse

elementonãotemmaisumaespessurahomogênea.

Na maxila inferior, o dentário está mais robusto e com os limites posteriores

bem definidos. A região anterior está consolidada e evidencia‐se a abertura medial

(sensu Castro & Vari, 2004) com formato elíptico, longitudinalmente localizada na

região dorsal. Na extremidade posterior da cartilagem primordial de Meckel, os

centros de ossificação estão bastante modificados. O centro ventral, origem do osso

retroarticular, está estendido anteriormente, com esta extremidade mais expandida

que a posterior, conferindo um formato cônico. No entanto, esta ossificação é ainda

muito delicada e fina. No centro dorsal, localizado na articulação com o palato‐

quadrado, origem do osso ângulo‐articular, a ossificação se estende em dois ramos

principais,dorsalmenteeanteriormente.Oreferidoossopossuiumaformairregulare,

apesardeaindamuitodelicado,émaisrobustoqueoretroarticular.Nafacemedialda

cartilagem de Meckel, na  borda dorsal, parcialmente coberto pelo dentário (mais

lateral) observa‐se um centro de ossificação. Este centro, relativamente bem corado,

localiza‐se exatamente no ponto onde se insere o tendão de um ramo do músculo

adductormandibulae(provavelmenteramoA3,Datovo,com.pess.).Trata‐sedoinício

da formação do osso corono‐meckeliano. Não há nenhuma fusão entre os ossos

associadosàcartilagemdeMeckel.

O osso quadrado está consolidado em sua porção anterior. O processo

longitudinal lateral desta ossificação está fundindo (ao menos anteriormente)  com o

quadrado. O osso metapterigoide, formado pela ossificação da região posterior da

porção dorsal da cartilagem palato‐quadrado está mais evidente e consolidado

somentenaregiãocentraldestaossificação.Estende‐seporquasetodaabarradorsal.

Lateralmente e medialmente ao processo pterigoide, as ossificações dos

ectopterigoide e entopterigoide – respectivamente – estão praticamente imutáveis. 

Em alguns exemplares, o ectopterigoide está ligeiramente mais espessado e corado



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

que o entopterigoide. A região do autopalatino continua sem sinais de processos de

ossificação.

O osso hiomandibular está quase totalmente consolidado, com exceção das

extremidades.Adicionalmente,umalâminaóssea de origem provavelmente dérmica,

se formou na borda anterior, torando o hiomandibular mais largo. Ao redor do

forâmen deste osso, especialmente na região posterior, formam‐se várias lâminas

ósseas finas

 perpendiculares, conferindo um formato tridimensional mais complexo.

Algumasdestaslâminas parecemestarfundidastambém como pré‐opérculo. Oosso

simplético se desenvolve, avançando ao longo da cartilagem da região simplética e

consolida‐se, exceto por suas extremidades. Neste estágio, se estende desde a parte

anterior (exc

eto pela extremidade, que permanece cartilaginosa) até a curvatura

dorsaldaplacahio‐simpléticasem,contudo,contatarohiomandibular.

Oossoopercularestámaiscoradoqueoestágioanterior esuaregiãoarticular

com o processo opercular da hiomandíbula apresenta várias lâminas mediais,

definindo a cavidade articular. O subopérculo não sofre alterações significativas,

conservandoseuformato.Contudo,estámaiscoradoeespesso.Ointeropérculo,cuja

visualização é difícil, pois fica sob (medial) ao pré‐opérculo, está alongado

posteriormente, quase alcançando o opérculo. Seu formato permanece inalterado,

com a extremidade posterior larga e afinando‐se anteriormente. Opré‐opérculoestá

mais consolidado, especialmente na borda posterior do canal pré‐opercular, a qual é

nitidamenteumalinhaósseabemespessa.Seuformatoetamanhopermanecemcomo

noestágioa

nterior.

Aossificaçãodocerato‐hialanteriornafacedorsalapresenta,especialmentena

facedorsal,um númeromaior depequenasdobrasósseas.Algumasdestasdobras se

fundem,contribuindoparaaconsolidação

desteelemento.Aossificaçãodocerato‐hial

posterior,localizadanaporçãoposterior,cujaorigemfoinabordaposterior,continua

tímida,semestruturasmineralizadassendocoradas.

O hipial  ventral está mais desenvolvido. Seu ponto inicial de ossificação (i.e.

local de ancoragem do tendão do muscular) está mais ossificado são observadas

ossificações laterais côncavas (anteriores) e retilíneas (posteriores) partindo deste 



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

centroinicialdeossificaçãoeseestendendosobreacartilagem.Seguindootendãodo

tendão do músculo sternohyoideus posteriormente, encontram‐se ossificações

pareadassobreeleatéoníveldapassagemdoramoanteriordaartériahipobranquial,

que irriga a maxila inferior. A partir deste ponto, estas ossificações de fundem,

formando uma única estrutura medial, o uro‐hial. Neste estágio, este elemento

apresentaumafinaedelicadaquilhadorsal,alémdeossificaçõeslateraisaolongode

seu limite ventral. Isso confere a este elemento um aspecto de “T” em um corte

transversal. Histologicamente, observa‐se a grossa camada óssea nos tendões do

referidomúsculo(Fig.17).

As ossificações dos ceratobranquiais I a V cobrem toda a extensão das barras

cartilaginosa

s primordiais, com exceção das extremidades articulares. Ao redor da

região central de cada elemento, a ossificação está consolidada. Adicionalmente, o

ceratobranquial V possui uma lâmina óssea na borda medial, suportando os dentes

faringianos. Os epibranquiais I a IV seguem o mesmo padrão de ossificação dos

ceratobranqu

iais.OprocessouncinadodoepibranquialIestáossificadoemsuabase.

Osprocessosdosdemaisepibranquiaispermanecemcartilaginosos.Aplacadentígera

suprafaríngeaestá associadaprincipalmenteàextremidademedialdoepibranquial  IV

eportainúmerosdentescônicos.

Medialmente, os centros de ossificação da cópula anterior, precurso

res dos

basibranquiais II e III, permanecem inalterados quanto a extensão, estando somente

maiscorados(maiorossificação)

Existem inúmeros dentes faringianos, cônicos. A borda posterior do

ceratobranquial V está bem ossificada servindo de base sólida para o suporte dos

dentes. Dorsalmente a ela, os dentes suprafaringianos, ta

mbém são suportados pela

ossificaçãodaplacadentígerasuprafaríngea,associadaàfaceanteriordaextremidade

medialdoquartoepibranquialeextremidadeposteriordoquartofaringobranquial

Os quatro raios branquiostégios continuam a se alargar pelos processos

constantesdeossificaçãolateralemedialemcadaum.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

‐15ºdiaapóseclosão(21,4mmCP,Fig.18):

As cartilagens primordiais do condrocrânio restritas somente aos pontos de

articulação.Norestante,estãototalmentedegeneradas.

AcartilagemdeMeckelaindapodeservistaportransparência,comoumafina

barra,naregiãoposteriordamaxilainferior.Onódulocartilaginosonasínfisenãoestá

corado.

Acartilage

mprimordialdopalato‐quadrado está restritaàregião posteriorda

porção ventral. O processo anterior desta cartilagem (processo pterigoide) não está

maisvisível,tendosedegeneradototalmenteaolongodeseueixo(desdesuabase,na

porção dorsal do palato‐quadrado, até quase a extremidade anterior), exceto pela 

porção mais anterior, região do autopalatino. Esta c

artilagem, precursora do

autopalatino,estáisolada,bemcoradaemaisexpandida,grosseiramentecircular.

A cartilagem primordial da placa hio‐simplética está restrita à extremidade

dorsal – região de articulação da hiomandíbula com o neurocrânio – região central –

articulaçãodahiomandíbulacomosimplético–eregiãoanterioraosimplético.

Acartilagemdointer‐hialserestringeàextremidadedorsaldesteelemento.

As degenerações das cartilagens primordiais acontecem também na cesta

branquial.

Nos cerato e epibranquiais as cartilagens primordiais se restringem às

extremidades articulares, como no estágio anterior e se manterão assim mesmo no

adulto.

 As cartilagens nos processos uncinados dos epibranquiais I a IV estão

ligeiramente degeneradas. A cartilagem do pseudoepibranquial V (usualmente

identificado como epibranquial V – v. discussão) continua imutável e ligeiramente

maiorquenoestágioanterior.

AscartilagensdoshipobranquiaisIaIIIestãomenoscoradas,indicandoqueos

processosdedegeneraçãojáiniciaram.Aexpans

ãoanteriornaextremidademedialdo

ceratobranquialIVestáuniforme,semlimitesparadefinirosupostohipobranquialIV.

Noentanto,comparandocomohipobranquialIII,nota‐seomesmopadrãodeinserção



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

de ligamentos na região anterior de ambas as estruturas. Dois finos ligamentos são

bem evidentes (Fig. 19A). Ambos compartilham o mesmo ponto de inserção nos

hipobranquiais. O ligamento medial se liga na borda posterior do hipobranquial

anterior e o ligamento lateral liga‐se ao limite posterior da cartilagem medial do

ceratobranquial anterior. Este  padrão repete‐se, exatamente conforme descrito, nos

demais hiporanquiais, evidenciando sua homologia serial. Este é mais um  forte

argumentodequeohipobranquialIVestápresente,porémnãosesegmentouapartir

daextremidademedialdoceratobranquialIV.

Naregiãodorsal da cestabranquial,ascartilagens dosfaringobranquiaisIa IV

estãosedegenerando,principalmentenaregiãocentraldecadabarra,ondenãomais

sãoobservadostraçoscartilaginosos.

A cartilagem do basi‐hial continua bem definida anteriormente. Porém, na

extremidadeposterior(articulando com a cópula anterior)háumadegeneraçãomais

forte,peloiníciodeossificação.Emdetalhe,aindaobserva‐seumtecidosupostamente 

cartilaginoso conectando a cartilagem do basi‐hial à cópula anterior (Fig. 19B). No

entanto,asegmentaçãodeambasé clara.Acartilagem pós‐ceratobranquialcontinua

evidente e aumenta de tamanho anteriormente, se estendendo além do limite

posteriordacópulaposterior.Todavia,estabarracartilaginosasesituaventralmenteà

cópula posterior e observa‐se que ambas estão fundidas na  região de sobreposição

(Fig.19C).

Osteocrânio

: os dentes bucais sofrem grandes modificações. Os dentes

indiferenciados,cônicosforam substituídospelosdentes“definitivos”,ouseja,dentes

especializados, característico da família, com a extremidade exposta, expandida. Os

dentes, já não estão mais associados aos ossos pré‐maxilares e dentários. Ficam

implantados no lábio que já está bem desenvolvido, como no adulto. Poss

uem

somenteumafileiradedentesdereposição.Estesdentesdereposiçãosãocônicosea

a morfologia característica do dente funcional (exposto) é adquiria à medida que

migramanteriormente(Fig.19D).Noentanto,apesarde seremcônicos,suaorigemé

distinta dos dentes cônicos (indiferenciados) dos estágios anteriores. Não há dentes

associadosaomaxilar.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

O pré‐maxilar está bem desenvolvido, sendo uma barra óssea com a

extremidade dorso‐medial expandida e afina‐se em direção à extremidade ventro‐

lateral, com exceção de uma lamina óssea que se projeta posteriormente. O maxilar

alonga‐se e expande‐se ventralmente, além de uma pequena projeção triangular

anterior.Émaioremaislargoqueopré‐maxilar.

Na maxila inferior, o dentário está mais sólido, especialmente na região

anterior. Sua borda dorsal está evidente e bem corada, se estendendo dorsalmente,

além da linha horizontal que passa pela abertura da boca. Sua extremidade ventro‐

posterior quase atinge o limite da cartilagem de Meckel, exceto pelos centros de

ossificaçõesposteriores.Estescentrosforamoossoretroarticular,ventralmente.Este

osso possui um formato grosseiramente triangular, com seu ápice voltado

anteriormente.Estáemíntimocontatocomoossoângulo‐articular(maisdorsal).Este

se alonga enormemente na região dorsal, conferindo uma forma de lança. Sua base

bem mais larga que seu ápice dorsal, que se alinha  com a borda dor sal do dentário

(lateralaesse).Oossocorono‐meckeliano,nafacemedialdacartilagemdeMeckel,na

borda dorsal, não apresenta mudanças significativas em comparação com o estágio

anterior

O osso quadrado está consolidado em sua porção anterior, incluindo o

processolongitudinallateral,queseestendeposteriormenteatéolimiteposteriordo

simplético,estandomaislateralqueesteelemento.Aporçãodorsaldoquadradoestá

expandida e voltada ligeiramente para trás, mantendo ainda a posição da antiga

cartilagemdaporçãodorsaldopalato‐quadrado.Oossometapterigoideocupa todaa 

região superior da porção dorsal do palato‐quadrado, se estendendo desde o limite

anteriordahiomandíbulaatéalinhaverticalquepassapelamargemanteriordaórbita

ocular.

Oectopterigoideeento

pterigoideestãobemformados.Oectopterigoideainda

mais robusto que o entopterigoide. Ambos se tocam  ao longo do eixo do processo

pterigoide, cuja cartilage

m não mais existe. Não há fusão entre estes elementos. O

ectopterigoide, curvado anteriormente, se estende desde o limite ventral do

quadrado, estando medial a ele, até a cartilagem do autopalatino. O entopterigoide,



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

curvado dorsalmente, articula‐se com o metapterigoide e também se estende até a

cartilagemdoautopalatino.Aregiãodoautopalatino,apesardeisolada(segmentada)

continuasemsinaisdeprocessosdeossificação.

O osso hiomandibular está quase formado e consolidado. A lâmina óssea

anterior também se fundiu, fazendo com que este elementotenha um formato mais

retangular.Aregiãoaoredordoforâmenparaapassagemdoramohiomandibulardo

nervo fácil é a que apresenta mais “ornamentações” ósseas, conferindo um aspecto

tridimensional mais complexo. O osso simplético está totalmente desenvolvido

anteriormente, ao longo da cartilagem primordial, que se conserva na extremidade.

Porém posteriormente, ainda há uma área cartilaginosa relativamente  grande,

permitindo a expansão do simplético, posteriormente, e da hiomandíbula, ântero‐

ventralmente.

Oossoopercularestámaiscoradonãoapresentamodificações.Osub‐opérculo

está mais largo, aumentando ventralmente e se estendo ligeiramente na região

posterior, sem, contudo, ultrapassar o limite posterior  do opérculo. O interopérculo,

medialmente posicionado em relação ao pré‐opérculo, está mais largo e maior,

posteriormente, alcançando o limite anterior do opérculo. O pré‐opérculo está

ligeiramente mais expandido na borda posterior, acompanhando o limite anterior do

opérculo em toda sua extensão. Surge uma nova ossificação, ao longo do canal pré‐

opercular, anterior ao limite ânte

ro‐ventral do pré‐opérculo. Este é o início da

formação do sub‐pré‐opérculo (sensu Roberts, 1973b) ou porção anterior  do pré‐

opérculo(sensuWinterbottom,1980;Vari, 1983; Castro&Vari, 2004). Nesteestágio,

esteelementoéumpequenoefinocilindrooco.

A ossificação do cerato‐hial anterior está consolidada no ponto médio e se

estende ante

rior e posteriormente, ocupando aproximadamente metade do

comprimento do arco hioide. A ossificação do cerato‐hial posterior se expande

ventralmente, porém ainda restam áreas cartilaginosas nas margens deste centro de

ossificação.Ospontosdemaiordeposiçãomineral(locaisondeseiniciouaossificação)

coincidemcomoslocaisdeinserçãode  ligamentose/ou tendões(Fig.20A),incluindo

os ligamentosarticulares(i.e.entreo cerato‐hial posterior e ointer‐hial).Ointer‐hial



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

está quase totalmente ossificado, exceto pela extremidade dorsal e tem formato

cilíndrico(Fig.20A).

Ohipialventralestámaisdesenvolvido.Apartirdopontoinicialdeossificação

(i.e.localdeancoragemdotendãodomuscular)esteprocessoseestendedorsalmente

atéoforâmenparapassagemdeartériahioideaferente(cf.Allis,1908b;Berril,1925;

Bertmar, 1962; Arratia & Schultze, 1990; Muñoz‐Chapuli et al., 1993) (Fig. 19B).

Dorsalmenteaeste  elementoossifica‐seo hipial dorsal.Estaossificaçãoestáem fase

inicialdeformação,não passandodeumapequenaregiãoarredondadaao redordos

pontos de ancoragemdosligamentosentre este elementoea  extremidadeposterior

do basi‐hial. A região posterior do basi‐hial também está em início de ossificação, a

qualseoriginanaextremidadeposterior(regiãodeinserçãodoligamentoop.cit.)ese

estende anteriormente, todavia, não ultrapassando a linha vertical que  passa pela

bordaanteriordoarcohioide(Fig.19B).Vari(1983)reportaeilustraduasossificações

distintasnobasi‐hial:umaposterior, chamadadebasi‐hial,na linhamedianae outra,

portadoradedentes,queabrangetodaaáreadeexpansãolateral(emformade“T”)e

se sobrepõe dorsalmente ao basi‐hial, chamada de placa dentígera basi‐hial. Neste

estágionãoháindíciosdedentesoudeossificaçõesanterioresnacartilagembasi‐hial.

O uro‐hial, que se desenvolve sobre o tendão e músculo sternohyoideus

propriamente dito, está bem consolidado, especialmente em sua porção anterior. Os

doisramosanteriores,queseossificam sobreotendão,nãose fundemmedialmente

(Fig. 20B). Posteriormente, este elemento se estende pouco além do limite posterior

do arco hioide. Em vista lateral, evidencia‐se sua lâmina medial que se projeta

dorsalmente,partindodopontoposterioraoforâmenhipobranquialeseestendendo

alémdolimitedafaceventral(Fig.20C).

AsossificaçõesdosceratobranquiaisIaVpermanecem conformedescritasno 

estágio anterior, com mineralizações adicionais partindo do centro em direção às

extremidades. Este mesmo padrão é encontrado nos epibranquiais I a IV. Nestes

elementos a ossificação se estendetambém aos processos uncinados dorsais, exceto

naextremidade,quepermanececartilaginosa.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

A placa dentígera suprafaríngea está mais associada com a extremidade

posteriordofaringobranquialIVquecomaextremidademedialdoepibranquialIVNão

hásinaldecoossificação, umavezquenenhumdoselementosassociadosapresentam

qualquersinaldemineralizaçãonestaspartes.

Nacópulaanterior,osbasibranquiaisIIeIII,permaneceminalteradosenãohá

sinaldeossificaçãodaextremidadeanteriordacópula.

Osquatroraiosbranquiostégios estãomaislargos.Porém énítidoqueaoeixo

centraldecadaumémaisespesso,ficandomaisfinonasbordas.



‐25ºdiaapóseclosão(30,6mmCP,Fig.21):

AcartilagemdeMeckelpodeservistaportransparência,tendosidoreduzidaa 

uma fina barra, na região posterior da  maxila inferior. Este estado permanecerá

mesmonosadultos.

Acartilagemprimordialdopalato‐quadradoestámaisreduzidaquenoestágio

anterior, se restringindo à região ventral, na articulação do quadrado com  o

metapterigoide. A cartilagem do autopalatino – resquício do processo pterigoide

permanececomformatonodular,semqualquersinaldeossificação.

A cartilagem primordial da placa hio‐simplética permanece nas extremidades

originais (i.e., extremidade anterior do simplético e dorsal da hiomandíbula). Além

destes pontos, ainda está presente entre as suas duas ossificações (i.e. simplético e

hiomandibular),unindo‐as(cf.cartilagemsimplética).

A cartilagem do inter‐hial continua restrita à extremidade dorsal deste

elem

ento.

Nos cerato e epibranquiais as cartilagens primordiais se restringem às

extremidadesarticulares, incluindoasextremidadesmediaisdosprocessosuncinados

dos epibranquiais. Esta condição que permanecerá mesmo nos adultos. O

pseudoepibranquial V (usualmente identificad

o como epibranquial V – v. discussão)

permanece cartilaginoso e nunca sofre qualquer processo de ossificação mesmo em



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

adultos. Apesar de ligeiramente maior que no estágio anterior, não sofre qualquer

alteraçãodeforma,tendoalcançadosuaformafinal(estágioadulto).Evidencia‐seum

delicado ligamento partindo do limite  dorsal do pseudoepibranquial V e se inserindo

nafaceventro‐posteriordoprocessouncinadodoquartoepibranquial.

As cartilagens dos faringobranquiais I a IV, localizadas nas extremidades

mediais (região dorsal) dos respectivos epibranquiais continuam se degenerando.

Somentesãoperceptíveisnasextremidadesdecadaelemento.A cartilagemdoquarto

faringobranquial é a  mais preservada e mais longa de todas. Nenhuma alteração de

formaéobservada.

As cartilagens dos hipobranquiais I a III continuam se degenerando, como

descritonoestágioanterior.Aexpansãocartilaginosaanteriornaextremidademedial

do ceratobranquial IV, suposto hb IV + cb IV permanece uniforme (i.e. sem

segmentação)esemdegeneraçãoaparente.

A cartilagem do basi‐hial apesar de estar anda bem definida (com sua forma

primordial)apresentapontosdedegeneração sendo o posterior, omaisevidenteeo 

anterior,maissutil,emsuaregiãocentral.(Fig.22).Posteriormente,noeixomedial,a

extremidadeposteriordacópula anterioriniciasuadegeneração,assimcomoacópula

posterior. Nesta última estrutura, a degeneração é muito sutil e predominante em

uma fina linha mediana na face dorsal (Fig. 23A). A cartilagem pós‐ceratobranquial

continuaconformedescritanoestágioanterior,semsinaisdegenerativos.

Osteocrânio:osdentesbucais,assimcomonoestágioanterior,jáseencontram

implantados no lábio carnoso e não nos ossos (dentário e/ou pré‐maxilar). Neste

estágio já são observadas 2 fileiras de dentes de reposição. Na fileira mais interna

(posterior),osdentespossuemum  formato mais cônico e, conformesemovemmais

anteriormente (fileira  mais exposta), suas cúspides se expandem. Desse modo, os

dentes,quandoemergem,jáestãototalmentediferenciadosnoformatocaracterístico

dafamília(Fig.23B).

O pré‐maxilar está mais desenvolvido, com algumas “ornamentações”,

principalmente em sua face lateral, devido ao contínuo espessamento ósseo.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Evidencia‐se a expansão dorso‐medial em sua borda posterior. O maxilar, bem mais

pronunciado que o pré‐maxilar, situa‐se medialmente a este e  expande‐se

ventralmente, excedendo os limites dorsais do dentário. Possui várias fenestras e

algumas delicadas quilhas em sua face lateral. Com um formato grosseiramente

trapezoidal,destaca‐se,emsuafaceanterior,umprocessodelgado,euma expansão

arredondada em sua face posterior. Dorsalmente, afina‐se abruptamente formando

umprocessodelgado(Fig.23B).

Na maxila inferior, os elementos ósseos estão praticamente com os formatos

finais, encontrados no adulto. O dentário é o elemento predominante. Está

consolidado, com sua abertura medial (sensu Castro & Vari, 2004) bem evidente,

localizadaabaixodaborda dorsal, noterçoanterior.Suabordadorsalcurvadadorso‐

posteriormente, se expande pouco além do limite médio da abertura bucal e se

projeta posteriormente até uma linha vertical que passa pela articulação da maxila

inferiorcomosuspensório.Naregiãoventraldaextremidadeposteriorencontra‐seo

ossoretroarticular.Trata‐sedeumelementodiminuto,grosseiramentetriangular.Sua

face dorsal ligeiramente arredondada. Articula‐se ventralmente com o dentário e

dorsalmente com o ângulo‐articular. O osso ângulo‐articular situa‐se dorsalmente na

extremidadeposteriordamaxilainferior.Alonga‐sedorsalmenteatéolimitedorsaldo

dentário, situando‐se lateral e  este e afinando em seu terço mais dorsal. No terço

médio, evidencia‐se uma expansão anterior, que se posiciona medialmente ao

dentárioeseestendeventralmenteatéa basedesteelemento.Suabordaposterioré

relativamentelisa,excetopelocôndiloarticularlocalizadopróximoàsuabaseventral.

Esteéopontodearticulaçãocomoquadrado(suspensório)(Fig.23B).Oossocorono‐

meckeliano não apresenta mudanças significativas em comparação com o estágio

anterior,sendoumfilamentoósseonosentid olongitudinal,localizadonafacemedial

da maxila inferior, dorsalmente ao processo medial do dentário. Evidencia‐se a

inserção do tendão de um ramo, provavelmente o ramo A3, do músculo adutor

mandibular, reforçando a hipótese de que este elemento seja originado de uma

ossificaçãosesamoidedestetendão(Fig.23C).

Nosuspensório,oselementosósseosestãomuitopróximosdesuaformafinal,

encontrada nos exemplares adultos. O osso quadrado possui um formato



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

grosseiramente triangular, cujo vértice principal é a extremidade anterior, que se

articulacomamaxilainferior.Posteriormentehátrêsprocessos,cujasbases,próximas

aovérticeprincipalsecoossificam.Osprocessosdorsal–queéomaisrobusto(largo)

– e o longitudinal são os pré‐formados em cartilagem (condrais). O processo mais

lateralediagonalmentevoltadoparabaixo(ventral)édeorigemdérmica.Esteúltimo

processo começou a se coossificar na região anterior e, neste estágio, evidencia‐se

uma fina lâmina óssea entre seu terço médio e o restante do osso quadrado.

Posteriormente ao processo longitudinal do osso quadrado encontra‐se o osso

metapterigoide, também condral (cartilagem palato‐quadrado). Este elemento se

estende até o limite anterior da hiomandíbula. Dorsalmente, cobre toda a área

inicialmente delimitada pela cartilagem palato‐quadrado e, anteriormente, alcança o

limite anterior da órbita ocular. Observa‐se a formação de duas delicadas lâminas

ósseas que se fundem ao osso pré‐existente unido a porção transversal às duas

extensõeslongitudinais(anterioreposterior).

Oectopterigoideeentopterigoideestãobemformadosemaisextensosqueno

estágio anterior. O ectopterigoide continua mais largo que o entopterigoide e se

estendemedialmenteaoprocessodorsaldoossoquadrado.Aregiãodoautopalatino

continuasemapresentarsinaisdeprocessosdeossificação.

Oossohiomandibularalcançaseuformatofinal.Estáconsolidadocomformato

de um bloco retangular, alinhado transversalmente ao eixo do corpo. Possui várias

ornamentaçõesemsuafacelateraldevidoaoscontínuosprocessosdeossificaçãoque

formam finas e delicadas lâminas ósseas. Este osso se estende dorsalmente,

articulando‐se com o neurocrânio, até, ventralmente,alcançaroosso

 simplético. Sua

região ventral é ligeiramente expandida posteriormente, região na qual se articula,

ventralmente,ointer‐hial.Oosso simplético, situadoanteriormenteaolimite  ventral

dohiomandibularestáquasetotalmentedesenvolvido,restandoumapequenaregião

cartilaginosaentreesteosso eohiomandibular.Seuformato,mesmonoadulto,éde

umcilindroliso,alinhado

longitudinalmente.

Os ossos da série opercular estão todos completamente formados, sem

alteraçõesemseus formatos comrelaçãoao estágioanterior.As diferençassefazem



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

naespessura,queaumentaráconformeocrescimentodoindivíduo.Oossoopercular

é o elemento mais evidente desta série, articulando‐se anteriormente  com a

hiomandíbula. O sub‐opérculo situa‐se medial ao opérculo e tem um tamanho bem

reduzidoemcomparaçãoàquele.Anteriormenteaambos,localiza‐seointeropérculo,

que se estende desde a região do osso quadrado até alcançar  o limite anterior do

opérculo.

O pré‐opérculo também atingiu seu formato final. Sua face lateral permanece

lisa. Localiza‐se anteriormente ao opérculo, margeando toda a borda anterior deste

osso e se estendendo, afinando anteriormente, até a região do quadrado.

Anteriormente,aolongodocanalpré‐opercular,encontram‐setrêspequenoscilindros

ocos. O mais posterior, próximo ao pré‐opérculo, está ligeiramente mais corado,

indicando talvez uma maior consolidação óssea. Neste estágio surgem os dois mais

anteriores. Estes elementos constituem os sub‐pré‐opérculos (sensu Roberts, 1973b)

ou porção anterior do pré‐opérculo (sensu Winterbottom, 1980; Vari, 1983; Castro &

Vari,2004)epermanecerãoimutáveisemformaenúmeromesmonosadultos.

Os elementos do arco hioide encontram‐se praticamente  em seus formatos

finais.

Ocerato‐hialanteriorestáconsolidadonopontomédioe,medialmente,quase

alcança os hipiais. Sua extremidade medial já apresenta a morfologia descrita nos

adultos (cf. Vari, 1983; Castro & Vari, 2004), sendo bifurcada, com os dois ramos

ósseos parcialmente circundando o forâmen para a passagem da artéria hioide

aferente,nafacedorso‐lateraldoshipiais.Estaartéria,apósapassagempeloforâmen,

correlateralmenteaocerato‐hialanteriore, sequencialmente,penetranesteossona

região bifurcada. Na realidade, nos estágios anteriores, essa  artéria corre

externamentee,comoavançodaossificação,esta“cobre”aartéria,criandoumduto

(Fig. 23D). O cerato‐hial posterior está totalmente consolidado, não sendo mais

possíveldistinguiroscentrosdeossificaçãoprimordiais(principaisecomplementares),

que eram os pontos de inserção dos ligamentos e/ou tendões. O inter‐hial com seu

formatocilíndrico,estátotalmenteformado,ossificando‐seaoredordesuacartilagem



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

primordial e, posteriormente, consolidado, exceto pela extremidade dorsal, com

ossificaçãosomenteaoredordacartilagem.

Os hipiais ventral e dorsal estão totalmente formados. O hipial dorsal, sendo

mais evidente que o ventral. Ambos, a partir dos respectivos centros principais de

ossificação, crescem e se expandem até o forâmen da artéria hioide aferente,

circundando‐o(Figs.22e23D).

Na linha mediana, o basi‐hial apresenta algumas modificações importantes. A

ossificação do basi‐hial propriamente dito, conforme relatado no estágio anterior, se

inicianaextremidadeposteriordacartilagemprimordial,nopontoemqueseinsereo

ligamentoentreobasi‐hialeoprimeirobasibranquial,eseestendeprogressivamente

paraaregiãoanterior.Estaossificaçãoencontra‐semaismineralizadaemcomparação

com o estágio anterior, porém ainda não se estende além dos limites anteriores do

hipialdorsal(Fig.22C eD).Neste  estágioapareceaossificação da placadentígera do

basi‐hial ( sensu Vari, 1983). Nos exemplares de 24,4 mm CP ainda está muito sutil,

apesardelevementecorada(Fig. 22A).Tem inícionaface dorsaldaregiãoanteriore

centraldacartilagemprimordial dobasi‐hial(Fig.22Ae C)ese espalhaemtrêseixos

principais:lateraise posterior.Nosexemplarescom30,6mmCPesta ossificaçãoestá

mais mineralizada (consequentemente mais corada) e mais expandida, alcançando,

posteriormenteolimitedaossificaçãodobasi‐hial.Lateralmente,aoalcançaraborda

dacartilagemprimordial, seestendeventralmente, mantendo‐sesempreaoredorda

cartilagem. Não há sinais de ossificação endocondral nesta estrutura. Apesar de ser

reportadacomoplacadentígera,nãoháindíciosdedentesnestaestrutura.

O uro‐hial mantém seu formato conforme descrito no estágio anterior, sem

modificaçõessignificativas,exceto,comoesperado,deumaumentoemsuaespessura.

Aossificaçãodos hipobranquiais IaIII, que se iniciounaextremidade anterior

das cartilagens primordiais, principalmente nos pontos de inserção dos ligamentos

anteriores se estende, pericondralmente, posterior e lateralmente. No entanto, não

ultrapassando o terço anterior. Não há sinal de ossificação do hipobranquial IV que,

presume‐se,estejafundidocomacartilagemdistaldoceratobranquialIV.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Os ceratobranquiais I a V alcançam seu formato definitivo. Os quatro mais

anteriorespossuemum formatocilíndrico.Noentanto,emsuaface ventral,devidoà

passagem das respectivas artérias e nervos branquiais eferentes, a ossificação se

estendedorsalmenteemineralizaasbordasdestasestruturas,criandosulcosparasua

passagem. Estes sulcos não são observados no quinto ceratobranquial que, como

descrito anteriormente, possui uma lâmina óssea medial, portando os dentes

faringianos inferiores. Os epibranquiais I a IV seguem o padrão descrito para os

ceratobranquiais, porém, as artérias e nervos branquiais eferentes, correm na

superfície dorsal destes elementos, local onde se encontram os sulcos ósseos. Os

epibranquiais ainda não estão tão consolidados quanto os ceratobranquiais. Nos

processos uncinados, não há sulcos e a ossificação está ligeiramente mais delicada,

principalmentenasextremidadesdistais(Fig.23DeE).

Todos os elementos faringobranquiais já iniciaram os processos de ossificação

pericondral. O primeiro faringobranquial, o menor elemento desta série, está

ossificado apenas em uma pequena região na extremidade próxima à extremidade

medial primeiro epibranquial. Os faringobranquiais II e III são os elementos mais

ossificados neste estágio. Com exceção de suas extremidades, o restante foi

mineralizado. No quarto faringobranquial, apesar de ser o maior elemento (ainda

cartilaginosoemsuamaioria),aossificaçãoserestringeàfacemedial,sendoumafina

linhaóssea(Fig.23DeE).

A placa dentígera suprafaríngea apresenta formato grosseiramente circular,

portandoinúmerosdentesdetamanhoreduzido,emsuafaceventral.Suafaceventral

está fundida com a  extremidademedial do epibranquial IV e intimamente associada,

semfusão,comaextremidadeposteriordofaringobranquialIV

Nacópulaanterior,osbasibranquiaisIIeIII,estãoligeiramentemaislongosque

noestágioanterior.Ofatomarcantedesteestágioéoiníciodeossificaçãodoprimeiro

basibranquial. Sua ossificação tem início sequencialmente à ossificação do basi‐hi al e

ocorre principalmente no ponto de inserção do ligamento entre a extremidade

anterior da cópula anterior e a extremidade posterior do basi‐hial, provavelmente

devido ao mesmo motivo: fortalecimento deste ponto onde se ancora o ligamento



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

(Fig.22CeD).Umaveziniciada,aossificação(pericondral)seestendeposteriormente,

aoredordacartilagemprimordial.

Na cópula posterior evidencia‐se o início de uma ossificação, restrita à face

dorsal da cartilagem primordial. Esta ossificação, de origem dérmica,formaráaplaca

dentígera do quarto basibranquial. Neste estágio encontra‐se muito delicada, sendo

uma fina e delgada “placa” óssea que se estende aproximadamente, por uma linha

imaginária que passa pelas extremidades anteriores das cartilagens mediais do

ceratobranquialIV(aqualincluitambémohipobranquialIV,quenãosesegmenta)até

suas extremidades posteriores (Fig. 23A). Não há quaisquer sinais de formação de

dentes.

Os quatro raios branquiostégios já alçaram o característico formato final,

encontradonosexemplaresadultosdafamíliaProchilodontidae(cf.Vari,1983;Castro

&Vari,2004),comoalargamentotransversalemambososladosdecadaraio.



‐46ºdiaapóseclosão(39,6mmCP,Fig.24):

Neste estágio todas as estruturas cartilaginosas primordiais desapareceram,

restando somente as cartilagens entre as articulações ósseas, conforme descritas no

estágio anterior. Serão mencionadas somente as estruturas,cartilaginosasouósseas,

que sofreram alguma mudança  significativa em comparação ao estágio anterior. As

demaispermaneceramsemmudançasem suaformatendo, contudo, aumentadoem

tamanhoconformeoexemplarcresce.

A cartilagem do inter‐hial continua restrita à extremidade dorsal deste

elemento,naregiãoarticularcomosuspensório(regiãohiomandibular).Contudoestá

reduzida em comparação com o estágio anterior, se apresentando como uma fina

“capa”sobreoossointer‐hial.

AscartilagensdoshipobranquiaisIaIIIcontinuam sedegenerando,conformea

ossificação pericondral avança. Estão restritas aos limites póstero‐mediais de cada

elemento.Noslimiteslaterais–  articulaçãocomosrespectivos ceratobranquiais –há



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

uma fina linha cartilaginosa, quase imperceptível. A cartilagem medial do

ceratobranquialIV(supostohbIV+cbIV)nãoapresentasinaisdegeneração.

Acartilagemdobasi ‐hialapresentacertadegeneraçãonasuaporçãoposterior,

naregiãoquefoienvolvidapelaatividadeósseadeformaçãodoossobasi‐hial.

Osteocrânio

: neste estágio são observadas várias fileiras de dentes bucais

implantadasnolábio.Noentanto,cadafileira nãoéisolada,sesobrepondoàsdemais.

Os dentes mostram uma nítida progressão em seu desenvolvimento conforme

caminham das fileiras mais profundas e posteriores até sua completa formação (e

diferenciação),estantesantesdeemergirem(Fig.25A).

A região mediana do pré‐maxilar es

tá mais extensa e apresenta um processo

pontiagudodirigidomedialmente,alcançandoalinhamediana.Nãosenotanenhuma

modificaçãonomaxilar(Fig.25A).

Na maxila inferior, destaca‐se o aumento do osso ângulo‐articular,

principalmente pelo desenvolvimento de seu processo dorsal, ultrapassando

ligeiramenteolimite dorsal dodentário.Esta é acondiçãodefinitiva deste elemente.

Na região medial da maxila inferior, o osso corono‐meckeliano está claramente mais

espesso,comformadeclava,cujaregiãoanteriorésutilmentemaisgrossa(Fig.25B).

Nosuspensório,algumasmudançassubstanciaispodemsernotadas(Fig.24B).

O processo mais lateral (de origem dérmica) do osso

 quadrado está completamente

fundidocomoossopropriamentedito,sendoimpossíveldelimita‐loindividualmente.

As lâminas ósseas do osso metapterigoide também estão totalmente fundidas ao

referidoosso.Oectopterigoidedesenvolveuma“quilha”ósseadirigidaanteriormente

em seu terço mais ventral (processo ântero‐ventral sensu Vari, 1983; Castro & Vari,

2004), aumentando substancialmente sua espessura ness

a região. Na  região central

desteelemento,háumprolongamentodeseuslimiteslaterais,envolvendooresquício

cartilaginoso do processo pterigoide primordial (Fig. 25C). O entopterigoide também

desenvolveumagrandeefinalâminaósseadorsalmente.Destemodo,passandoa ser

maisespessoeevidentequeoectopterigoide.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Destaca‐se,neste estágio,aossificação doautopalatino.Ela teminícionaface

lateral da cartilagem expandida na extremidade anterior do processo pterigoide

(regiãoautopalatino).Opontoondeseiniciaaossificaçãoéaregiãoondeseinsereo

ligamento que une esta estrutura (e toda a parte ântero‐dorsal do suspensório) ao

neurocrânio,especificamente,àfaceventraldoossomesetmoide.Apartirdesteponto

inicialdeossificação,queseencontramaiscoradoeespesso,aossificaçãoseespalha,

pericondralmente, em todas as direções. No entanto, o osso autopalatino ainda não

passadeumpequenonóduloósseo.(Fig.25C).

Ocasionalmente, alguns indivíduos, apresentam os dois elementos sub‐pré‐

operculares mais posteriores, localizados anteriormente ao opérculo, fundidos, como

apresentado na Fig. 24B. No entanto, isto não é consistente em todos os indivíduos

deste estágio que foram analisados. A maioria apresenta os três sub‐pré‐opérculos

separados, mesmo que muito próximos entre si. Esta morfologia é apresentada

tambémemindivíduosjovens,completamenteformados(cf.MZUSP42718–97,9mm

CP).

Dentre os elementosdo arco hioide, o único a sofrer algumamodificação é o

basi‐hialesuacoossificação–aplacadentígeradobasi‐hial(sensuVari,1983).

A ossificação do basi‐hial continua sua progressão pericondral anteriormente,

ultrapassando,sutilmente,olimiteanteriordoshipiaisdorsais,i.e.alcançandooterço

posterior da placa dentígera do basi‐hial. Somente em sua extremidade posterior

observa‐sesuaconsolidação,com substituiçãodacartilagemportecidoósseo(Fig.25D

eE).Aossificaçãodaplacadentígeradobasi‐hialestáclaramente visívelecobretodaa

face dorsal da cartilagem primordial, com exceção da margem anterior. Está mais

espessa,especialmentenaslaterais.Com  oespessamentodorsaldesigual,formam‐se

váriasdepressões(pequenas“crateras”)(Fig.25DeE).Nãohá indíciosdedentesnesta

estrutura,mesmoemexemplaresjovenseadultos.

O uro‐hial atinge seu formato geral definitivo, presente em adultos, com as

suas abas laterais, em vista dorsal, formando um triângulo, com a base voltada

posteriormente (Fig. 26A). Porém, ainda não estão fusionados os dois processos

anterioresdesteelemento.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Os hipobranquiais I a III estão totalmente ossificados pericondralmente, com

vários pontos, em cada elemento, de ossificação mais interna, substituindo a

cartilagem e consolidando o osso. Não há sinal de ossificação do hipobranquial  IV

(presume‐sequeestejafundidocomacartilagemdistaldoceratobranquial IV).Apesar

de haver um fino processo ósseo que acompanha toda a face lateral da extensão

anteriordacartilagemdoceratobranquial IV, esteprocessoem nada envolvecentros

deossificaçõesnaregiãoanteriordestacartilagem(quepudessemrepresentaroinício

deformaçãodohipobranquialIV).Trata‐sedeumaossificaçãotardiaqueseoriginano

próprioceratobranquialeseestendeanteriormente.

Osossosfaringobranquiais Ia IIIatingem

suaformafinal,apesardeaindanão

estarem consolidados em suas extremidades. O processo de consolidação, i.e.

substituição interna da cartilagem por tecido ósseo, tem a mesma sequência da

ossificação perindral, se iniciando no centro de cada elemento e estendendo‐se para

aslaterais.Oquartofaringobranquialestácomaossificaçãorestrita

aoredorcentroda

cartilagemprimordial.Aolongodesuacurvaturaventral,otecidoósseoquasealcança

asextremidades.(Fig.26B).

A placa dentígera suprafaríngea chega à sua forma definitiva, com formato

grosseiramente circular e  portando inúmeros dentes de tamanho reduzido, em sua

faceventral.AsuafusãocomoprocessomedialdoepibranquialIVéfracaefacilmente

separam‐seesteselementos.

Os ossos basibranquiais I a III, que se originam pericondralmente em três

centros distintos na cópula anterior  estão evidentes e distintos. O basibranquial I se

estende posteriormente e está consolidado somente na extremidade  anterior. Os

basibranquiaisIIeIIIestãomaislongos,comasbordasdorsaismaisdesenvolvidasque

as ventrais. Estão consolidados em seus centros e esta substituição de matriz

cartilaginosaporósseaseestendeparaasextremidades(Fig.26C).

A ossificação da placa dentígera do basibranquial IV, que se origina na face

dorsal da cópula posterior, se restringe a esta posição, nunca se desenvolvendo

lateralmente ou substituindo a cartilagem primordial por osso, uma vez que trata‐se

de uma ossificação dérmica. Já se encontra com seu formato definitivo, não



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

alcançando as extremidades anterior ou posterior da cartilagem da cópula posterior

(Fig. 26C). Não apresenta sinais de formação de dentes, os quais nunca se

desenvolvemmesmoemindivíduosadultos.



‐49ºdiaapóseclosão(57,2mmCP)ejuvenil(97,9mmCP):

Estes estágios são representados para ilustrar a completa formação dos

elementos do esplancnorânio, os quais ainda não estavam completamente

desenvolvidosnosestágiosanteriores.

Naregiãomaxilarsuperior,os ossosestãototalmenteformados,alcançandoa

morfologia dos adultos (sensu Vari, 1983; Castro & Vari, 2004 e obs. pess.). A pré‐

maxilaagorapossui,nitidamente,oprocessoântero‐dorsalparaocontatocom oosso

mesetmoide e maxila se caracteriza pelo seu formato característico dos

Prochilodontidae,comumgrandedesenvolvimentodacurvaturalongitudinalevertical

dolimiteposterior(Fig.27A).

Na região medial da maxila inferior, o osso corono‐meckeliano apresenta sua

forma definitiva, com sua porção posterior alinhada horizontalmente e

adicionalmente,suaossificaçãoseestendeântero‐dorsalmente,acompanhandotodaa

inserção do tendão do ramo (A3?) do músculo adutor mandibular (Fig. 27B),

conferindo um formato de “L” invertido (supostamente caracteres derivados de

Prochilodus+IcthyoelephassensuCastro&Vari,2004).

Nosuspensório(Fig.27C),todososelementosósseosjáhaviamalcançadoseus

respectivosformatosdefinitivos.Log

onãoserãocomentadosnovamente.Odestaque 

é para o avanço do desenvolvimento da autopalatino. Sua ossificação começou na

região lateral e se estende, pericondralmente, por toda a área cartilaginosa da

extremidade anterior do processo pterigoide primordial. Além de recobrir toda a

cartilagemprimordial,aossificaçãoseintensificanoponto

lateral,criandoumaampla

e resistente área para a sua articulação com o mesetmoide (Fig. 28A). Esta base

articular continua se desenvolvendo acompanhando o crescimento do indivíduo (Fig.

28B).Apartirdesteponto,jáapresentaamorfologiadefinitiva.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Os elementos do basi‐hial  são os últimos a atingirem sua forma definitiva. O

basi‐hial propriamente dito está totalmente formado, com a aparência de um cone,

cujoápiceselocalizaposteriormente,nalinhamediana,entreoshipiaiscontralaterais.

Estátotalmenteconsolidadoatéoterçomaisposterior.Anteriormentenãohásinalde

ossificação interna à cartilagem, a qual permanece mesmo nos jovens e adultos. Sua

extremidade anterior se estende além dos limites anterior dos hipiais. Sobre a

cartilagembasi‐hialprimordial,encontra‐se,cobrindo‐a totalmente,aplaca dentígera

do basi‐hial, também em sua forma definitiva característica de um “T” apontado

anteriormente. Não há qualquer sinal de invasão da ossificação na parte interna da

cartilagem.Esteelementoafinaposteriormentesobrepõe‐seaobasi‐hial(Fig.28C).

O uro‐hial está totalmente formado, com suas amplas abas ventrais. Neste

estágioosdoisprocessosanteriores,quesedesenvolvemsobreotendãodomúsculo

sternohyoideus,fundem‐semedialmente,delimitandooforâmenhipobranquial,paraa

passagem do ramo ventral da artéria hipobranquial que se dirige anteriormente,

irrigandoamaxilainferior(Fig.28C).

Todooesqueletodosarcosbranquiaisestáemsuaformadefinitiva(Fig.28D),

semalteraçõescomrelaçãoaoestágioanterior.Contudo,oprocessodeossificaçãodo

quarto faringobranquial completa sua formação e este elemento destaca‐se como o

maior de toda esta série. A ossificação se estende desde sua curvatura ventral, onde

teve início,  espalhando‐se dorsalmente (Fig. 29A) e finalmente consolidando o osso

(Fig.29B).

Os ossos basibranquiais derivados da cópula anterior – i.e. I a III – estão

totalmenteformados,assimcomonoestágioanterior.Porémestãomaisconsolidados

etalmudançaacontecerádurantetodaavidadosindivíduos,assimcomonosdemais 

ossos. Destacam‐se os dois processos dorsais, alinhados medianamente, do

basibranquial II. O processo dorsal anterior se sobrepõe ligeiramente sobre a porção

posterior do basibranquial I e o processo posterior, sutilmente na região anterior do

basibranquialIII(Fig.29C).

AplacadentígeradobasibranquialIV,resultadodeumaossificaçãodérmicana

face dorsal da cartilagem da cópula posterior, permanece como descrita



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

anteriormente, sendo somente uma lâmina óssea sobre a face dorsal da cópula

posterior(Fig.29C).





Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Desenvolvimento do esplancnocrânio de Pseudoplatystoma coruscans, incluindo

condrocrânioeosteocrânio.



‐2ºdiaapóseclosão(3,8mmCP,Fig.30):

A cartilagem do autopalatino está presente, com formato grosseiramente

arredondado, porém seu limite não é evidente. Está situada na base do barbilhão

maxilar. Este elemento possui uma estrutura cartilaginosa, com  uma fileira de

condrócitos achatados, separados entre si por uma pequena  quantidade de matriz.

Nestaespécie,osbarbilhões sãomuitodesenvolvidos, mesmoemestágiosiniciaisdo

desenvolvimento. O barbilhão maxilar, neste estágio, alcança quase a  metade do

comprimento total da larva. Encontra‐se ancorado superficialmente (aparentemente

napele)eestásituadodorsalmenteàcartilagemdeMeckelaproximadamenteemseu

terço mais posterior, próximo da articulação com a cartilagem hio‐simplética. As

cartilagensdosbarbilhõesmentonianosexternostambémestãopresentes,porémem

umgraudedesenvolvimentoinferior.Mesmoassim,paraesteestágio,aindasãobem

desenvolvidos.Originam‐seaproximadamentesobalinhamédiadacadacartilagemdo

arco hioide e se alongam até a cintura peitoral. Os barbilhões mentonianos internos

estãopresentessomentecomo“brotos”,aindanãotêmformafilamentosa.Localizam‐

se próximos à linha mediana, na região ventral da cabeça, justamente sob o arco

hioide.Nenhumaplacacartilaginosaassociadaaessesbarbilhõesfoiobservada.

Acápsulaótica,localizadadorso‐posteriormentenoneurocrânio,estáformada

bem definida. Em sua região anterior, articula‐se, ventralmente, uma placa

cartilaginosadispostalateralmente.Estaplaca, deformatogrosseiramente triangular,

apresenta um forâmen na parte mais dorsal e mais anterior. Trata‐se da hio‐

simplética‐pterigoquadrada (sensu Arratia, 1990), sendo o referido forâmen, para a

passagem para o ramo hiodeo‐mandibular (sensu Arratia, 1992) do sétimo par de

nervoscranianos(n.facial).Naporçãodorsaldesuabordaposterior,háumprocesso,

voltadoposteriormente.Este  éoprocesso opercular.Ventralmenteaeleseencontra

um “prolongamento” cartilaginoso. Este elemento, identificado como inter‐hial, é

contínuo (fundido) com a placa hio‐simplética e com a barra cartilaginosa do arco



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

hioide.Apesardestafusãoépossívelnotarquesetratadeumaestruturadiferenciada

estruturalmente, apresentando os condrócitos menores e em maior quantidade de

matriz,quandocomparadaàestruturadoarcohioideoudaplacahio‐simplética.

Na extremidade ventral da placa hio‐simplética esta placa está articula‐se,

anteriormente, outra barra cartilaginosa, disposta longitudinalmente. Esta barra

sustenta a parte inferior da mandíbula. É a chamada cartilagem de Meckel. Neste

estágio,acartilagemdeMeckelestá formadaecircundaa borda bucaldamandíbula

(maxila inferior) em toda sua extensão (ambos os lados), como uma barra contínua,

fundindo‐se medialmente. Neste ponto, existe uma área arredondada,

estruturalmentedistinta,ondeaconcentraçãode“condrócitos”émenosdensadoque

aencontradanorestanteda cartilagemdeMeckel.Estabarracartilaginosaapresenta

umprocessorudimentardeformatriangular,fracamentecorado,queestásituadono

terço posterior, próximo à articulação com a cartilagem hio‐simplética e voltado

dorsalmente.Trata‐sedoiníciodoprocessocoronoide.

Posteriormente à cartilagem de Meckel, em vista ventral, encontra‐se a

cartilagemprecursoradoarcohioide,sucedidapelascartilagensdosprimeirosquatro

paresmaisanterioresdeceratobranquiais.Acartilagemdoarcohioideéformadapor

umpardebarras,maisespessassecomparadasàscartilagensdosceratobranquiaise

articula‐se (funde‐se) distalmente, ao inter‐hial. Apesar de estarem muito próximas

medialmente,podem‐se notarseus limites(naháfusãomedialmente).Oarcohioide,

em vista ventral, tem um formato mais côncavo em comparação à cartilagem de

Meckel.

As cartilagens dos ceratobranquiais são cilindros cartilaginosos (bastões)

delicados, e estão dispostas diagonalmente à linha mediana. Os três pares mais

anteriores são praticamente de mesmo tamanho e espessura. O qua rto par (mais

posterior)estámuitosutilemenor.Oslimitesdistaisdestascartilagenssãoclaramente

definidos. No entanto, medialmente, estas barras cartilaginosas estão fundidas  com

outramassacartilaginosaímpar,grosseiramenteovalada,localizadanalinhamediana.

Trata‐sedacópulaanterior.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Não há indícios dos hipobranquiais. Os epibranquiais I a IV estão presentes,

sendobastõescartilaginososlisosefinos,comaproximadamentemetadedaespessura

e um terço do comprimento dos ceratobranquiais. Articulam‐se com  estes nas suas 

extremidades distais. A cartilagem nodular do pseudoepibranquial V (usualmente

identificadocomoepibranquialV–v.discussão)estáausente.

Osteocrânio

: Em toda borda bucal encontram‐se inúmeros dentes cônicos.

Estão ancorados, dorsalmente, no os pré‐maxilar que surge como um filamento, não

corado, na região anterior da cabeça (região da cartilagem etmoidal), logo abaixo do

neurocrânio. O osso maxilar também está presente em estágio iniciais do

desenvolvimento. Também possui forma filamentosa  e não está corada. Circunda o

limite ante

rior da cartilagem do autopalatino (pars autopalatina de Arratia, 1990) e

suportaacartilagemdobarbilhãomaxilar.Ventralmente,osdentesseancoramnoos

dentário,queseformaaoredordacartilagemdeMeckel.Aindaestámuitosutil,não

corado,seestendendo logoapósasínfisedacartilagemdeMeckelatéquase oinício

doprocessocoronoide.

Naháindíciosdosraiosbranquiostégios.



‐3ºdiaapóseclosão(4,2mmCP,Fig.31):

A cartilagem do autopalatino está evidente, com um formato grosseiramente

triangular.Suaporçãomais posterior,voltadamedialmente,searticulacomaporção

anteriordoneurocrânio,naregião nasal(solumnasi). Nãohámudançassignificativas

nos comprimentos  dos barbilhões maxilares e mentonianos externos. O barbilhão

mentoniano interno se desenvolve um pouco mais, sendo um pouco mais saliente,

masaindanãopassadeumapequenapregadepele,filiforme.

A porção mais dorsal da cartilagem hio‐simplética expande no sentido eixo

ântero‐posterior. O processo opercular está mais nítido, ficando mais alongado

posteriormente.Surgeoprocessopterigoide,localizadonabordaanteriordestaplaca

cartilaginosa. Neste estágio, essa estrutura tem formato arredondado, com pequena

projeçãoanterior,cujoslimitesanterioresnãosãototalmentedefinidos.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Oprocessocoronoide,dacartilagemdeMeckelestáligeiramentemaisextenso

que no estágio anterior, exibindo o formato triangular, com uma base larga. No 

entanto,oslimitesdorsaisnãosãoprecisos.

Há um alongamento distal e espessamento dos ceratobranquiais I – IV. Os

quatro primeiros tendo, aproximadamente, o mesmo comprimento. Surge o

ceratobranquial V, pouco mais longo que a metade do comprimento do quarto

ceratobranquialemaisfino.

Acópulaanterior aindapersistecomoumamassa cartilaginosauniforme,sem

indíciosdelimitaçãodoshipobranquiais.

Os quatro epibranquiais se alongam, mantendo a espessura ainda fina em

comparaçãoaos respectivosceratobranquiais.Aexceçãoéoquartoepibranquial que

aumenta muito sua espessura, principalmente na extremidade medial, com quase o

dobrodaespessuradoquartoceratobranquial.

Osteocrânio: o osso maxilar está mais desenvolvido, aumentando em

comprimento. O dentário e  a pré‐maxila continuam quase imutáveis. No limite

posteriordaextensãoqueformao processoopercularhá uma“capa”óssea  formada

por uma ossificação pericondral deste processo. Posteriormente a ele, há um

filamento mais rígido, de ossificação dérmica. Apesar de não haver nenhuma

coloração,trata‐sedoiníciodosfilamentos(“splints”)ósseos,precursoresdoopérculo.

Na cesta branquial surge, dorsalmente, uma placa óssea, suportando dentes

cônicos. É a placa dentígera, localizada próxima à extremidade medial do quarto

epibranquial.



‐4ºdiaapóseclosão(4,5mmCP,Fig.32):

Nãohámudançassignificativasnacartilagemdoautopalatino.Háumpequeno

aumento no comprimento dos barbilhões maxilares, que alcançam pouco mais da

metadedocomprimentototaldalarva.Osbarbilhõesmentonianosexternostambém

estão mais longos, com aproximadamente  metade do comprimento do barbilhão



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

maxilar.Obarbilhãomentonianointernodobraseucomprimentoeficaevidente,mas

ainda é muito sutil e mais fino que os demais e não alcança a base do barbilhão

mentonianoexterno.

A placa cartilaginosa hio‐simplética se mantém quase inalterada, com relação

aoestágioanterior,excetopelopequenoalongamentodoprocessoopercular, devido,

principalmente,aoaumentodaossificaçãoenãodacartilagem.Oprocessopterigoide

continuasutil,comlimitesnãomuitoclaros,nãopassandodeumpequeno“bulbo”.

O processo coronoide, da cartilagem de Meckel está mais extenso que no

estágioanterior.Apesardeseuslimitesdorsaisnãoseremmuitoevidentes,épossível

observar que mantém o formato triangular e uma base larga. Seu ápice quase

alcançandoalinhahorizontalemquesesituaoautopalatino.

Ascartilagensdoarcohioidedesenvolvemacurvaturaposteriorcaracterística.

Esta se situa principalmente em sua porção mediana, atingindo quase o terceiro

ceratobranquial. Estende‐se para ambos os lados, diminuindo progressivamente. Na

porçãodistal,atingequaseateopontodearticulaçãocomointer‐hial.Medialmente,

terminapoucoantesdaregiãodoshipiais.

Os três primeiros pares de ceratobranquiais mantêm o mesmo formato do

estágio anterior. O quarto e o quinto ceratobranquiais se alongam distalmente. O

quinto,nãoalcançandoocomprimentodosdemais.

A cópula anterior persiste como uma massa cartilaginosa. Porém, os

hipobranquiais I, II e III estão claramente distintos em suas extremidades distais.

Apesardisso,aindaestãoconectados,distalmente,aosrespectivosceratobranquiaise,

medialmente,àcópula anterior.Posteriormenteao terceiro hipobranquial, inicia‐se a

separaçãodacópulaposterior,umamassacartilaginosauniforme.Nacópula anterior, 

em sua região mediana, destaca‐se uma área central (cópula anterior sensu Nelson,

1969). Os epibranquiais I‐IV se alongam mais e atingem cerca de dois terços do

comprimento dos respectivos ceratobranquiais. Ainda permanecem como bastões

lisos. Nas extremidades mediais do terceiro e quarto epibranquiais surgem duas

massas cilíndricas, dispostas longitudinalmente. A mais posterior, corresponde ao



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

quartofaringobranquialeestáintimamente associado àplacadentígerafaringiana.A

massa cartilaginosa anterior está conectada a ela, porém seus limites não são

definidos.Essaporçãomaisanteriorémenor,com cercademetadedocomprimento

doquartofaringobranquial.

Osteocrânio: o osso pré‐maxilar está mais alongado posteriormente, portanto

mais dentes, assim como o dentário. Este mantém sua razão de ossificação, não

chegando à base do processo coronoide. No entanto, está maior que no estágio

anterior, devido ao contínuo aumento da cartilagem de Meckel na região mediana,

servindodesuporteparaaossificaçãododentário.Amaxilaestámaisdesenvolvida,se

alongandonabasedobarbilhãomaxilar.

A ossificação pericondral do processo opercular continua imutável.

Posteriormente a ele, há um segundo filamento ósseo, voltado ventralmente. Está

localizado próximo à base do filamento anterior, com cerca de um quinto de seu

comprimento.Amembranadofuturoopérculoaindanãopodeserobservada.

Na cesta branquial surge, a placa dentígera faringiana porta somente três

dentes cônicos. Em adição e eles, surge um dente na região medial do quinto

ceratobranquial, sem, contudo, estar claro uma ossificação dérmica ou pericondral

nestaregião.

Em um dos exemplares foi observado um raio branquiostégio, localizado

lateralmenteaolimiteposteriordoarcohioide.



‐5ºdiaapóseclosão(4,8mmCP):

Nenhuma modificação relevante. Somente aumento de todas as estruturas

existentesnoestágioanterior.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

‐6ºdiaapóseclosão(5,0mmCP,Fig.33):

Olimiteposteriordoautopalatinoestámaior,voltadoligeiramenteparaalinha

mediana.Emvistadorsal,ultrapassaamargemposteriordacartilagemdeMeckel.

Os barbilhões maxilares não apresentam um alongamento significativo em

relação ao estágio anterior e, com o aumento do comprimento do corpo, sua

proporção diminui, não alçando a metade do comprimento padrão. Os barbilhões

mentonianosexternos estãomaislongos,ultrapassandoametadedocomprimentodo

barbilhão maxilar. O barbilhão mentoniano

 interno também está mais longo, com

cercadodobrodotamanhonoestágioanterior.Seupontomédionalinhadabasedo

barbilhãomentonianoexterno.

A região dorsal da placa hio‐simplética está mais alongada ântero‐

posteriormente.Oprocessopterigoidesealong

aanteriormente,tomandoaformade

uma fina haste. Seus limites são de difícil distinção, mas é possível ver, pela reflexão

diferencial da luz, que seu ponto mais anterior não alc ança o limite posterior do

processocoronoide.

Na cartilagem de Meckel, o processo coronoide continua a crescer,

ultrapassandoalinhahorizontalquepassapelabase(ventral)doautopalatino.

Na cesta branquial, as cartilagensdoarcohioideestãonitidamenteseparadas

na linha mediana. Mesmo assim, ainda há tecido cartilaginoso unido‐as, e com a

cópulaanterior.

Acópulaanteriorpropriamente dita(sensuNelson,1969)estámaisevidentena

linha median

a. Consiste de uma região alongada medianamente, contatando as

cartilagensdoshipobranquiaisI–IIImaisacópulaposterior.Oquintoceratobranquial

quase alcança, em comprimento, o quarto ceratobranquial. Os hipobranquiais I – III

estão ainda mais definidos, mas continuam fundidos com os respectivos

ceratobranqu

iais (distalmente) e com a cópula anterior (medialmente). A massa

cartilaginosa presente anteriormente ao quarto faringobranquial se alonga

anteriormente e seu contata as extremidades distais do primeiro e segundo



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

epibranquiais. O quart o faringobranquial está mais alongado longitudinalmente, 

fazendocontatocomasextremidadesdoterceiroequartoepibranquiais.

Osteocrânio: o osso pré‐maxilar se alonga posteriormente, portando mais

dentes, não alinhados. Quase contata  a maxila. Esta está mais espessa e pouco mais

longa,acompanhandoacartilagemdobarbilhãomaxilar.Odentárioporta maisdentes

e está maior devido ao aumento da cartilagem de Meckel. Seu limite posterior

chegandoaindaàbase do processocoronoide.O“splint” ventralopercularestámais

longo,quasedomesmocomprimentodoo“splint”horizontal.Amboscontinuambem

finoseamembranadoopérculopodeserdelimitada.

Aplaca dentígerafaringianaacompanhaacrescimentodacartilagemdoquarto

faringobranquialesealongaanteriormente,portandocincodentes.

Os raios branquiostégios ainda não estão presentes, porem em alguns

exemplares pode‐se observar, com dificuldade  devido à  delicadeza da estrutura, um

únicoraio,lateralmenteassociadoàbordaposteriordacartilagemdoarcohioide.



‐7ºdiaapóseclosão(5,2mmCP,Fig.34):

A cartilagem do autopalatino, apesar de manter sua forma grosseiramente

triangular,estáproporcionalmentemaiorquenoestágioanterior.Emvistadorsal,seu

limite posterior ultrapassa a  margem posterior da cartilagem de Meckel, quase

alcançandoolimiteanteriordoarcohioide.

Tanto os barbilhões maxilares quanto os mentonianos (externos e internos)

mantémsuasproporções,conformedescritasnoestágioanterior.

Na região dorsal da placa hio‐simplética a extremidade anterior se expande

ligeiramente. O processo pterigoide está mais fino em comparação com o está gio

anterior.Tambémestámaisalongadaanteriormente,ultrapassandoabordaposterior

doprocessocoronoide.Estemantémsuasproporções.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

Na cesta branquial, as cartilagens do arco hioide estão agora completamente

separadas na linha mediana. O tecido cartilaginoso que as une, e com a cópula

anterior,aindapersiste,porémbemmaissutil.

A cópula anterior está cada vez mais nítida. Em sua extremidade anterior

evidencia‐se, na face ventral, um “processo” cartilaginoso. Sua visualização é difícil,

poisémuitosutilefracamentecorado.Noentanto,talestruturaéaconsideradapor

Arratia & Schultze (1990) como a “invasão” cartilaginosa no uro‐hial, a partir do

primeirobasibranquial.

Nos arcos branquiais, não há modificações em comparação com o estágio

anterior: as cartilagens dos hipobranquiais I –  III se mantém conectadas aos

respectivos ceratobranquiais e, medialmente, à cópula anterior. Os cinco pares de

ceratobranquais e os quatro de epibranquiais mantém suas proporções. A massa

cartilaginosa presente anteriormente ao quarto faringobranquial persiste e o quarto 

faringobranquialtambémestáinalterado.

Osteocrânio: as estruturas ossificadas e as proporções de suas ossificações 

permanecem inalteradas, com exceção da maxila, que aumenta seu tamanho,

principalmenteemseulimiteposterior.

O mesmo vale par a região opercular, que não apresenta diferenças

significativasemrelaçãoaoestágioanterior.

São observados três raios branquiostégios emcada lado do arco hioide. Esses

raios são formados como ossificações dérmicas na membrana branquiostégia,

proporcionando suporte à mesmas. Essas ossificações acontecem ventralmente à

cartilagemdocerato‐hial(arcohioide)eficamintimamenterelacionadaseela.Oraio

branquiostégio mais lateral é o maior. O tamanho dos raios decresce

progressivamente, conforme se aproximam da linha mediana, indicando uma

sequênciadesurgimentolátero‐medial.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

100

‐13ºdiaapóseclosão(6,5mmCP,Fig.35):

Neste estágio já não acontecem maiores transformações nas cartilagens do

esplancnocrânio.

Osbarbilhõesmantêm,comopadrãogeral,asproporções.Obarbilhãomaxilar

pouco ultrapassando a abertura cloacal. Os barbilhões mentonianos externos com

cerca de dois terços  do comprimento dos maxilares e os mentonianos internos,

alcançandoaporçãoanteriordacinturapeitoral.

Oprocessopterigoideestámaisalongadoanteriormente,persistindosuaforma

deumafinabarra.Háumdelicadoligamento,visívelsomentenesteestágio,saindoda

extremidade anterior do processo pterigoide, no entanto, não está claro se ele se

insere no etmoide lateral (provável). Na cartilagem de Meckel, o processo coronoide

está mais alto, quase alcançando a linha horizontal que passa pela borda superior

(dorsal)doautopalatino.

Na cesta branquial, as barras cartilaginosas do arco hioide estão agora

completamenteseparadasnalinhamediana.Otecidocartilaginosoqueasunianãoé

mais observado. A borda posterior destas barras se curva ventralmente, formando

algocomoumaconchaemvistalateral.

A cópula anterior está  nítida, com sua forma alongada na linha mediana. Em

sua extremidade anterior evidencia‐se, na face ventral, um “processo” cartilaginoso

(“invasão” do uro‐hial). A cópula posterior, localizada na linha mediana, logo

posteriormenteàcópulaanterior,tambémestácomseuslimitesevidentes.Possuium

formato grosseiramente poligonal, estando intimamente associada às extremidades

mediaisdosparesdeceratobranquiaisIVeV.

As cartilagens dos hipobranquiais I – III, apesar de ainda estarem muito

próximas àcópula anterior e aos respectivos ceratobranquiais, já estão “soltas”, com

seus limites definidos. Continuam menos coradas que as cartilagens ao redor,

indicando, possivelmente, que possuem uma  quantidade menor de matriz

extracelular.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

101

Os cinco pares de ceratobranquais, apesar de aumentarem de tamanho,

mantêm suas proporções. Os epibr a nquiais  I – IV se alongam mais, ultrapassando de

dois terços o comprimento dos respectivos ceratobranquiais. A massa cartilaginosa

presente anteriormente ao quarto faringobranquial persiste e destaca‐se um nódulo

cartilaginoso em seus limites. Ele é evidenciado, pois tem uma coloração mais

marcantequeamassaqueocircunda.Estenódulosurgenolimiteanteriordoquarto

faringobranquial, bem na extremidade medial do terceiro epibranquial. No entanto,

aindanãoestáclarodeestaestruturaéoterceirofaringobranquial,ouumaestrutura

novadeSiluriformes.

Osteocrânio: destaca‐se o aumento posterior da pré‐maxila,quase, tocando o

limite anterior da maxila. O número de dentes portados por ela e pelo dentário

continuaaumentando.

Na região opercular, ainda há somente 2 “splints” ósseos, sustentando a

membrana opercular. Esta membrana está evidente, com limites bem definidos. Sua

visualizaçãoéfeitasomente polarizando‐se aluzno estéro‐microscópio, poissetrata

deumamembranamuitofinaetransparente.

Sãoobservados,claramente,cincoraiosbranquiostégiosemcadaladodoarco

hioide.Osurgimentodestesraiosésempremedialeosmaislaterais,jáexistentes,se

espessamesealongamposteriormente.



‐19ºdiaapóseclosão(12,1mmCP,Fig.36):

As proporções dos barbilhões mudam neste estágio. De modo geral, as

proporções com relação ao tamanho do corpo diminuem consideravelmente se

compradas aos estágios anteriores. O barbilhão maxilar mal ultrapassa o limite

posterior da cintura pélvica, não alcançando a abertura cloacal. Os barbilhões

mentonianos externos ultrapassam o meio do  abdômen e os mentonianos internos,

atingemoiníciodasnadadeiraspeitorais.

Asestruturascartilaginosas,demodogeral,nãoapresentammaismodificações

nasformaseproporções.Alémdisso,váriasapresentamvariaçõesnastonalidadesde



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

102

coloração, indicando que a matriz cartilaginosa está sendo degenerada pelo início de

ossificaçãopericondral.

A cartilagem do processo pterigoide, que está mais alongada anteriormente,

ficando próxima da extremidade posterior do autopalatino.  Neste estágio é possível

observar que o ligamento que se origina anteriormente à  cartilagem do processo

pterigoide, se insere na região do osso etmoide late

ral. Logo, esse é o ligamento,

identificadousualmentecomoligamentometapterigoide–etmoidelateral.

O inter‐hial ainda se mantém intimamente ligado dorsalmente à placa hio‐

simplética e ventralmente, ao limite póstero‐lateral do arco hioide. No entanto, seus

limites ficam bem definidos, indicando os primeiros estágios na separação

(individualização)destaestrutura.

Nacestabranquial,asbarrascartilagi

nosasdoarcohioideapresentam,emseus

limites mediais, um “processo” cartilaginoso, fracamente corado se estendendo

medialmentenafacedorsal.

Ascartilagensdascópulasanterioreposterioredoshipobranquiaisestãomais

evidentesetotalmente individualizadasentresi.O núcleo cartilaginoso que contribui

paraaformaçãodouro‐hial(par‐uro‐hial)sópodeservistoemvistaventral.

Os quatro pares mais anteriores de  ceratobranquiais apresentam um

crescimento diferenciado em relação ao quinto. Isso faz com que o quinto

ceratobranquial se torne proporcionalmente menor que os demais, pouco

ultrapassando a metade do comprimento do quarto ceratobranquial. Não há

mudançasnasproporçõesdosepibranquiais.

A massa cartilaginosa presente anteriormente ao quarto faringobranquial

persiste, porém muito sutil e de difícil visualização. A cartilagem nodular anterior ao

quartofaringobranquialestámaior,abrangendoasextremidadesdosepibranquiaisI–

III e é usualmente identificada como sendo o terceiro faringobranquial. No entanto,

nãoestáclaroserealmenteéestaestruturaoualgoneomórficopraSiluriformes.

Osteocrânio: Os processos de ossificação pericondral estão intensos, com a

maioria das estruturas cranianas tendo modificações. As cartilagens vão sendo



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

103

reabsorvidas e  a ossificação pericondral substitui seus limites. Este processo é, em

geral, iniciado na região média das barras cartilaginosas e  se estendem até as

extremidades.

Oautopalatinoseossificanaregiãomédia.Nestaregião,sórestaumpequeno

“fio” da cartilagem inicial. Essa ossificação se estende para as extremidades, no eixo

ântero‐posterior. Cerca da metade da estrutura já está coberta por uma camada

mineralizada. O autopalatino adquiri uma forma próxima do adulto, sendo uma

estruturacilíndrica.

Apré‐maxilaeamaxilaaumentamdetamanho,massemalteraçõesdeforma.

OdentárioseespessaerecobretodaacartilagemdeMeckel,sem,contudo,seaderir

a ela. Somente a porção sinfiseana da cartilagem de Meckel continua exposta, sem

cobertura óssea (região de intensa atividade mitótica formadora de tecidos que

permitem o crescimento da maxila inferior com um todo, acompanhando o

crescimentodoindivíduo).AcartilagemdeMeckelsetambémossificaanteriormente,

formando os ossos mento‐meckelianos. Há outra região de ossificação, próxima ao

limite posterior desta cartilagem. Na região da placa cartilaginosa hio‐simplética

existem três centros distintos de ossificação. Todos com o característico formato

circular, indicando que este processo possui um ponto de início e se expande

radialmente. Um localizado anteriormente, na borda dorsal do processo pterigoide.

Esteformaráofuturoosmetapterigoide(“tipo

1”,deArratia,1990paraaformaçãodo

metapterigoide em Siluriformes, i.e., surge como uma ossificação da projeção

cartilaginosa que se estende anteriormente entre a futura hiomandíbula e o

quadrado).

Outro na borda ventral da placa hio‐simplética propriamente dita, próximo à

região de articulação com a cartil

agem de Meckel, que formará o os quadrado. O

terceiro centro circunda o forâmen da placa hio‐simplética e se estende

posteriormente até o processo opercular, e formará o os hiomandibular. O processo

operculartambémestámaisrobustoecomsuaossificaçãomaisespessa.

Na região opercular, ainda há somente 2 “splints” ósseos, sustentando a

membrana

 branquiostégia. Estes filamentos estão mais alongados e a membrana



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

104

opercular está com seus limites claros, com um formato triangular, com uma

extremidadeemcontatocomoprocessoopercular.

Na cesta branquial, as cartilagens do arco hioide estão com  dois centros

evidentes de ossificação e, nestas regiões, a cartilagem inicial não pode mais ser

observada. Um centro localizado na região média, mais anterior, em cada barra do

arco hioide, formará o os cerato‐hial anterior. No meio desta estrutura se formam

cristas ósseas em vista dorsal. O centro localizado quase no limite posterior do arco

hioide,naregiãoarticularcomointer‐hial,formaráooscerato‐hialposterior.

Todos os elementos cerato e epibranquiais  se também estão se ossificando.

Ainda é possível evidenciar as cartilagens precursoras, por transparência, como finos

filamentosnointeriordestesossos.Nãohásinaldeossificaçãonasdemais estruturas

cartilaginosasbranquiais.Oquintoceratobranquialportainúmerosdentesemsuaface

dorsal.Omesmoacontecenasuperfícieventraldaplacadentígerafaringiana.

Em vista ventral na cesta branquial, podem ser observados os tendões do

músculo sternohyoideus. A porção anterior destes tendões está se ossificando,

formandodoisfilamentosósseoslongitudinais.Essaossificaçãopareada(i.e.ambosos

lados) se estende da região lateral à passagem da veia jugular inferior  até,

aproximadamente, o primeiro terço da barra hioide. Este é o início da formação do

“uro‐hial” (=par‐uro‐hial). A extensão cartilaginosa ventral do primeiro basibranquial

(núcleocartilaginosodopar‐uro‐hial)aindaestáevidente.

São observados, claramente, 13 raios branquiostégios em cada lado do arco

hioide,suportandoamembranabranquiostégia.Háum gradientedetamanho,sendo

omaior,oraiolocalizadomaislateralmente.



‐26ºdiaapóseclosão(20,1mmCP,Fig.37):

Asproporçõesdosbarbilhõesnãosofremmudançasconsideráveis.Mantêm‐se

conformedescritasnoestágioanterior.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

105

As estruturas cartilaginosas, de modo geral, estão bem degeneradas pelo

avanço das ossificações. Muitas já não se coram mais, dificultando a visualização, a

qualsópodeserfeitaatravésdemudançasnaincidênciadaluz.

As cartilagens do autopalatino estão somente presentes nas extremidades

desteelemento.

AcartilagemdeMeckelestámuitoreduzida,ficandorestritaàáreadoprocesso

coronoideeseestendendoanteriormenteatéametademandíbula.

Na placa hio‐simplética, as cartilagens originais ficam restritas à extremidade

dorsal, local de articulação da hiomandíbula com o neurocrânio; na região média,

entre a  hiomandíbula e o quadrado; anteriormente, na base do processo pterigoide,

entre o quadrado e o metapterigoide. Também se mantém, mesmo no adulto, na

extremidadeposteriordoprocessoopercular

O inter‐hial se mantém cartilaginoso, embora fracamente corado, indicando

que os eventos de ossificação podem ter se iniciado. Este elemento está

completamente isolado, com seus limites bem definidos. Mesmo assim continua

fortemente articulado dorsalmente à placa hio‐simplética e ventralmente, ao limite

póstero‐lateraldoarcohioide.

Na cesta branquial,  as barras do arco hioide apresentam, em seus limites

mediais,uma“extensão”cartilaginosa,quecontataolimiteposteriordoshipiaiscoma

cópula anterior. Esta extensão cartilaginosa é muito sutil e está fracamente corada

(região dos hipiais dorsais). A cópula posterior e os hipobranquiais I – III se mantêm

cartilaginosos e bem corados. As cartilagens dos ceratobranquiais I – V e os

epibranquiaisI–IVestãorestritassomenteàsextremidadesdesteselementos.Mesmo

por transparência, não podem mais serem vistas na região ossificada. O núcleo

cartilaginosodouro‐hialnãopodemaisservisto.

Surge uma nova cartilagem localizada posteriormente à articulação do quarto

ceratobranquial com o quarto epibranquial (extremidades laterais). Tem formato

grosseiramente cilíndrico e é muito sutil e delicada. Trata‐se do elemento aqui



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

106

denominadopseudoepibranquialV(usualmenteidentificadocomoepibranquialV–v.

discussão).

Persiste, mesmo que muitosutil e não corada, a massa cartilaginosa presente

anteriormente ao terceiro faringobranquial. Nessa massa, evidencia‐se uma nova

cartilagem nodular, presente na extremidade medial dos epibranquiais I e II. No

entanto, não está claro se realmente é esta estrutura ou algo neomórfico pr

a

Siluriformes.

Osteocrânio

:Asossificaçõespericondrais,demodogeral,estãobemavançadas

em todas as estruturas pré‐formadas em cartilagem. Algumas ossificações dérmicas

tardiastambémpodemserobservadas.

O autopalatino, com formato cilíndrico está quase todo ossificado e a 

cartilagem original, com exceção das extremidades, não pode mais ser vista. Sua

articulaçãocomoneurocrânio(regiãodoetmoidelateral)estámaisrígida.

A pré‐maxila aumenta de tamanho, se estendendo mais posteriormente e de

espessura,adquirindo,emvistadorsal,umformatotriangular,comasbordaslaterais

maislargasqueasmediais.Amaxilapermanecesemmudançasconsideráveis.

Odentárioseespessamaisqueoestágioanteriorrecobrindotodaacartilagem

de Meckel (com exceção da sínfise) se estendendo até o processo coronoide, com

exceçãodesuaextremidadedorsal.Napartemaisanterior,odentáriodefundecoma

ossificação da cartilagem de Meckel (osso mento‐meckeliano), formando uma

estrutura maciça. A ossificação posterior desta cartilagem (ângulo‐articular) está

continua(fundida)comporçãoanterior(dentário).

As ossificações na placa cartilaginosa hiosimplética‐pterigo‐quadrada estão

avançadas.Ocentromais dorsal, futurohiomandibular,abrange acartilagemoriginal

em toda a extensão ântero‐posteior. Com exceção na porção dorsal que permanece

cartilaginosa. Na região anterior da hiomanbíbula, evidencia‐se uma fina ossificação

dérmica,fracamentecorada,dandoumaspectogrosseiramentequadradoaesseosso.

Ventralmente,aossificaçãodoquadradoestábemdesenvolvida,comexceção

dopontodearticulaçãocomacartilagemdeMeckel(regiãodoângulo‐articular).Essa



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

107

ossificação de estende ate  a base do processo pterigoide. Na porção anterior deste

processo, o futuro metapterigoide permanece o menor de todos. Sua extremidade

anterioréumafinabarra.

A ossificação ao redor do canal pré‐opercular se iniciou, formando o os pré‐

operculo, com formato longo e fino, situado no limite látero‐posterior da placa hio‐

simplética. Este osso ainda não está fundido com as ossificações da placa hio‐

simplética.

Aossificaçãodérmica,emtodaaextensão,na antigamembranaopercularestá

concluída.Mesmoque aindabemfino,oosso opercularestámais evidente,com seu

contornomaisnítido.Anteriormente àbordaventraldo opérculo,surgeaossificação

dérmica do interopérculo, com uma  formato grosseiramente triangular, sendo que a

bordaposterior,quasecontatandooopérculo,émaislargaqueaanterior.Esta,muito

próximadolimiteventraldoosquadrado.

Nacestabranquial,asextremidadesmediaisdabarrahioideestãoossificadas,

indicando a formação dos hipiais. A ossificação do cerato‐hial anterior é a mais

desenvolvida, se estendendo, na região mediana. A  extremidade anterior do cerato‐

hialposteriorsealongasutilmente.

Nacópulaanterior evidenciam‐sedoiscentros deossificação.O maisanterior,

próximo ao segundo arco branquial, formará o segundo basibranquial e o mais

posterior, o terceiro. Nenhuma evidência de ossificações mais anteriores que

pudessemcorresponderaoprimeirobasibranquial.Oshipobranquiais Iestãocomseus

limites anteriores um pouco mais claros, indicando certa degeneração da cartilagem,

possivelmentedevidoaoiníciodeossificação.

Os cerato e epibranquiais estão bem ossificados, em toda sua extensão, com

exceção das extremidades, que permanecem com cartilagem mesmo nos adultos. A

porção mediana do quinto ceratobranquial se expande lateralmente, possivelmente

Poeacréscimodeossificaçãodérmica.Comisso,esteelementoficalargo,aumentando

consideravelmente onumerodedentessuportadosnaface dorsal. Aplacadentígera

faringeanatambémestámaiorecommaisdentesnasuperfícieventral.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

108

Em vista ventral na  cesta branquial, as ossificações pareadas dos tendões do

músculo sternohyoideus estão mais alongadas longitudinalmente. Além disso, na

regiãoanterior,estasossificaçõesseexpandemlateralmenteesefundemaoredorda

passagem da veia jugular inferior. Com isso, o uro‐hial fica mais próximo de seu

formatonoadulto.

São observados 14 raios branquiostégios  em cada lado do arco hioide. O

gradientedetamanhoaindaémantidoesepreservamesmonoadulto.



‐39ºdiaapóseclosão(35,4mmCP,Fig.38):

As proporções dos barbilhões não sofrem mudanças consideráveis, se

mantendoconformedescritasanteriormenteepermanecerãoatéoestágioadulto.

As estruturas cartilaginosas iniciais já não são mais observadas, ficando

reduzidassomenteàsáreasdearticulação.

As cartilagens do autopalatino estão somente presentes nas extremidades

desteelemento.

AcartilagemdeMeckelestáaindamaisreduzidaquandocomparadaaoestágio

anterior, ficando restrita ao “meio” do dentário e se estendendo pelo meio do

processocoronoideatésuaextremidadedorsal.

Na placa hio‐simplética, as cartilagens orig

inais só estão presentes na

articulação do quadrado com  a hiomandíbula (cartilagem simplética ou sincondral

sensu Lehmann A., 2006) e desta com o neurocrânio. Além destas, mantém‐se a

cartilagemnoprocessoopercular.

Nas barras do arco hioide, duas regiões cartilagin

osas permanecem.

Anteriormente, nas articulações do hipial com o cerato‐hial anterior e,

posteriormente,destecomocerato‐hialposterior.

A cópula posterior e os hipobranquiais I – III se mantêm cartilaginosos e bem

corados. Os ceratobranquiais  I – V e os epibranquiais  I – IV possuem cartilagens



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

109

apensas nas extremidades. O pseudoepibranquial V (usualmente identificado como

epibranquialV–v.discussão)continuacomoumpequenocilindrocartilaginoso.

Em nenhum exemplar examinado neste estágio foi encontrada a cartilagem

nodularanterioraoterceirofaringobranquial.

Osteocrânio

: O autopalatino se alonga, acompanhando o crescimento dos

indivíduos.

Apré‐maxilamantémoformatodescritonoestágioanterioreseexpandemais

medialmente.Emvistadorsal,quasesetocamnalinhamediana.

A maxila inferior está totalmente ossificada. O dentário consolidado com a

cartilagemdeMeckele,posteriormente,comoângulo‐articular.

As ossificações na placa hiosimplética‐pterigo‐quadrada estão bem

desenvolvidas.

 O os quadrado se funde com o metapterigoide na região ventral. O

metapterigoide está mais largo, com a adição de ossificações dérmicas laterais nessa

estrutura.

Surgem, como mineralizações de um ligamento (tendon bone), os

mesopterigoides (= ectopterigoides) e “entopterigoides” (sensu Arratia, 1990).

Aparentemente, seguem o tipo 5 de Arratia, 1992. O “entopterigoide” se ossifica no

terço anterior do ligamento que se estende entre o metapterigoide e o etmoide

lateral. Possui uma forma alongada, se estendendo paralelamente ao autopalatino e

sendomenorqueesse.Emvistalateral,esteelementoé aproximadamenteduasvezes

mais espesso que o autopalatino. Inúmeros dentes estão presentes em sua face

ventral. O  ectopterigoide (= mesopterigoide) se ossifica lateralmente ao

“entopterigoide” (não está claro se há o ligamento indireto, sugerido por Arratia,

1992).Possuiumformato“vermiforme”eficaposicionadonaextremidadeanteriordo

metapterigoide.Seuformatoéconsideradosinapomórfcoparaogênero.

O os pré‐opérculo, com formato longo e fino, está fundido com os ossos do

suspensório,derivadosdaplacahio‐simplética.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

110

O opérculo e o inter‐opérculo estão mais espessos e possuem, em suas faces

laterais,inúmerasranhuras.Ambosmantémasformasdescritasanteriormente.

Conectando o arco hioide ao sistema suspensor, o inter‐hial começa a se

ossificar.Suaossificaçãoteminíciona extremidadeventral eseestendedorsalmente.

Nesteestágio,aregiãoventralestátotalmenteossificadaeacartilagemprimordialsó

évisívelnaextremidadedorsal,articulandocomfacemesialdahiomandíbula.

A ossificação dos ceratobranquiais anteriores e posteriores e dos hipiais

aumentasuaextensão.Váriossulcoseranhurassãoobservadosnassuperfíciesdestes

elementos.

A ossificação do paruro‐hial está mais desenvolvida se estendendo

anteriormente, quase tocando, póstero‐ventralmente, os hipiais. Suas duas metades

estãofundidasnaregiãodocanalparaapassagemdaveiajugular.Posteriormente,se

estende até aproximadamente um quinto do comprimento do músculo

sternohyoideus. A porção lateral esta mais ossificada que a porção mediana. Esta, se

extende mais posteriormente, conferindo ao uro‐hial um formato grosseiramente

“losangular”.

Na cópula anterior, os basibranquiais II e III estão se formando. Continuam

sutis,masdefinidos.

Osceratoeepibranquiaisestão aindamais ossificados,emtodasuaextensão,

comexceçãodasextremidades,quepermanecemcomcartilagem mesmonosadultos.

Estes elementos não são mais como barras lisas, possuindo inúmeras ranhuras

alinhadasaoeixoprincipal.Oterceiroepibranquialapresentaoprocessouncinadoem

suasuperfíciedorsal,voltadoposteriormente.

As porções mediana dos ceratobranquiais V continuam se expandindo com

acréscimo de ossificação dérmica. O número de dentes na face dorsal também

aumenta. A placa dentígera faringiana também aumenta sua área e a quantidade de

dentesnasuperfícieventral.

Sãoobservados15raiosbranquiostégiosemcadaladodoarcohioide.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

111

‐Exemplarjuvenil(111,8mmCP,Fig.39):

Este estágio foi usado para evidenciar a ossificação final  de alguns elementos

dacestabranquial.

No arco hioide, os hipiais se fundiram aos cerato‐hiais anteriores, sobrando

uma pequena área cartilaginosa na borda posterior. Os cerato‐hiais anteriores se

fundem aos posteriores através de extensos ósseas (dérmicas). As cartilagens

primordiaisficamrestritasalinhamédia.OsbasibranquiaisIIeIIIestãoossificados.O

segundo(maisanterior)bemmais desenvolvido,comcerca dodobrodotamanho do

terceiro. No limite posterior  da cópula posterior evidencia‐se uma área distinta, em

formaelípticalocalizadamedianamente.Estaestruturaestáconectadaàcartilagemao

redor e permanece assim mesmo nos adultos. Possivelmente é um resquício da

cartilagem pós‐ceratobranquial, a qual está presente nos caraciformes (vide

discussão).

Os hipobranquiais I e II estão ossificados, sendo que a ossificação se inicia 

primeiramente no mais anterior (I). Em ambos, o processo de ossificação se inicia na

anterior desteselementoseseestendendoposteriormente. Oterceirohipobranquial

permanececartilaginoso.

Os ceratobranquiais e epibranquiais estão totalmente ossificados, com as

cartilagens primordiais restritas às suas extremidades, que se articulam com os

epibranquiais e  com os hipobranquiais. Esta condição permanece no adulto. O

processo uncinado do terceiro epibranquial está completamente formado, com uma

formadeflangevoltadoposteriormente.

Umapequenacartilagem,muitosutil,deformagrosseiramentecilíndrica,está

presente anteriormente ao terceiro faringobranquial. Trata‐se do chamado segundo

faringobranquialearticula‐secomasextremidadesmediaisdosepibranquiaisIeII.O

terceiro e quarto faringobranquiais estão completamente ossificados, preservando

cartilagensnasextremidades.Oquartofaringobranquialestácompletamentefundido

comaplacadentígerafaringiana.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

112

O paruro‐hial está mais desenvolvido, principalmente em sua extremidade

posterior, indicando que a ossificação se estende sempre pelo tendão do músculo

sternohyoideus.

Surge mais um raio branquiostégio, o  mais medial, totalizando 16 raios

branquiostégiosemcadaladodoarcohioide. 



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

113

Desenvolvimento do esplancnocrânio de Lophiosilurus alexandri, incluindo

condrocrânioeosteocrânio.



‐1ºdiaapóseclosão(4,9mmCP):

Nãoháevidênciasdecartilagensnesteestágio.Mesmoemcorteshistológicos

verificaquehásomentecélulasmesenquimais(indiferenciadas) (Fig.40).A larvaestá

aderidaaosacovitelínico.



‐2ºdiaapóseclosão(5,0mmCP,Fig.41):

Presença de alguns precursores cartilaginosos. Neste estágio as estruturas

observadasapresentam acoloraçãomuitosutil,sendopossívelidentificá‐lassomente

pela polarização diferencial da luz. Superficialmente, há uma prega de pele que se

estendeventralmente, localizadanolimiteposterior damaxila superior.Acreditoque

este seja o primórdio do barbilhão maxilar. No entanto, não há nenhum indício de

precursor cartilaginoso desta estrutura. Nota‐se a existência dos primórdios da

cartilagemdeMeckel,do arcohioidee dascartilagensdosprimeirosquatroparesde

ceratobranquiais.Acápsulaótica estáeminíciodeformaçãoe seuslimites nãoestão

bem definidos. A  cartilagem de Meckel, localizada em ambos os lados da mandíbula

(maxil

a inferior), tem forma de um bastão. As cartilagens de Meckel estão dispostas

transversalmente ao eixo principal do corpo, ao longo da borda da mandíbula e se

contatam medianamente. Posteriormente a elas encontra‐se a cartilagem precursora

do arco hioide, em um nível mais superficial que as demais. Esta tem forma

ligeiramente elíptica. As cartilag

ens dos ceratobranquiais têm forma de bastões, e

estão dispostas diagonalmente ao eixo dorso‐ventral. A cartilagem do prim eiro

ceratobranquialéamaiordelas.Otamanhoreduzprogressivamentepartrás,sendoa

menordelas,a cartilagemdoquartoceratobranquial.Issopodeserumindicadorquea

sequência de formação da cartilagem é da frente para trás. Os demais elementos da

cesta branquial, i.e. hipobranquiais, epibranquiais, faringobranquiais, assim como o

uro‐hialeoshipiaisestãoausentesnesteestágio.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

114

‐3ºdiaapóseclosão(7,7mmCP,Fig.42):

Nesteestágio,algumaspartescartilaginosassãoclaramentevisualizadas.

A cartilagem do autopalatino está presente, mas fracamente corada. Não é

possível determinar com precisão as limites nem seu local de articulação com o

neurocrânio.

A cartilagem de suporte do barbilhão maxilar está presente e bem

desenvolvida,sendoseucomprimentoligeiramente  menorqueo tamanhodocrânio.

Esteelementoconsistedeumafileiradecondrócitosachatados,separadosentresipor

uma pequena quantidade de matriz. Está ancorada superficialmente (aparentemente

napele)eestásituadadorsalmenteàcartilagemdeMeckelaproximadamenteemseu

terço mais posterior, próximo da articulação com a cartilagem hio‐simplética. As

cartilagensdesuportedosbarbilhõesmentonianosinternoseexternostambémestão

presentes, porém em um grau de desenvolvimento inferior. Os barbilhões

mentonianos externos se localizam ventralmente à cartilagem de Meckel e logo

anteriormente à articulação desta cartilagem com a cartilagem hio‐simplética. Os

barbilhões mentonianos internos são mais curtos e fracamente corados (quase uma

simples prega de pele), localizam‐se próximos à linha  mediana, na região ventral da

cabeça,justamentesob oarcohioide. Nenhuma placacartilaginosaassociada a esses

barbilhõesfoiobservada.

Uma placa cartilaginosa, de formato grosseiramente  triangular,estápresente,

emvistalateral,articulando‐secomoneurocrânio,naregiãoanteriordacartilage

mda

cápsulaótica.Esta placaapresentaumforâmennapartemaisdorsale maisanterior.

Esse forâmen é um indicador que esta placa cartilaginosa se trata da cartilagem hio‐

simplética (hio‐simplética‐pterigoquadrada, sensu Arratia, 1990). O referido forâmen

dápassagemparao ramohioideo‐mandibular(sensu  Arrati

a,1992)dosétimo parde

nervos cranianos (n. facial). Em seu limite ventro‐posterior, se encontra uma haste

cartilaginosa.Trata‐se,da cartilagemdointer‐hial.Estacartilagemseencontrafundida

à placa hio‐simplética e à barra cartilaginosa do arco hioide. Apesar desta fusão é

possível notar que se trata de uma estrutura individualizada, pois apresenta os



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

115

condrócitos menores e em maior  densidade do que aqueles encontrados tanto na

barrahioidecomonaplacahio‐simplética.

A placahio‐simpléticaapresentaumprocessorudimentaremseu terço distal,

voltado anteriormente. Trata‐se do início da formação do processo pterigoide. Esta

placa está articulada anteriormente com outra barra cartilaginosa, disposta 

longitudinalmente. Esta barra, que sustenta a parte inferior da mandíbula, é a

chamada cartilagem de Meckel. Neste estágio, a cartilagem de Meckel está

desenvolvida em ambos os lados e contatam‐se na extremidade anterior do

esplancnocrânio. Neste ponto de união existe uma concentração de “condrócitos”

menosdensadoqueaencontradanascartilagensdeMeckel.Estabarracartilaginosa

apresentaumprocessorudimentarde formatriangular,fracamentecorado, que está

situado no terço posterior, próximo à articulação com a cartilagem hio‐simplética e

voltadodorsalmente.Trata‐sedoiníciodoprocessocoronoide.

Abarrahioidetemseucontornobemdelimitadoeestábemcorada.Apresenta

uma expansão em seu contorno, localizada posteriormente, aproximadamente no

primeiro terço de seu comprimento, próximo à extremidade que se articula com o

inter‐hial.Ambasasplacasdoarcohioideseaproximamnalinhamediana.Noentanto,

nãoépossívelvisualizaraqualquer algumtecidounindo‐as.Nalinha mediana, quase

tocando as barras do arco hioide há uma cartilagem ímpar, disposta

longitudinalmente. Trata‐se da cópula anterior, que formará os basibranquiais. Nas

extremidades proximais de ambas as barras hioide há um processo cartilaginoso,

grosseiramente cilíndrico, que se origina na face dorsal e se estende até a linha

mediana.Essassão,possivelmente,ascartilagen

sprecursorasdohipialdorsal.

Os ceratobranquiais I a V estão presentes e bem corados. O  quinto

ceratobranquial (mais posterior) não está corado tão intensamente quanto os outros

mais anteriores, indicando que a ordem de surgimento destes elementos seja no

sentidoântero‐posterior.Nãoháindíciosdoshipobranquiais. EpibranquiaisIaIVestão

presentes,

 sendo que o epibranquial IV está fortemente corado, evidenciando seus

limites, enquanto o III, II e I estão fracamente corados e de difícil visualização. A



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

116

cartilagem nodular do pseudoepibranquial V (usualmente  identificado como

epibranquialV–v.discussão)estáausente.



‐4ºdiaapóseclosão(9,3mmCP,Fig.43):

A cartilagem do autopalatino está evidente, bem corada. De formato

grosseiramente elíptico, possui em sua região mediana uma expansão triangular

voltada dorso‐medialmente. Esta extremidade  se articula com a porção anterior do

neurocrânio,naregiãonasal(solumnasi).

Surge o processo opercular, como uma pequena expansão arredondada, na

bordaposteriordacartilagemhio‐simplética.Oprocessopterigoide estámaiordoque

noestágioanterior,exibindooformatodebarrafinaapontadaanteriormente.

Oprocessocoronoide,dacartilagemdeMeckelestánotadamentemaisaltodo

quenoestágioanteriorebemcorado,comformatriangular,apontandodorsalmente.

Todos os ceratobranquiais (I a V) estão igualmente bem corados. O primeiro

ceratobranquialé umpoucomaislongoqueosegundo.Osegundo,terceiroequarto

são aproximadamente de mesmo tamanho. Já o quinto é pouco mais longo que a

metadedocomprimentodoquartoceratobranquial.

As cartilagens dos hipobranquiais I e II estão presentes, porém estas estão

menos coradas do que as dos ceratobranquiais. Se conectam com as extremidades

proximais e com à cópula anterior. A cartilagem do terceiro hipobranquial está

conectada, em sua extremidad

e medial, à cópula anterior  e à placa cartilaginosa

posterior.AscartilagensdoshipobranquiaisIVeVestãotodasinterligadas,formando

umaplacacartilaginosaúnica.OepibranquialIIcontinuafracamentecoradoeháuma

melhorvisualizaçãodoepibranquial I. Nãohánenhumsinal do pseudoepibranquialV

(usualmente identificado

 como epibranquial V – v. discussão). Há uma placa

cartilaginosa, localizada dorsalmente na cesta branquial, associada com o qua rto

epibranquial. Essa placa se estende anteriormente até a extremidade proximal do

terceiro epibranquial. Trata‐se, presumivelmente, do precursor do quarto

faringobranquial(faringobranquial).



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

117

Osteocrânio: no limite posterior do processo opercular, existem filamentos

mais rígidos que a prega de pele que o circunda. Apesar de  não haver nenhuma

coloração,supõe‐sequesejaoiníciodosfilamentos(“splints”)ósseos,precursoresdo

opérculo. Na borda da boca, futura localização dos dentários (parte inferior) e pré‐

maxilas (parte superior) observam‐se os primórdios de dentes. São estruturas sem

coloração,deformatriangular,nãoancoradasemnenhumacartilagem.

Observam‐se alguns raios branquiostégios. Esses raios são formados como

ossificaçõesdérmicasnamembranabranquiostégia,ventralàcartilagemdocerato‐hial

(arcohioide).Nesteestágiohácincoraios.Oraiolocalizadomaislateralmenteéomais

longo, e os demais são progressivamente menores conforme se aproximam da linha

mediana.Issoindicaumasequênciadesurgimentolátero‐medial.



‐5ºdiaapóseclosão(10,5mmCP,Fig.44):

Ascartilagensdos hipobranquiais I, II e IIIaindaestãoconectadasdistalmente

aos respectivos ceratobranquiais e proximalmente, à copula anterior. No entanto, o

sítiodecontatoestáfracamentecoradoemaisdelgadoqueoestágioanterior,sendo

possívelevidenciaroslimitesdesteshipobranquiais.Ascartilagensdoshipobranquiais

IV e V continuam fundidas entre si e com os ceratobranquiais IV e V, formando uma

massa cartilaginosa mais clara, que contacta anteriormente a cópula anterior. Assim

como as cartilagens hipobranquiais mais anteriores, os pontos de contato com os

ceratobranquiaisecomacópulasãobemmenoscorados.Osegundoepibranquialestá

bem nítido e ainda não há sinal do pseudoepibranquial V (usualmente identificado

como epibranquial V – v. discussão). Uma placa cartilagin

osa, de formato elíptico,

anterior à placa do quarto faringobranquial está presente. Sua extremidade anterior

contata lateralmente o segundo epibranquial e a extremidade posterior se aproxima

daplacadoquartofaringobranquial.Lateralmenteaessepontodecontatoentreelas,

encontra‐seoterceiroepibranquial.Trata‐sedaplacadoterceirofaringobranquial.

Osteocrânio

: os filamentos (“splints”) ósseos, precursores do osso opercular

estãomaisevidentes,apesardeaindanãoestaremcorados.Observam‐sedoisdestes



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

118

filamentos, conectados entre si na parte proximal, mais anterior, quase tocando o

processoopercular.

Oospré‐maxilasurgecomoumfilamento,nãocorado,naregiãodacartilagem

etmoidal, logo abaixo do neurocrânio. Esse elemento porta os dentes da parte

superiordaboca.Surgeoprimórdiodoosmaxila.Tambémpossuiformafilamentosae

não está corada. Suporta a cartilagem do barbilhão maxilar, estando paralela a esse.

Sua extremidade proximal está em contato com a cartilagem do autopalatino (pars

autopalatinadeArratia,1990).

Surgemmaisdoisraiosbranquiostégioslocalizadosmedialmenteaosdemaise

seguindo a ordem decrescente de tamanho (látero‐medial). A superfície dorsal do

quinto ceratobranquial apresenta alguns dentes. A placa dentígera, associada ao 

quartofaringobranquialapresentadentículosemsuafaceventral,voltadaparadentro

dacestabranquial.Onúmerodedentesvariaentre7e11enãoestãoalinhados.



‐6ºdiaapóseclosão(10,9mmCP,Fig.45):

Neste estágio já não acontecem maiores transformações nas cartilagens do

esplancnocrânio. Na extremidade anterior do processo pterigoide está presente uma

fina barra cartilaginosa, transparente, sem coloração, sendo visível somente pela

incidênciadiferencialdaluz.

A cópula anterior está reduzida no comprimento e mais fina, em comparação

com o estágio anterior. Dorsalmente à extremidade ante

rior da cópula anterior,

evidencia‐seumtecidocartilaginoso,nãocorado.Épossívelver,emvistaoblíqua,que

esta cartilagem é a extremidade ventral de uma extensão cartilaginosa projetada a

partir da extremidade anterior da cópula anterior e é considerada como a “invasão”

cartilaginosa no uro‐hial, a partir do primeiro basibranquial (cf. Adriaens, 1998). As

cartilag

ens dos hipobranquiais I, II e III ainda estão conectadas aos respectivos

ceratobranquiaise,proximalmente,àcópula anterior,quasesemalteraçãoaoestágio

anterior.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

119

Osteocrânio:acartilagemdeMeckel,emsuaporçãomedianaestáfracamente

corada, exceto pelo ponto de contato entre as duas metades. O os dentário está

presente,apesar de não corado, circundando a cartilagem de Meckel. Porta cerca de

dezdentes.Surgemaisumraiobranquiostégioemcadalado.Aossificaçãodouro‐hial

aindanãoestápresente.



‐7ºdiaapóseclosão(11,2mmCP,Fig.46):

A extensão cartilaginosa anterior do processo pterigoide está claramente

evidente,bemcorada.AcartilagemdeMeckelapresentaumaáreanãocorada,emsua

extremidadeanterior,excetopelasua extremidadedecontato com seusimétrico,na

linha mediana. Verifica‐se, histologicamente, que esta é uma região de intensa

atividade mitótica, produzindo células que irão formar e expandir cartilagens

adjacentespermitindoocrescimentodoindivíduo(Fig.47).

Na cesta branquial, destaca‐se a “invasão” cartilaginosa ventral, derivando a

partirdaextremidadeanteriordacópula anterior(regiãodopossível basibranquialI).

Esteprocessoventralseestendeatéostendõesdomúsculosternohyhoideus(Fig.48).

OshipobranquiaisIaIIIaindaapresentamlocaisdecontatocartilaginosos,tantocoma

cópula anterior quanto com seus respectivos ceratobranquiais. Todavia, esses

“contatos” cartilaginosos não estão corados. Logo, os três primeiros hipobranquiais

estão evidentes. Ainda não há sinal de individualização dos demais hipobranquiais,

embora a cartilagem mediana posterior estej

a separada da cópula anterior e dos

ceratobranquiaisV.

Osteocrânio

: as pré‐maxilas estão mais longas, quase contatando a região do

autopalatino e portam mais dentes. Os dentes ainda detém o formado cônico (=

indiferenciados). Em corte histológico é possível evidenciar a íntima relação dos

dentículoscoma pré‐maxilasem,contudo,estaremaderidosaela(Fig.49).Osdentes

neste estágio, chamado de  dentes epiteliais, não são formados por processos de

ondontogênese propriamente ditos  (i.e. não são homólogos aos dentes definitivos).

Estes dentes epiteliais estão suportados pelos ossos, mas ficam aderidos no tecido



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

120

epitelialqueoscircundam(Figs.49,50AeB).Aformaçãodosdentes“reais”presentes

em estágios mais tardios depende da interação entre células do tecido epitelial com

células do ectomesênquima subjacente. Esta interação pode ser evidenciada,

histologicamente, neste estágio (Figs. 50A e B). A maxila  já possui um primórdio da

facetaarticularcomacartilagemdoautopalatino.

Oosdentárioestámais desenvolvidoeclaramenteconectadoà cartilagemde

Meckel,aqualtambémestáseossificando,formandoosossosmento‐meckelianos.Os

dentários estão maisdesenvolvidos (= mais espessos) posteriormente. Evidencia‐se o

contornodoossoopercular,quepossuiumformatotriangular,comumaextremidade

em contato com o processo opercular. Nesse elemento identifica‐se uma barra

horizontalmaisespessa,que tangenciaolimitedorsal, eoutra,quasevertical,quese

dirigeventralmente,emdireçãoaoraiobranquiostégiomaisexterno,tangenteaoseu

limiteanterior.

Emcorteshistológicosnaregiãodacestabranquialevidencia‐seaformaçãode

filamentosósseosaoredordostendõesdomúsculosternohyoideus.Esteéoiníciodo

futurouro‐hial(Fig.48).



‐8ºdiaapóseclosão(11,7mmCP,Fig.51):

AáreanãocoradadacartilagemdeMeckelseestendedesdesuaextremidade

mediana de contato (que ainda se apresenta corado) até quase a região do processo

pterigoide. Surge, ventralmente  à extremidade ântero‐ventral da cartilagem do

autopalatino,acartilagemsubmaxilar,deformatoligeiramentecircular.

A conexão medial entre ambas as barras do arco hioide ainda é mantida por

uma extensão dorsal na região dos hipiais, que contata a cópula anterior. Esta

extensão cartilaginosa é muito sutil e está fracamente corada (região dos hipiais

dorsais).OshipobranquiaisIaIIIestãolivres,semconexãocartilaginosacomacópula

anterior ou com os ceratobranquiais. Uma nova cartilagem surge localizada

posteriormente ao local de articulação do quarto ceratobranquial com o quart o

epibranquial.Émuitosutileseuslimitesnãoestãoclaramentedefinidos.Noentanto,



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

121

trata‐se do elemento aqui denominado pseudoepibranquial V (usualmente

identificado como epibranquial V – v. discussão). De  fato, apesar de não estar

articuladocomoquintoceratobranquial,aparentementeestáassociadoaeleporum

delicado ligamento, somente visto alterando‐se a incidência da luz. Em cortes

histológicos pode‐se evidenciar sua íntima  relação com a cartilagem distal do

ceratobranquialIV,comaqualcompartilhaopericôndrio(Fig.52).

Osteocrânio: A ossificação da cartilagem de Meckel está mais ampla. Se

estendendo, aproximadamente, desde quase o ponto de contato medial até o

processo coronoide. Outro centro de ossificação surge na região posterior da

cartilagem de Meckel próximo à sua articulação com a cartilagem hiosimplética‐

pterigo‐quadrada (futuro ângulo‐articular). A ossificação do dentário de estende

ventralmente,especialmentenoterço maisanteriordamaxila inferior. Estaextensão

proporciona o “ancoramento” dos futuros tendões do músculo intermandibularis. O

consequente aumento na ossificação do dentário ao redor da cartilagem de Meckel

causatambémsuadegeneração,poisimpedeatrocadenutrientes,umavezquenão

hávasosinternosàcartilagem.Oprocessodemortecelularéevidenciadopelogrande

aumento (hipertrofia) dos condrócitos (Fig. 53). Presença de inúmeros dentes, de

formato cônico (epiteliais),  na pré‐maxila e dentário. Apesar de difíceis de serem

visualizadas,foidetectadoumosteócitonabasedeumdosdentes“epiteliais”,quase

em contato com o dentário. Isto é uma evidência de como estas estruturas são

formadas(Fig.54).

Na placa cartilaginosa hiosimplética‐pterigo‐quadrada surgem alguns centros

deossificaçãopericondral.Aextremidadeanteriordoprocessopterigoidecomeçaase

ossificar.Esteéoiníciodometapterigoide(“tipo1”,deArratia,1990paraaformação

do metapterigoide em siluriformes, i.e., surge como uma ossificação da projeção

cartilaginosa que se estende anteriormente entre a futura hiomandíbula e o

quadrado). Outro centro de ossificação está na região dorsal desta cartilagem, ao

redordoforâmenparaoramomandibulardonervofacialseestendendoatéolimite

posterior, na região do processo opercular. Está é a ossificação do hiomandibular. O

terceiro centro de ossificação situa‐se na região ventral da placa cartilaginosa, quase

emcontatocomacartilagemdeMeckel.Esteéoprimórdiodoquadrado.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

122

O osso opercular está mais evidente, com seu contorno mais nítido. O pré‐

opérculoeinteropérculoaindanãopodemservisualizados.

Distinguem‐se asregiõesdeossificaçãodos elementos originários da barrado

arco hioide: cerato‐hial anterior e posterior. Em nível histológico, distinguem‐se os

processos iniciais de surgimento do hipial, com a formação de um filamento ósseo

pareado,recobrindonaregiãomedianadabarrahioide.Esteiníciodeossificaçãoainda

não apresenta qualquer efeito sobre a cartilagem da barra hioide, que continua

íntegra, com células (condrócitos) em tamanho normal e com grande quantidade de

matrizextracelular(Fig.55).

O inter‐hial permanece cartilaginoso mesmo no estágio adulto. Os

ceratobranquiais e os epibranquiais também apresentam nítidos centros de

ossificação.Esteprocessoseinicianaregiãomedianadecadaelementoeseestende

até suas extremidades. O quinto ceratobranquial porta inúmeros dentes cônicos em

sua região mediana, na face dorsal. Estes dentes, assim como aqueles presentes na

região bucal, são praticamente espículas ósseas, não homólogos aos dentes bucais

definitivos(formadosporprocessosodontogênicos)(Fig.56).

Ambos os faringobranquiais permanecem cartilaginosos, porém há uma placa

dentígeraassociadaaoquartofaringobranquial.



‐9ºdiaapóseclosão(12,0mmCP,Fig.57):

Nenhumamodificaçãonasestruturascartilaginosaséencontradaneste estágio

.

Acoloraçãodestasestruturasficamaisfracaàmedidaqueaossificaçãosedesenvolve.

A conexão medial entre as barras cartilaginosas do arco hioide, na região dos

hipiais,nãoémaisvisível.Issotornaindividualabarradoladodireitoeesquerdo.

Osteocrânio

: O processo de ossificação está  mais avançado. Porém, nenhum

novocentrodeossificaçãosurgenoesplancnocrânio.

Naregiãodacestabranquialtorna‐seevidente(aoestereomicroscópio)oinício

de ossificação dos tendões do músculo sternohyoideus. Essa ossificação pareada (i.e.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

123

ambos os lados) se estende da região lateral à passagem da veia jugular inferior até,

aproximadamente,àmetadedabarrahioide.Esteéoiníciodaformaçãodo“uro‐hial”

(=paruro‐hial).Aextensãocartilaginosadoprimeirobasibranquialaindaestáevidente.



‐10ºdiaapóseclosão(12,1mmCP):nenhumamudançarelevante

‐11ºdiaapóseclosão(12,3mmCP):nenhumamudançarelevante



‐12ºdiaapóseclosão(12,6mmCP,Fig.58):

Osteocrânio: Neste estágio tem início o processo de  achatamento do crânio,

queémuitopeculiar nestaespécie.Inicia‐seaossificaçãopericondraldoautopalatino.

O processo começa na região mediana da cartilagem auto‐palatina e se estende até

ambasasextremidades.Completa‐seaossificaçãodapré‐maxila.Aregiãoanteriordo

dentáriotambémestácompletamenteformadaefusionadaàcartilagemdeMeckel.O

processocoronoidepermanececartilaginoso,semsinaldeossificação.A ossificaçãona

região posterior da cartilagem de Meckel, que formará o ângulo‐articular, está

avançada, se estende anteriormente até o início do processo coronoide. A  placa

cartilaginosahiosimplética‐pterigo‐quadradaestáfracamentecorada,umavezqueos

centros de ossificação dos três elementos do suspensório estão mais avançados.

Apesarnãoestaremclaramentecorados(emvermelho),épossíveldefinirseuslimites.

O metapterigoide se estende anteriormente até próximo à base do autopalatino. O

hiomandibular está quase completamente formado. A ossificação do quadrado ainda

estáemfaseinicial.

Evidencia‐seopré‐opérculo, comformatolongoefino,situadono

limite latero‐ventral da placa hiosimplética, ao redor do canal pré‐opercular. O

interopérculotambémévisível,deformatogrosseiramentetriangular.Situadoentreo

limiteventraldaregiãodoquaradoatéabordaanteriordoopérculo.

Aumento da extensão da ossificação dos ceratobranquiais, tanto o anterior

quantooposterior.Aossificaçãodoparuro‐hialestámaisdesenvolvidaseestendendo

anteriormente, quase tocando, póst

ero‐ventralmente, os hipiais. Suas duas metades

estãofundidasnaregiãodocanalparaapassagemdaveiajugular.Posteriormente,se



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

124

estende até aproximadamente um quinto do comprimento do músculo

sternohyoideus. Ainda evidencia‐se seu “núcleo” cartilaginoso, sem sinal de

ossificação.Osdemaiselementosdosarcosbranquiaispermanecemsemmodificações

visíveis.

‐13ºdiaapóseclosão(12,8mmCP):nenhumamudançarelevante



‐28ºdiaapóseclosão(15,1mmCP,Fig.59):

Osteocrânio: O pré‐maxilar aumenta posteriormente, com a adição de um

flange,deossificaçãomembranosa.Aregiãodamaxilainferior,eambososlados,está

totalmente coberta tecido ósseo, restando apenas a extremidade dorsal do processo

coronoide a ser ossificada. A ossificação pericondral do metapterigoide está mais

avançada na região anterior, ficando mais espessa. O pré‐opérculo (ossificação ao

redor do canal pré‐opercular) está mais desenvolvido. Sua extremidade anterior se

aproximando do quadrado e a extremidade póstero‐dorsal, do hiomandibular.

Contudo ainda não está fundido a nenhum elemento. O interopérculo, igualmente

mais desenvolvido, está próximo de seu formato no adulto, com uma aparência

grosseiramente cônica, com a extremidade “pontiaguda” voltada anteriormente,

contatandoolimiteventraldoquadrado.

Uma ossificação membranosa é adicionada à parte já ossificada

(pericondralmente) dos cerato‐hiais, conferindo‐lhe  um formato irregular (não mais

roliço), com sulcos  e cristas. Ossificam‐se os hipiais. Os ceratobranquias e

epibranquiais estãoquaseplenamenteossificados,restandoapenas as extremidades,

cartilaginosas, que permanecerão assim no adulto. O terceiro epibranquial apresenta

um processo uncinado, localizado medialmente, em sua face dorsal, voltado

posteriormente,formadoporossificaçãomembranosa.Comoiníciodaossificaçãonas

porçõesmédiasdeambosos lados do (par)uro‐hial, esteatingeumformatopróximo

desuaformafinal,noadulto.Entretanto,seunúcleocartilaginosoaindaestáevidente,

semsinaldeossificação.



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

125

‐56ºdiaapóseclosão(33,0mmCP):nenhumamudançarelevante



‐61ºdiaapóseclosão(33,5mmCP,Fig.60):

O desenvolvimento diferenciado da maxila inferior em relação à maxila

superior resultando na morfologia peculiar desta espécie, com uma boca prognata

bemevidente.Osossosquecompõemasmaxilas(superioreinferior)jáseencontram

naformaapresentadapeloadulto,porémemescalamenor.Acartilagempresentena

sínfisenãoémaisevidente.AcartilagemdeMeckelsóévistaportransparência,pois

está completamente recoberta por tecido ósseo. Os ossos autopalatinos estão

completamenteformados,restandotecidocartilaginosoapenasemsuasextremidades

rostral(quese articulacomamaxila) ecaudal.Uma camadamuito finatambémestá

presente, em seu processo mediano, que se articula com o neurocrânio (porção

ântero‐lateral do etmoide lateral, no nível da lâmina orbito‐nasal). Os limites do

suspensóriocartilaginoso(placahiomandibular‐pterigo‐quadrada)nãosãomaisvistos,

umavezqueaossificaçãomembranosafoiadicionaàossificaçãopericondralinicial.As

cartilagens desta placa ainda permanecem (e serão mantidas no adulto) como as

cartilagens simpléticas (nas articulações do quadrado com a hiomandíbula e o

metapterigoide), cartilagens de articulação com o neurocrânio (pteróticos) e com o

opérculo. Os pré‐opérculos já  estão fundidos com os ossos do suspensório. Surgem,

como mineralizações de um ligamento (tendon bone), os mesopterigoides e 

“entopterigoides” (sensu Arratia, 1990). Aparentemente, seguem o tipo 5 de Arratia,

1992. O “entopterigoide” se ossifica no terço anterior do ligamento que se estende

entreometapterigoideeoetmoidelateral.Omesopterigoideseossificalateralmente

a esse, ficando entre o autopalatino e o mesopterigoide (não esta claro se há o

ligamentoindireto,sugeridoporArratia,1992).

Onúcleocartilaginosodoparuro‐hialnãoémaiscorado,tendosidoossificado.

Oscerato‐hiaiseoshipiaisatingemseuformatoencontradonoadulto.Apartirdeste

estágio nenhuma mudança de formato é observada, há somente um aumento de

tamanho destes elementos. Ossificam‐se os hipobranquiais, iniciando em sua

extremidadeanterior,seestendendo posteriormente.Oprimeiroestáemumestágio



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

126

mais avançado que o segundo. O terceiro permanece cartilaginoso. Os

ceratobranquiais e epibranquiais estão totalmente ossificados. Cartilagens

permanecem nas extremidades, que se articulam com os epibranquiais e com os

hipobranquiais.Estacondiçãopermanece noadulto.Oprocessouncinadodoterceiro

epibranquialtemaspectodeflange,comaadiçãodeumaossificaçãoacessóriaemsua

porção lateral. Uma pequena cartilagem, de forma grosseiramente circular, surge

anteriormente ao terceiro faringobranquial. Trata‐se do chamado segundo

faringobranquial.Noentanto,elanãosurgejuntamentecomascartilagensdosdemais

faringobranquiais, mas sim, se “destaca” da extremidade mediana da cartilagem do

segundoepibranquial.Talfatopodeserobservadodesdeexemplarescom16,0mmCP

(44ºd). O terceiro e quarto faringobranquiais está completamente ossificados,

preservandocartilagensnasextremidades.



‐116ºdiaapóseclosão(62,0mmCP,Fig.61):

Acartilagemde Meckelse reduzaumfilamento internonamaxilainferior.As

ossificações membranosas(adicionais) dosuspensório resultam emestruturasósseas

maiores e fundidas entre si. As cartilagens simpléticas se reduzem uma vez que a

ossificaçãopericondralcontinua.Asossificaçõesmembranosasdometapterigoideedo

hiomandibular se contatam. Logo, o suspensório assume um formato de um único

elemento.

OshipobranquiaisIeIIestãomaisossificados.Oprimeiroapresentacartilagens

apenas nas extremidades medial e lateral. O centro de ossificação do segundo

basibranquial está evidente na cópula anterior. Esse centro de ossificação já é

observado aos 37,2 mm CP (82ºd). O centro de ossificação doterceirobasibranquial,

apesardedifícilvisualização,tambémestápresente.Elesurgeemestágiosposteriores

ao surgimento do centro anterior (basibranqiual II), em indivíduos com cerca de 47

mm CP (88ºd). Em um dos indivíduos deste estágio é possível observar um pequeno

nódulo cartilaginoso adicional ao chamado segundo faringobranquial. Todavia, esta

estrutura aparece em somente um lado da cesta branquial, sendo considerada uma

“anomalia” (não é consistente). Todavia, o surgimento desta estrutura parece ser



Resultados

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

127

semelhante ao do segundo faringobranquial, ou seja, se “destaca” do respectivo

epibranquial. Isso evidencia maneira como estas estruturas devem surgir em

Siluriformes.



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

128

D ISCUSSÃO E  C ONCLUSÕES –  DESENVOLVIMENTO DO

ESPLANCNOCRÂNIO



Consideraçõesgerais

Como reportado por Sato et al. (2003), os ovos de Prochilodus argenteus e

Pseudoplatystoma coruscans são livres (não adesivos). Este fato é usual em espécies

migradoras (i.e. aquelas que efetuam a ‘piracema’), que também incluem, entre

outras, espécies dos gêneros Brycon, Salminus (Characidae, Characiformes) Leporinus

(Anostomidae, Characiformes) e Conorhynchos (insertae sedis, Siluriformes). Estas

mesmasespéciestambémnãoapresentamnenhumtipocuidadoparentaleproduzem

um número imenso de ovos (ca. 200.000 ovócitos vs. ca. 5.000 em espécies

sedentárias). Este mesmo padrão é reportado de inúmeras espécies de peixes,

incluindoespéciesmarinhase/oucomdesenvolvimentoindireto(Kunz,2004).

Muitospeixesmarinhos,assimcomoa grandemaioriadospeixesdeáguadoce,

possuem ovos demersais, que são geralmente maiores, contendo maisvitelo, que os

ovospelágicos.Nestetipodeovos,odesenvolvimentodesdeaeclosãoatéosestágios

juvenis é, geralmente, direto. A larva gradualmente assume caracteres dos adultos,

como forma, pigmentação e merística. Os ovos demersais frequentemente são

adesivosepostosemalgum  tipo deninho.Ocuidado parentaldoninhoé observado

emmuitasespécies,eessecuidadopodesemantermesmoapósaeclosão,comoem

ciclídeosquecarregamaslarvasnaboca,eemalgunsariídeos(KendallJr.etal.,1984) .

Em outros casos, o desenvolvimento das larvas até a completa  absorção do saco

vitelínico,sedánointeriordosováriosequandoaslarvassãoliberadasjásãocapazes

de alimentação ativa (estágio com a “boca aberta”). Como mostrado por Wourms

(1981),casosdeviviparidade,evoluíramindependentementeemdiversaslinhagensde

peixes,incluindocondríctis,celacantoseteleósteos.

A maioria das espécies que apresenta ovos adesivos, não possui

comportamento migratório, como Astyanax, Tetragonopterus, Hoplerythrinus, e

Lophiosilurusouapresentam pequenasmigraçõescomoSchizodon,Steindachnerinae

Curimatella (cf. Agostinho et al., 2003; Sato & Godinho, 2003). Adiciona‐se o fato de



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

129

que todas as espécies que apresentam qualquer tipo de comportamento de cuidado

parental possuem ovos adesivos (Sato et al., 2003). Este é o caso de Lophiosilurus

alexandriqueapresentacuidadoparentaleovosadesivos.Emambientenatural,esta

espécie faz ninhos circulares em regiões rasas de bancos de areia. A fêmea desova

várias vezes na estação reprodutiva, de agosto a março. Os ovos ficam aderidos uns

aosoutros,formandoumamassadepositadanocentrodoninho.Osmachosguardam

osninhos,mantendo‐seapoiadossobre osmesmos(Sato etal.,2003).Estesmesmos

autoresdestacamapresençadeumacapagelatinosaenvolvendoosovosdetodasas

espéciesdeSiluriformeseasuaausênciaemquasetodasasespéciesdeCharaciformes

que foram estudadas (com exceção de Astyanax). Mesmo não sendo o foco do

presenteestudo,talfatofoiigualmentecorroboradonasespéciesanalisadas.Otermo

“capa gelatinosa” não deixa clara a qual camada externa do ovo (“egg envelope”) a

que os autores se referem. Tal fato é importante para a determinação de qual

estruturaembrionáriaa origina (cf.membranasprimáriassão formadaspelosoócitos

dentro dos ovários; membranas secundárias são formadas por células do folículo,

membranas terciárias são formadas pelo oviduto ou outras estruturas não

imediatamente conectadas como ovo). Estas evidências possibilitam uma melhor

sustentação de possíveis hipóteses de homologias entre as espécies que apresentam

taiselementos.Todavia,onúmerodecamadasno“envelope”doovoévariáveletem

sido estudada em inúmeras espécies de peixes, marinhos e de água doce, há muito

tempo(Kunz,2004p.51‐52ereferênciaslácitadas).

O tempo de eclosão das larvas é um fator importante para a estratégia

reprodutiva da espécie. As variações encontradas por Sato et al. (2003) são

significativas, como era de se esperar, entre o comportamento e estratégia

reprodutiva de cada espécie, independente de proximidade filogenética ou grupos

monofiléticos (cf. Characiformes vs. Siluriformes). Foi verificado que  as espéciescom

ovosadesivos,comcuidadoparentalenãomigradoras(comoLophiosilurusalexandri)

apresentamumamaiordemoraparaaeclosãoemcomparaçãocomasespéciescujos

ovos são livres, sem cuidado parental e migradoras (como Pseudoplatystoma

coruscans e Prochilodus argenteus). Isso se reflete na quantidade de vitelo presente



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

130

nos ovos, uma vez que a demora na eclosão resulta em maior necessidade de

suprimentoenergéticodentrodoovo(endógeno).

OlongotempoparaaeclosãodosovosdeLophiosilurusalexandri,assimcomo

emváriasespéciescomestepadrão,i.e.Hoplerythrinusunitaeniatus,resultaemlarvas

recém‐eclodidas em um estágio mais avançado de desenvolvimento, com algumas

estruturas cartilaginosas ou até mesmo ósseas já em desenvolvimento e com  maior

comprimento.Essaslarvassão,nagrandemaioria,capazesdemovimentosnatatórios

ativos. No entanto, como normalmente o saco vitelino ainda apresenta uma grande

quantidade de energia armazenada (vitelo) mesmo após a eclosão, estas larvas

tendemademorarmaisparaaalimentaçãoexógena.

O contrário desta situação, ou seja, larvas com eclosão rápida possuem um

tamanho pequeno e praticamente nenhuma estrutura cartilaginosa formada, sendo,

naturalmente,incapazesdemovimentaçãoativa.Este tambéméocasodeProchilodus

argenteusePseudoplatystomacoruscans(objetosdopresenteestudo),alémdeoutras

espéciesdeSiluriformes, comonasfamíliasClariidaeeClaroteidae (cf. Vandewalle et

al.,1997,1999; Adriaens&Verraes,1997e).A regrageralpara estepadrãolarvaléa

eclosão com quantidade de vitelomuito reduzida, levando a reduzir drasticamente o

tempo necessário para atividades de alimentação exógena, o que, por conseguinte,

exigequedeterminadasestruturastenhamsidopreviamenteformadas.

Noentanto,exceçõesaestasregrasacontecem,comonocasodeAncistruscf.

triradiatus, estudado por Geerinckx et al. (2005). Esta espécie apresenta um curto

período pré‐eclosão, porém a larva recém‐eclodida possui estruturas cartilaginosas

cranianasbemdesenvolvidas.

Outra exceção, desta vez contrária ao padrão encontrado em Ancistrus cf.

triradiatus,ocorrenaslarvasdaespécieemestudo,Lophiosilurusalexandri.Apesarde

serem reportadas como as maiores em tamanho e com longo tempo de eclosão no

estudodeSatoetal.(2003),foiverificadoqueestaseclodemsemnenhumaestrutura

cartilaginosa aparente, mesmo em níveis histológicos (vide Fig. 40). Isso resulta em

larvasincapazesdemovimentação.



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

131

Condrocrânio

Arcopré‐mandibular

Em Prochilodus, o palatino surge na extremidade anterior do processo

pterigoidedaporçãodorsaldopalato‐quadrado(e.g.Fig.9).Esteéopadrãoprimitivo

de surgimento desta estrutura, sendo amplamente encontrado nos grupos basais

comoCypriniformes(cf.Pashine&Marathe,1977;Vandewalleetal.,1992;Cubbage&

Mabee, 1996; Engeman et al., 2009). O surgimento do palatino, do arco pré‐

mandibular, independente do processo pterigoide do pterigoquadrado (arco

mandibular), como elemento distinto, é considerado como caráter sinapomórfico de

Siluriformes(cf.Fink&Fink,1981;Arratia&Schultze,1990;Arratia,1992;Vandewalle

et al., 1999). Esta disjunção propiciou o desenvolvimento do mecanismo palatino‐

maxilar, altamente especializado para a movimentação dos barbilhões maxilares (cf.

Alexander,1965;Gosline,1975).EsteéocasoencontradoemLophiosilurusalexandrie

Pseudoplatystomacoruscans,nasquaisospalatinossemantêmisoladosesearticulam

com a pré‐maxila, maxila e o etmoide lateral (e.g. Figs. 30, 38, 43, 61).

Excepcionalmente,fusõessecundáriasentreopalatinoe opterigoquadrado(processo

pterigoide) estão presentes em Ariidae: Galeichthys [=Arius] felis (Bamford, 1947) e

Arius(Srinivasachar,1958),podendosetratardeumanovasinapomorfiadestafamília.

Vale ressaltarque,conformeobservado por Adriaens & Verraes(1997),Srinivasacha

r

(1956a;1956b;1958;1959a;1959b)serefereaopalatinocomo“processopterigoide”

(pterygoid process), o qual, o mesmo autor distingue do processo pterigoide real do

pterigoquadrado (processus pterygoideus). O palatino, considerado homólogo ao

elementoepi‐pré‐mandibular(primeiramentepropostoporAllis,1923aeaceito,entre

outros,porDaget,1964)se articulacomalaminaorb

ito‐nasalis,peloprocessoetmo‐

palatino (Srinivasachar, 1958). Adriaens & Verraes (1997e) fazem correspondência

destaarticulaçãocom aarticulaçãoetmo‐palatinadosdemaisteleósteos. Osmesmos

autores concordam que  o isolamento do palatino em siluriformes, como uma

separaçãosecundáriaentreosarcospré‐mandibularemandibular,poderiasuportara

hipótese de que o palatino seria realmente derivado do arco pré‐mandibular. Esta

abordagem aparentemente é correta, mas é necessária uma análise comparada mais

extensa incluindo outros grupos de Actinopterygii e Chondrichthyes. A priori as



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

132

posições dos vasos sanguíneos serviriam como um forte marcador para estas

homologias na tentativa de elucidação deste debate (vide Allis, 1897; 1903; 1915;

1917;1918;1919;1923a;1923b).

O surgimento de uma cartilagem arredondada, ventralmente à extremidade

anterior da cartilagem do autopalatino em Lophiosilurus alexandri (ca. 11,7 mm CP,

8ºd), chamada de cartilagem submaxilar (Fig. 51A) é descrita por Vandewalle et al.

(1993) e Adriaens & Verraes (1997e) como sendo uma nova estrutura (ao menos na

espéci

e por eles estudada) do mecanismo palatino‐maxilar,  que facilita a articulação

entre o palatino e o maxilar, suportando um maior estresse mecânico. No entanto,

esta estrutur

a, supostamente sinapomórfica de Siluriformes, não foi encontrada em

Pseudoplatystoma coruscans, assim como também não foi encontrado nenhum

registro desta estrutura na literatura examinada, exceto em Sibbing (1982), que

menciona e ilustra este elemento, em Cyprinus carpio, articulando‐se com a região

anteriordocrânio,palatinoemaxila.Todavia, essacartilagemnãoécitadanotrabalho

de Pashine  & Marathe (1977) sobre a ontogenia desta mesma espécie. Ao mesmo

tempo, este elemento é consistente em vários indivíduos de vários estágios (em 

Lophiosiluris e Clarias) deixando dúvida quanto à sua generalidade em Siluriformes e

mesmoemOtophyisi,assimcomosuarealfunção.Estacartilagemnãofoiencontrada

emnenhumexemplardeProchilodusouPseudoplatystoma.

Arcomandibular

EmProchilodusargenteusascartilagensdeMeckelsurgememposiçãoanterior

ao cilindro cartilaginoso ventral do palato‐quadrado. São curvadas medialmente,

porém não se fundem. A porção posterior desta cartilagem somente completa seu

desenvolvimentoconformearegiãoanteriordacartilagempalato‐quadradotambémo

faz,proporcionandoaarticulaçãoentreeles.Estepadrão,consideradoprimitivoparaa

formaçãodacartilagemdeMeckel,tambéméencontradoemCypriniformes(Cyprinus

carpio – Pashine & Marathe, 1977; Barbus barbus – Vandewalle et al., 1992; Danio

rerio – Cubbage & Mabee, 1996; Catostomus – Engeman et al., 2009). Fora de

Ostariophysi também foi reportado em Salmo fario  (de Beer, 1927) e Salmo letnica



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

133

(Ristovska et al., 2006) e em grupos basais de Actinopterygii como Acipenser (Jollie,

1980),Polypterus(Jollie,1984c)eAmia(Jollie,1984b).

Em Pseudoplatystoma coruscans e em Lophiosilurus alexandri, por outro lado,

as cartilagens de Meckel surgem já conectadas entre si, medialmente (e.g. Figs. 30,

42).Permanecemconectadasatéestágiostardiosdodesenvolvimento,mesmoapóso

processo de ossificação. A conexão cartilaginosa mediana desaparece tardiamente,

porém auniãoentreas duasmetadesé mantida por um tecidoconectivo.Esteé,na

maioria dos Siluriformes, o padrão geral, encontrado em Ariidae (Arius jella),

Plotosidae (Plotosus canius), Ictaluridae (Ameiurus nebulosus), Claroteidae

(Chrysichthysauratus)eClariidae(Clariasgariepinus)(cf.Kindred,1919;Srinivasachar,

1958;Adriaens&Verraes,1997e;Vandewalleetal.,1999).Nasúltimasduasespécies,

esta cartilagem também se funde, posteriormente, com a placa hiosimplética ‐

pterigoquadrada. Esta fusão pode ser considerada uma apomorfia, mas o grau de

generalidade deve ser investigado mais profundamente em diversos grupos. Este

padrão geral também pode ser encontrado em Ariidae (Ariopsis felis), Schilbeidae

(Silonia silondia), Pangasiidae (Pangasius pangasius), Bagridae (Mystus vittatus, Rita

sp.), Callichthyidae (Callichthys callichthys) e Heteropneustidae (Heteropneustes

longifilis) (cf. Bamford, 1947; Srinivasachar, 1956a; 1956b; Hoedeman, 1960b;

Vandewalle et al., 1997). Nestas espécies as cartilagens de Meckel nunca se fundem

posteriormente com a placa hiosimplética. Uma condição ainda diferente destas é

encontrada em Ancistrus cf. triradiatus, no qual as cartilagens de Meckel surgem

independentemente,sefundem  medianamentee,durante  oprocessodeossificação,

se separam (Geerinck

x et al., 2005). Fora isso, os cascudos apresentam ainda as

cartilagens de Meckel apontadas medialmente, ao invés de  rostralmente, como a

maioria dos bagres. Geerinckx et al. (2005) postula que tais modificações são

necessáriasparaafuncionalidade dosmecanismosderaspageme de ventosa.Talvez

estasériedetransformaçãosejaúnic

adestaespécie[ouatémesmodeLoricariidae+

Astroblepidae, devido ao formato da boca em forma de ventosa]. Apesar da

proximidadeevolutiva,asituaçãoemCallichthydaeseassemelhamaisaopadrãogeral

dos Siluriformes, com ambas as cartilagens de Meckel apontando rostralmente, em

estágiosiniciaisdodesenvolvimento(Huysentruyt,2008).Afusãomedialdacartilagem



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

134

deMeckeléclaramenteumpadrãoderivado,porém,apesardeocorrernamaioriadas

espécies de Siluriformes, não é consistente nesta ordem. Homoplasticamente,

também ocorre em grupos derivados de Teleostei como Pleuronectiformes (Berril,

1925),Anabantidae(Marathe&Bal,1957)ePercomorpha(Mabee&Trendler,1996).

O desenvolvimento do suspensório em Prochilodus remonta a condição basal

desteselementos,sendoformado,demodogeral,porestruturasindependentes(não

fundidas entresi)–i.e.cartilagempalato‐quadradoehiosimplética (Fig.7).Opalato‐

quadrado surge com um bastão ligeiramente curvado dorsalmente, representando a

porção ventral do futuro osso quadrado. Em seguida, a porção dorsal se desenvolve,

definindo a fenestra pterigoide, assim como o processo pterigoide que se estende

anteriormente (Fig. 8). Toda esta estrutura se mantém íntegra, não segmentada,

mesmo em estágios mais avançados do desenvolvimento. A segmentação, quando

acontece, separa a porção mais anterior do processo pterigoide, onde se formará o

autopalatino.

EmSiluriformes,odesenvolvimentoinicialdosuspensórioapresentamudanças

marcantes em comparação aos demais teleósteos, com fusões(pelomenosparciais),

i.e.,hiosimpléticocomoquadrado, sendosinapomórficasparaaordem(Arratia,1990)

(e.g. Fig. 30). Arratia (1990) sugere que a perda do osso simplético nos bagres possa

serexplicadapelaconexãocartilaginosaentre

ohiosimpléticoeopterigoquadradoem

estágios iniciais do desenvolvimento. Isso resulta no surgimento de uma única placa

que pode, até mesmo, estar fundida com a cartilagem de Meckel. De fato, não foi

verificadonopresenteestudonenhumsinal,mesmoemnívelhistológico,daformação

de qualquer estrutura óssea na suposta posição onde de

veria ser formado o osso

simplético.Emalguns casos,comoem Galeichthys[=Arius]felis (Ariidae)estasfusões

sãotardias,comaplacahiosimpléticaea cartilagempalato‐quadradasurgindo como

elementos separados (Bamford, 1947) Mesmo neste caso, não há indicação de

formação autógena do elemento simplético. Em alguns outros Siluriformes, há uma

tendência defusõesadicionais entre aplacahiosimplética‐pterigoquadradae ointer‐

hial, como nas espécies de bagres aqui estudadas Lophiosilurus alexandri e

Pseudoplatystoma coruscans, Ictaluridae (Kindred, 1919; Arratia, 1992), Schilbeidae,

Pagasiidae (Srinivasachar, 1956a), Heteropneutidae (Srinivasachar, 1959a),



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

135

Callichthyidae(Hoedeman,1960b;Howes&Teugels,1989),Trichomycteridae(Arratia,

1990). Em outras espécies estas fusões se estendem ao neurocrânio, como, por

exemplo, em Callichthyidae (Hoedeman, 1960b;  Howes & Teugels,  1989),

Trichomycteridae (Arratia, 1990) e Clariidae (Adriaens & Verraes, 1997e). Em alguns

siluriformes o inter‐hial é contínuo com a cartilagem do arco hioide (no nível do

cerato‐hialposterior),comoéocaso de L. alexandrieP.coruscans,enquanto outros

apresentamumaarticulaçãonestaposição.Uminter‐hial,inicialmentefundidocomo

hiosimplético também já foi reportadoem outros Ostariophysi, como Chanos chanos

(Gonorynchiformes, Chanidae) (Arratia, 1990) e Hepsetus odoe (Characiformes,

Hepsetidae) (Bertmar, 1959). Claramente esta fusão ocorre homoplasticamente em

diversosgrupos.

Arcohioide

Aporçãosimplética(parssymplectica)daplacahiosimpléticasurgejuntamente

com a porção mais dorsal a da referida placa. Postula‐se que este elemento

cartilaginoso tenha sido primariamente independente, sendo um elemento médio

hipertrofiadodoarcomandibular(Allis,1918).Engemanetal.(2009)reportaaporção

simplética surgindo pouco antes da porção dor sal em Catostomus. Talvez esta seja a

realsequênciadeformação,masoprocessoéextremamenterápido,cujaobservação

dependedacoletadeumexemplarqueestejanessecurtointervalodetempo,oqueé

uma tarefa pouco provável. Nas séries analisadas, não foi possível a observação do

surgimento independente deste elemento. Mesmo em Catostomus, este elemento é

rapidamente fundido com a  porção hiomandibular (dorsal) desta placa. O processo

opercular se forma como uma extensão posterior na borda póstero‐dorsal da placa

hiosimplética.Aplacahiosimpléticanuncasesegmenta,mesmoemestágiostardiosdo

desenvolvimento. Conforme progridem as ossificações dos centros, esta placa se

degenera restando, relictualmente,cartilagemapenasnasáreas articulares dosossos

formados (i.e. quadrado, hiomandibular e metapterigoide) chamadas, às vezes, de

cartilagem simplética (cf. Teugels et al., 1991; Schilling et al., 1996). Este é

sabidamente um padrão primitivo, encontrado até mesmo em Amia (obs. pess.;

Grande&Bemis,1998).



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

136

Nas espécies analisadas no presente estudo (Prochilodus, Pseudoplatystoma e

Lophiosilurus),oforâmenparaoramohiomandibulardonervofacialestápresenteno

centro da placa cartilaginosa hiosimplética (ou hiosimplética–pterigoquadrada, nos

Siluriformes)desdeseusurgimento.Esteéocasogeralduranteacondrogênesedeste

elemento em peixes, embora várias espécies apresentem variações, nas quais este

ramo podeestarpresente anteriormenteàplaca hiosimplética,sendoenglobadopor

estaplacacartilaginosa,conforme estaaumentadetamanhoduranteaontogenia(cf.

Kindred, 1919; Srinivasachar, 1956a; Adriaens & Verraes, 1997e). Bamford (1947)

descreve que inicialmente, em Galeichthys [=Arius] felis (Ariidae), este nervo passa

posteriormente àquela placa cartilaginosa, mas que também é englobado durante a

sequênciadeeventosontogenéticosquelevamaoaumentodaplaca.

A barracartilaginosadoarcohioide(oucartilagemcerato‐hialsensu Engeman

etal.,2009)éumadasprimeirasa sedesenvolverentreosarcosfaringianos.Surgeno

eixo transversal, aproximadamente na altura da extremidade anterior da notocorda,

crescendo internamente (ântero‐medialmente) e externamente (póstero‐

lateralmente). As extremidades mediais não se fundem. No entanto, podem surgir,

secundariamente,extensõescartilaginosasunindo‐as.Estasextensõessãoclaramente

um tecido cartilaginoso distinto do tecido que forma as barras propriamente ditas,

possuindo células menores, mais numerosas e com menos matriz extracelular. Tanto

nos Characiformes quanto nos Siluriformes, asbarrashioide surgem bem delicadas e

seespessamrapidamente,setornandoaestruturamaisevidente(bemdesenvolvida)

na cesta branquial. Possuem uma grande quantidade de matriz extracelular, mesmo

quandocomparadasàsbarrascartilaginosasdosceratobranquiais.

Nas espécies analisadas, a extremidade medial da barra  hioide (região dos

cerato‐hiais)écontínuacomacartilagemformadoradoshipiaise,emváriasespécies,

são contínuos também com o inter‐hial, como no caso de Lophiosuilurus alexandri e

Pseudoplatystoma coruscans (e.g. Figs. 30 e 42). Vandewalle et al. (2005) ilustram as

cartilagens mediais, formadoras dos hipiais como estruturas distintas do arco

branquial. No entanto, esta condição não foi verificada em nenhum exemplar

observadoenemmesmoemdadosdeliteratura.



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

137

Emalgumasespécies,comoemAriusjella(Ariidae),estudadaporSrinivasachar

(1959b),éreportadaapresençadeumforâmennoshipiaisparaapassagemdaarteria

mandibularis. Todavia, nas espécies analisadas, a extremidade mediana na barra

hioide (regiãodoshipiais)nãoapresenta nenhum sulco ou forâmenparaapassagem

doreferidovaso.

Nas espécies de Siluriformes analisadas, a morfologia da barra hioide se

assemelha àquela descrita por Adriaens & Verraes (1997) de Clarias gariepinus. As 

regiões medianas das barras (hipiais), nos estágios iniciais, estão fundidas entre si,

assim como com a extremidade anterior da cartilagem mediana da cesta branquial

(cópulaanterior).Duranteodesenvolvimentoontogenético,aconexãoentreoshipiais

desaparece primeiro que a conexão da cópula anterior com a barra hioide. Esta

sequência é oposta àquela reportada de Clarias gariepinus por Adriaens & Verraes

(1997) e de Plotosus canius por Srinivasachar (1959b), nos quais primeiro há a

separação da cópula anterior e depois a separação entre os hipiais. Na realidade,

mesmoemestágiosmaisavançadosnodesenvolvimento(exemplaresjuvenis)aindaé

possívelevidenciara ligaçãocartilaginosaentrea cópula anterior comabarra hioide,

ainda que muito sutil. Não está clara a consequência morfológica desta ligação, nem

mesmoseelaépersistenteemindivíduosadultos.Comonaliteraturanãohánadaque

serefiraaestaestrutura,pode‐sesubentenderqueouelarealmenteestáausenteem

todas as espécies estudadas, ou que esteja presente, mas não foi devidamente 

documentada, uma vez que, em estágios tardios do desenvolvimento, é muito sutil,

corandopoucocomAzuldeAlcian.EmProchilodus(representantedeCharaciformes),

amorfologiaémuitosimilaràdescritaacima,excetopelofatodacópulaanteriorestar

totalmentelivredoarcohioidepropriamentedito.

Arcosbranquiais

Elementosmedianosdosarcosbranquiais

Os elementos ímpares medianos da cesta branquial merecem alguns 

comentários. Mesmo o primeiro elemento desta série aparece após todos os 

elementos pares ventrais dos arcos branquiais (cartilagens do arco hioide e

ceratobranquiais) terem surgido. Este padrão é amplamente é conservado em peixes 



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

138

(e.g.Engemanetal.,2009),efoiobservadonasespéciesestudadas.Nosgruposbasais,

aqui ilustrado por Prochilodus, a sequência de aparecimento é a seguinte: surge

primeiro a cópula anterior, seguida da cópula posterior e, em seguida, aparece a 

cartilagemmaisanterior, a do basi‐hial. Em Catostomus(Cypriniformes),a cartilagem

basi‐hial se origina fundida à cartilagem da cópula anterior, se segmentando em

seguida (cf. Engeman et al., 2009). No entanto, este padrão não é consistente com

outros dados da literatura sobre o desenvolvimento de espécies desta ordem (cf.

Cubbage & Mabee, 1996), cujo padrão de desenvolvimento se assemelha ao

encontradoemProchilodus.Apesardisso,éclaraaligaçãodacartilagembasi‐hialcom

aextremidadeanteriordacópulaanterior(videfig.19B),masotecidodestaconexão

nãoécaracterizadocomocartilagem.EmProchilodus,espécieanalisadaqueapresenta

a cartilagem basi‐hial, este elemento possui um formato característico, com sua

extremidade anterior expandida lateralmente, conferindo um formato de “T”. Esta

morfologia é considerada sinapomórfica da família Prochilodontidae (Vari, 1983;

Castro&Vari,2004).

Após o surgimento da cartilagem basi‐hial, surge uma barra cartilaginosa

posterior à cópula posterior, se estendendo por entre os ceratobranquiais V

(cartilagem pós‐ceratobranquial) (e.g. Fig. 12). Esta cartilagem se desenvolve

anteriormente,seestendendoventralmentesobacópulaposterioràqualsefundeem

seguida.Estepadrãoaparentementepodeserconsideradocomoprimitivo,aomenos

emOstariophysi,umavezqueestápresenteapartirdeCypriniformes(Engemanetal.,

2009)atéSiluriformes(aindaquereduzida).Naliteraturanãoécomumsuamençãoou

ilustração, provavelmente porque, nos estágios mais avançados de desenvolvimento,

esta estrutura, apesar de persistir com a mesma morfologia e relações topográficas,

apresenta pequena quantidade de matriz extracelular, ocasionando uma coloração

muitotênue(muitasvezesnãocorada).

Nos Siluriformes não há a cartilagem ímpar anterior ao arco hioide.

Srinivasachar(1959b)postulaqueacópula anterior (=cartilagembranquialmediana)

poderia ser o resultado da fusão do basi‐hial e do primeiro basibranquial. Todavia, a

posição do basi‐hial seria anterior aos hipiais e não posterior a eles, que é a posição

ocupada pela cópula anterior (Nelson, 1969). Esta posição anterior do basi‐hial,



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

139

mesmo em estágios iniciais do desenvolvimento, é claramente observada em

Prochilodusedemaispeixesbasais,comoCypriniformes(Engemanetal.,2009).Logo,

éamplamenteaceitoqueacópulaanteriorcorrespondesomenteàsériebasibranquial

e que o basi‐hial está ausente nos siluriformes (Arratia & Schultze,  1990). A cópula

anterior não se segmenta durante do desenvolvimento. O postulado acima foi

totalmentecorroboradopelosresultadosdopresenteestudo.

Nos peixes basais, a cópula posterior se segmenta durante os estágios iniciais

do desenvolvimento, isolando as porções cartilaginosas que originarão os

basibranquiaisIVeV(cf.Engemanetal.,2009).IssonãofoiverificadoemProchilodus

enosSiluriformesanalisados. Tambémnãoforam encontrados registrosnaliteratura

de que tal fato ocorresse nestes grupos. Em ambos os grupos a cópula posterior se

mantém contínua mesmo em adultos. Analisando a posição desta estrutura em

relação,principalmenteaosceratobranquiaisIVeV,pode‐sedizerqueahipótesemais

provável é que o quinto basibranquial não esteja ausente nestes grupos, como

comumente reportado (e.g. Chen & Lundberg, 1995; Bockmann & Sazima, 2004;

Ribeiro et al., 2004; Ortega‐Lara & Lehmann A., 2006; Paixão & Toledo‐Piza, 2009) e

simfundidoaoquartobasibranquialformandoacópulaposterior.

Nos Siluriformes não há qualquer evidência, mesmo na extensa literatura

descritiva do grupo, de que exista uma cartilagem pós‐ceratobranquial. No entanto,

existe uma haste cartilaginosa associada à cópula posterior que tem levado a várias

discussões. Trata‐se de uma “barra cartilaginosa” ventralmente fundida ao terço

posterior da cópula posterior. Em vis

ta dorsal, esta haste aparenta estar “envolvida”

pela cópula posterior. Alguns autores consideram esta estrutura como o terceiro

basibranquial(e.g.Buitrago‐Suárez&Burr,2007).Estainterpretaçãoécondizentecom

asdemais,umavezqueaconsideramcomooelementobasibranquialmaisposterior.

No entanto, há um equívoco quanto à  homologia, pois estes mesmos autores,



nomeiam o basibranquial mais anterior como basibranquial I, quando, na realidade,

seria homólogo ao basibranquial II. Esta estrutura presente em alguns bagres á

considerada, diante dos resultados ontogenéticos aqui apresentados (que  mostram  a 

surgimentotardiodestaestruturanafaceventraldacópulaposterior),comosendoo

resquício (anterior) da cartilagem pós‐ceratobranquial presente nos grupos mais



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

140

basais. Mesmo em nível histológico, a sua fusão com a cópula posterior é clara, não

apresentando nenhum  tecido diferente de cartilagem (Fig. 62). Esta hipótese se

sustenta no fato de que nas espécies que a possuem, como Prochilodus, a região

anterior da cartilagem pós‐ceratobranquial está localizada ventralmente à cópula

posterior, se fundindo a ela. Nos Siluriformes, a posição é exatamente a mesma,

inclusivecomrelação àsextremidadesmediais dosceratobranquiaisIV eV.Quantoà

homologia seriada da cartilagem pós‐ceratobranquial, seja em grupos onde se

apresente individualizada, seja em Siluriformes, é provável que se trate de um

basibranquial “supranumerário” (ou basibranquial 6), uma vez que mesmo em

Cypriniformes,quepossuemoscincobasibranquiais,estacartilagemestápresente.

Elementospareadosdosarcosbranquiais

Primitivamente, os peixes mandibulados possuem  cinco arcos branquiais, os

quais são derivados do terceiro ao sétimo arcos viscerais (cf. Liem et al., 2001). Os

primeiro quatro arcos se situam na base das brânquias. O último arco se situa na

cavidade faringiana podendo ser muito reduzido. Normalmente estes arcos são

compostosporumasériedebastõescartilaginosos.Daregiãoventralàdorsal,existem

os basibranquiais (ímpares), hipobranquiais, ceratobranquiais, epibranquiais e

faringobranquiais (cf. Nelson, 1969; Jollie, 1973, 1986; Reilly & Lauder, 1988; Janvier,

1996, Liem et al., 2001). Os basibranquiais dos arcos adjacentes frequentemente se

fundem. As cartilagens ceratobranquiais são serialmente homólogas à cartilagem de

Meckeleàcartilagemhioideeascartilagensepibranquiaissãoserialmentehomólogas

aopalato‐quadradoeàhiomandibular(Liemetal.,2001).

Conforme descrito na literatura (e.g. Adriaens & Verraes, 1997e), o padrão

geraldedesenvolvimentodosarcosbranquiaissedánosentidoântero‐posterior.Cada

arco inicia a sequência de  condrificação com os ceratobranquiais, seguido pelos

hipobranquiais e, eventualmente, pelos epibranquiais e faringobranquiais (cf.

Srinivasachar,1959a;Vandewalleet al.,1997;Engemanetal.,2009).Este padrão,ao

menoscom  relaçãoaos elementosventraisdosarcosbranquiaisse aplicaàs espécies

estudadas (Prochilodus argenteus, Pseudoplatystoma coruscans e Lophiosilurus

alexandri). Nestas mesmas espécies, as cartilagens dos epibranquiais surgem

praticamentetodasaomesmotempo.



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

141

A cartilagem dos epibranquiais mais anteriores I a IV são todas virtualmente

idênticas entre si, com aspecto de bastão (e.g. Figs. 7 e 30), mantendo suas formas

durante todo o desenvolvimento até começarem os processos de degeneração

causados pelas atividades de ossificação. A cartilagem do ceratobranquial V, por sua

vez, é sutilmente diferente logo que se forma, sendo ligeiramente curvada

posteriormente. Durante seu desenvolvimento, sua região anterior se alarga,

conferindo um formato de “clava” e sua região média se expande posteriormente e

medialmente,quasetocandoacartilagemcontralateral.

A formação das cartilagens dos hipobranquiais é sutilmente diferente em

Prochilodus (Characiformes) e em Pseudoplatystoma e Lophiosilurus (Siluriformes). O

padrão encontrado em Prochilodus reflete aquele considerado primitivo – ao menos

paraaformaçãodoshipobranquiaismaisanteriores(IaIII)–tambémencontradoem 

Cypriniformes(cf.Engemanetal.,2009).Neste,ascartilagensdoshipobranquiaisIaIII

surgem conectadas às extremidades mediais das respectivas cartilagens

ceratobranquiaisecoma cópula anterior, segmentando‐se emseguida.Apesardesta

fusão, a região dos hipobranquiais propriamente ditos apresenta claramente mais

matriz extracelular, consequentemente corando mais intensamente que suas

extremidadesfundidasaoselementoscitados(e.g.Figs.7A;9A,B).EmSiluriformes,os

hipobranquiais dos três primeiros arcos branquiais se separam dos ceratobranquiais

durante a ontogenia (e.g. Adriaens & Verraes, 1997e; Srinivasachar, 1959b;

Vandewalle et al., 1997). Na maioria dos bagres,os hipobranquiais I e II se articulam

comamargemlateraldacópulaanterior,enquantooterceirosesituaentreacópula

anterior e aposterior (e.g. Fig. 33A). Ocasionalmente, ambos os hipobranquiais III

 se

fundem medianamente (e.g. Pangasius pangasius, Plotosus canius – Srinivasachar,

1957a,1958a),ouaindapermanecemfundidoscomosceratobranquiais(e.g.Ancistrus

cf. triradiatus – Geerinckx et al., 2005). Em Pseudoplatystoma coruscans e

Lophiosilurusalexandri,nosestágiosiniciais,oshipobranquiaisIIIestãofundidoscoma

cópulapost

erior,formandouma massacartilaginosaúnica(Figs.31A; 43B,C).Durante

seudesenvolvimento,ascartilagensdoshipobranquiaisIIIsesegmentametornam‐se

isoladas(Figs.35A,46D).



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

142

Já o hipobranquial IV, nunca foi observado como um elemento separado em

Cypriniformes,CharaciformeseSiluriformesadultos,detalmaneiraqueesseelemento

éconsideradoperdidonestesgrupos(cf.Bockmann&Miquelarena,2008;Schaefer&

Fernández, 2009). Porém, estudando a ontogenia é possível supor um cenário para

este elemento. Alguns autores (cf. Lundberg & McDade, 1986; Adriaens & Verraes,

1997e)supõemquea diferenciaçãodaextremidademedialdo ceratobranquialIV(se

“curvando” anteriormente) e a ausência de ossificação nesta região, sugerem que o

quarto hipobranquial esteja presente, porém fundido com a extremidade medial

cartilaginosa do quarto ceratobranquial. Esta condição é, de fato, encontrada nos

Siluriformes.Todavia,mesmoemestágiosiniciaisdodesenvolvimentonãoseobserva

nenhum sinal de possíveis segmentações entre estas duas estruturas (e.g. Fig. 36).

Analisandogruposmaisbasais,comoProchiloduseCatostomus(Engemanetal.,2009),

começa a ficar clara a sequência de acontecimentos. Nestes grupos, nos estágios

iniciais, é possível definir  uma região de coloração pálida na cartilagem medial do

ceratobranquialIV(Figs12Ae14A).Talfatoéumaforteevidênciadequeaseparação

destaestruturafoi“truncada”.EmCypriniformesesta“separação”podeserobservada

duranteumlongoperíodonosestágiosiniciaisdedesenvolvimento(cf.Engemanetal.,

2009).EmCharaciformes,a“janela”paraestaobservaçãoémaiscurta.Emseguidao

suposto hipobranquial IV se funde definitivamente à extremidade medial do

ceratobranquial IV. Em Siluriformes não se observa a  situação descrita acima em

nenhum estágio, possivelmente correspondendo a um estágio derivado terminal na

sériedetransformaçãoiniciadaemCypriniformes.Adicionalmente,quandoanalisadaa

extremidad

e anterior dos hipobranquiais I e II verifica‐se que possu em um padrão

conservado de ligamentos. Existem sempre dois ligamentos, um mais medial e outro

mais lateral, que se inserem praticamente no mesmo ponto na região anterior das

cartilagens dos hipobranquiais (Fig. 19A). O ligamento medial conecta‐se na borda

posterior do hipobranquial mais anterior e o ligamento lat

eral, à borda posterior da

cartilagem medial do ceratobranquial anterior. No caso do primeiro hipobranquial

estesligamentosseconectamnacartilagemdoarcohioide, naregiãodohipialdorsal.

Este padrãoé claramenteobservadonaextremidade anteriorda cartilagem distal do

ceratobranquial IV, fortalecendo a hipótese de que esta região seja, na realidade, o

hipobranquialIVnãodiferenciado(Fig.19A).Entende‐seentão,queohipobranquialIV



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

143

está realmente presente, porém fundido à cartilagem medial do ceratobranquial IV

nuncaseossificando.

Os epibranquiais são os principais elementos dorsais dos arcos branquiais. As

extremidadesventro‐lateraisdosepibranquiaissearticulamcomosceratobranquiaise

as extremidades dorso‐mediais, com os faringobranquiais. Os epibranquiais podem

suportarplacasdentígerasfaringianasouváriaslâminasparainserçãodemusculatur

a.

Osepibranquiaistambémdesenvolvemváriosprocessosparainserçãodemusculatura

dorsaldosarcosbranquiais(cf.Springer&Johnson,2004).

Os quatro primeiros elementos epibranquiais estão sempre presentes nos

Actinopterygii. O desenvolvimento deste epibranquiais não apresenta grandes

variaçõesemOtophysi.Estas cartilagenssurgemsimultaneamente, sedesenvolvendo

na porção dorso‐lateral das extremidades dis

tais das cartilagens ceratobranquiais.

Possuem, ao menos nos estágios mais iniciais uma quantidade menor de matriz

extracelular, conferindo‐lhes uma coloração mais pálida. Geralmente, a extremidade

medial destes elementos é mais expandida que a extremidade lateral que se articula

com os respectivos ceratobranquiais. Esta situação é mais evidente no quarto

epibranquialquepossuiformade“clava”depoisqueoprocessodecondrificaçãoestá

concluído. Nos Characiformes, há a formação de processos uncinados, voltados

dorsalmenteemtodososelementosepibranquiais,masemSiluriformesosprocessos

uncinados ocorrem, em geral, somente no epibranquial III, podendo, menos

frequentemente, ocorrer no epibranquial IV. Estes processos uncinados fornecem

superfície para inserção de ligamentos/músculos que conectam a cesta branquial  à

basedoneurocrânio.

Oelemento,usualmentechamadode“epibranquialV”mereceumcomentário

especial, destacando sua homologia com a série epibranquial. Este  último arco

branquial é reduzido, perdendo os elementos dorsais (epibranquiais,

faringobranquiais), os quais nunca são encontrados (ossificados ou não) mesmo nos

peixes actinopterigianos mais basais, como Polypteriformes (cf. Wacker et al., 2001),

Acipenseriformes (cf. Grande & Bemis, 1991), e  Amiiformes (cf. Grande & Bemis,

1998).



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

144

Entretanto, um pequeno elemento cartilaginoso encontrado associado ao

quartoceratobranquiale/ouquartoepibranquialétradicionalmenteidentificadocomo

“quinto epibranquial”. Em Siluriformes, este elemento é normalmente nodular (cf.

Lundberg & McDade, 1986; Bockmann et al., 2004; Bockmann & Sazima, 2004). No

entanto, não é conhecido o seu nível de generalidade. Bockmann & Miquelarena

(2008),reconhecemquetalelementopodenãoserumverdadeiroepibranquial,sendo

supostoserumelementoneomórficonosbagres.

A ocorrência e interpretaçãodo chamado “quinto epibranquial” tem recebido

considerávelatenção(cf.Nelson,1967;Greenwood&Rosen,1971;Rosen,1974;Fink

& Fink, 1996; Johnson & Patterson, 1996, 1997; Springer & Johnson, 2004). Porém, 

ainda não está estabelecido se este elemento é de fato um epibranquial ( i.e.

serialmentehomólogoaosepibranquiaisIaIV)(Springer&Johnson,2004).

Independente deestaestruturaexistirounão grupos mais basais, epor quais

grupos ela é compartilhada, está claro que o chamado epibranquial V parece ser 

homólogo entre grupos (apomorficamente em algum nível). Adicionalmente, com os

dadosontogenéticosdopresenteestudo,nãooconsiderohomólogo(serialmente)aos

epibranquiaismaisanterioresouàquelesque ocorrememChondrichthyes. Poroutro

lado, presume‐se que seu padrão de desenvolvimento em outros grupos de

Actinopterygii,foradaquelesaquianalisados,sejaomesmo,podendo,estadiscussão,

ser aplicada a todos eles. Desse modo, adoto o nome de pseudoepibranquial V para

designar esta cartilagem associada à extremidade distal do ceratobranquial IV e

diferenciá‐ladoverdadeiroepibranquialVpresenteemChondrichthyes.

Os resultados mostram uma clara “disrupção” temporal referente ao

surgimento do pseudoepibranquial V. Este é um elemento de formação tardia. No

estágioemquepodeserobervado,acestabranquialjáestácompletamente formada,

com todos os elementos bem definidos,  estando a maioria – exceto os basi e

hipobranquiais–ossificados.Quandofinalmentesecondrifica,opseudoepibranquialV

está intimamente ligado à extremidade lateral do ceratobranquial IV (e não do

ceratobranquial V). Surge como uma peça delicada que não cora com azul de Alcian,



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

145

podendo ser visto somente quando se muda a incidência da luz no estéreo‐

microscópio.Seutamanhopodevariarnosdiferentesgrupos,masnuncaseossifica.

Nos cortes histológicos verifica‐se a íntima ligação da cartilagem lateral do

ceratobranquialIVcomoepibranquialIV(Figs.13e52).Podeserobservadoquecada

um deles, apesar de sua proximidade, possui uma camada própria de células

formadoras de cartilagem, os condroblastos, separados por uma camada de células

mesenquimais, que originarão os condroblastos. Conforme os condroblastos se

dividem e produzem matriz extracelular, as células ficam (aprisionadas) no interior

desta cartilagem, se diferenciando nas efetivas células formadoras de cartilagem, os

condrócitos. Obervando a cartilagem do pseudoepibranquial V, podemos ver que

existe umaíntima conexão com o ceratobranquial IV. Esta conexão é tão “forte” que

ambas as estruturas compartilham a mesma camada unicelular de condroblastos

(células achatadas) (Fig. 52). Portanto, os condrócitos do pseudoepibranquial V e do

ceratobranquialIVsãoambosderivadosdamesmacamada.

Uma comparação com os demais grupos de “peixes” faz‐se necessária para a

avaliaçãomaisprecisadanaturezadesteelementopseudoepibranquialV.

Nos condrictis, o quinto epibranquial é também um elemento modificado se

comparadoaosmaisanteriores.Todavia,nestegrupo,oaparecimentodesteelemento

segue a ordem do surgimento dos demais epibranquiais,  assim como se desenvolve

como uma peça cartilaginosa independente (cf. Hamdy, 1965; Gillis et al., 2009).

Baseadonisso,podemosdizerqueo quinto epibranquial de condrictis é,defato,um

epibranquialverdadeiro,serialmentehomólogoaosmaisanteriores.

Aparentemente, nos condrictis, o epibranquial V está relac

ionado com a

articulação da cesta branquial à cintura peitoral. Ao mesmo tempo, ele nunca é

encontrado como um elemento isolado, estando sempre fundido com o

faringobranquial V (ou faringobranquiais IV e V). Os padrões de fusão entre os

diferentes grupos de elasmobrânquios variam e foram compilados por Carvalho

(1996). Uma situação similar é encontrada nos peixes quimeroides (cf. Didier,

 1995).

Esta estrutura complexa é homóloga entre os Chondrichthyes (Holocephali +

Elasmobranchii),podendoserfacilmenteevidenciada pelasualocalização topográfica



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

146

einserçãodo músculo cucularisprofundus.(Didier,1995). Estemúsculo se originada

fascia dorsal da parte cranial da musculatura epaxial do corpo e se estende ventro‐

caudalmente para inserir no epibranquial do último arco branquial (ou na estrutura

complexanestaposição),assimcomonaporçãoescapulardacinturapeitoral(Liem &

Summers,1999).

Nos Actinopterygii parece que o quinto arco branquial está primitivamente

incompleto, perdendo o epibranquial V. Realmente, não há qualquer evidência de

nenhumaestruturaemseulugar,mesmonosgruposbasais: Polypteriformes(cf.Jollie,

1984c; Bartsch, 1997; Wacker et al., 2001) and Acipenseriformes (cf. Jollie, 1980;

Grande & Bemis, 1991; Findeis, 1997). Em Lepisosteus, representando

Lepisosteiformes,grupoirmãodeHalecostomi(Amia+Teleostei),oepibranquialVnão

foireportado(Jollie,1984a).

NosTeleosteiviventes,opseudoepibranquialVpodeserencontradoemvários

grupos não proximamente relacionados. Este elemento é sempre uma estrutura

cartilaginosa localizado na extremidade distal do ceratobranquial IV, como descrito

acima. A porção póstero‐dorsal dos arcos branquiais nos representantes das maiores

linhagens de Teleostei foi ilustrada por Nelson (1967). Suas figuras indicam que na

condiçãodosteleósteosprimitivos,oquartoepibranquiale pseudoepibranquialVsão

separados, sendo, este último, uma cartilagem reduzida articulada ao quarto

epibranquial e o quarto epibranquial um osso

 relativamente simples, com sua

extremidade medial expandida. O quarto epibranquial é, no entanto, um osso que

assume uma grande variedade de formas e sua relação com o quinto epibranquial é

característica de diversas linhagens (cf. Rosen, 1974). Frequentemente, as distintas

modificaçõessãoassociadascomodesenvolvimentodeestruturasparticulares,como

o órgão epibranquial, cuja função não está totalmente esclarecida, mas,

aparent

emente está relacionando com  a concentração de pequenas particular de

comida(cf.Nelson,1967;Menin&Mimura,1991;Bauchotetal.,1993).

Entre os euteleósteos o quarto epibranquial primitivamente possui várias

características: 1) póstero‐ventralmente, acima de sua articulação com o quarto

ceratobranquial,elesuportaoquintoepibranquial;2)ântero‐ventralmente,suportaa



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

147

quinta placadentígerasuperior,adentiçãoque,juntamente com aquelepresentena

placa do quarto faringobranquial forma a principal dentição suprafaringiana; 3) se

articula anteriormente diretamente com o quarto faringobranquial; 4) dorsalmente

formaumaelevaçãoouprocessoparainserçãodoquartomúsculolevatorexternoe5)

anterioraestaelevaçãonafacedorsal,háumprocessouncinadoquesuportaotecido

conectivo que o une ao processo uncinado do terceiro epibranquial. Logo, o quarto

epibranquialémecanicamenteconectadoaoterceiroviaprocessouncinadoeligadoá

base do crânio pelo quarto músculo levator externo e suporta a parte principal da

dentiçãosuprafaringiana(Rosen,1974).

Springer & Johnson (2004) descrevem o pseudoepibranquial V variando de

completamente autógeno a parcialmente fundido com a extremidade distal do

epibranquialIVou,nãofrequentemente,comaextremidad

edistaldoceratobranquial

IV.IstocorroboraaasserçãodeRosen(1974),deque,primitivamente(nosteleósteos

basais), ele colabora para formar um entalhe para a passagem da quinta artéria

branquialeferent

e.

A ocorrência do pseudoepibranquial nos grupos mais derivados de Teleostei,

conformedadosdaliteratura,segueabaixo:

NotrabalhodeGrande&Bemis(1998),analisandofilogeneticamenteafamília

Amiidae (Amiiformes),háumafigurados arcos branquiais de um indivíduo adulto de

Amia. Nesta figura está evidente que o limite posterior da cartilagem distal do

ceratobranquial IV é expandido posteriormente se comparado aos outros

ceratobranquial,incluindooceratobranquialV.Osautoresilustramosarcosbranquiais

de indivíduos mais jovens. Embora os arcos não estejam completamente

desenvolvidosnesteespécime,osceratobranquiaisjáestão.Analisandoaextremidade

distal do ceratobranquial IV percebe‐se que não há qualquer modificação, ou seja,

segueexatamenteomesmopadrãodeformadosdemaisceratobranquiais.Omesmo 

foi confirmado nos exemplares juvenis de Amia analisados no presente estudo.

Considerotalfatocomoumindicativodequeaexpansãoposteriordacartilagemdistal

doceratobranquialIVéumeventoqueacontecetardiamentenodesenvolvimentodos

arcosbranquiais.Logo,esteestado(expansãodacartilagemdistaldoceratobranquial



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

148

IV) poderia ser considerado como o precursor para o surgimento do

pseudoepibranquialVautógeno(Jollie,1984b).

Em Osteoglossomorpha, a condição é como se segue: Em Hiodon

(Hiodontiformes), Hilton (2002) não descreve qualquer sinal de um

pseudoepibranquial V.Acartilagemdistaldoceratobranquial IV é cônica.Entretanto,

noseugrupoirmão,Osteoglossiformes,oepibranquialVcartilaginosoébemevidente

nas ilustrações de Hilt

on (2003) de Heterotis e Pantodon e a descrição é de um

elementoquecontataoquartoarcobranquialnaporçãodistal,ondeoepibranquialIV

eoceratobranquialIVsearticulam.

Em Elopomorpha, Albula e Pterothrissus são descritos como possuindo um

epibranquialV.EmAlbula,oepibranquialVsefundeaoceratobranquialIV

(Springer& 

Johnson,2004).EstasespéciespertencemàordemAlbuliformes(Albulidae),umclado

basaldeElopomorpha(sensuWangetal.,2003).Nosgruposmaisderivados,aordem

Anguiliformes, que compreende quase 95% da diversidade taxonômica de

Elopomorpha, Nelson (1966) não menciona (no texto ou nas figuras) nenhum

elementocartilaginosonaposiçãodopseudoepibranquialV.Emalgunstrabalhosmais

recentes, estudando os arcos branquiais em espécies desta ordem, também não há

nenhumregistrodetalelemento(cf.Mehta&Wainwright,2008).

Em Clupeomorpha, Di Dario (2004) descreve o pseudoepibranquial V

cartilaginosocomopresenteemtodasasespéciesestudadas, incluindo Denticeps(cf.

Pinna & Di Dario, 2010). O elemento pode estar fundido ao epibranquial  IV tanto

dorsal como ventralmente. A completa fusão cria um entalhe para a passagem da

artéria eferente. Este entalhe também foi identificado por Nelson (1967) em alguns

Clupeomorpha.

Em Ostariophysi, o pseudoepibranquial V também está primitivamente

presente. Foi amplamente documentado na literatura de vários grupos. Na ordem

basal, Gonorynchiformes, o chamado “epibranquial V” é descrito e ilustrado por Taki

etal.(1987)noseuestudodedesenvolvimentodefunçõesnatatóriasealimentaresde

Chanos. Adicionalmente, de Chanos, existe uma ilustração muito clara na tese de

Thomas (2003) – que também é uma das poucas autoras que cita ‘epibranquial V’



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

149

entre aspas, claramenteduvidando da sua homologia com os demais epibranquiais –

naqualépossívelobservarsuaíntimarelaçãocomaarticulaçãodoceratobranquialIV

comooepibranquialIV.Entretanto,opseudoepibranquialVnãofoireportadoparaum

Kneriidae africano “miniatura” (Britz & Moritz, 2007). Em Otophysi, tal elemento

também está presente e relativamente bem documentado. Engeman et al. (2009)

descrevem o desenvolvimento dos arcos branquiais em Catostomus (Cypriniformes),

ondeodesenvolvimentodopseudoepibranquialVéricamentedocumentadonotexto

enasfiguras. Váriosoutrosartigostambém documentameste elementoem espécies

destaordem(cf.Siebert,1987;Conway&Mayden,2007;Conwayetal.,2008;Britz&

Conway, 2009). Em Characiformes, o chamado “epibranquial V” é documentado em

texto e  ilustrações de vários trabalhos (cf. Bertmar, 1959; Vari, 1989; Ribeiro et al.,

2004). Em Siluriformes, uma cartilagem nodular às extremidades distais do

ceratobranquialIV eepibranquialIVéreportadacomo“epibranquialV” (cf.Lundberg

& McDade, 1986; Bockmann et al., 2004; Bockmann & Sazima, 2004) ou ainda,

reconhecida como um elemento neomórfico da ordem (Boc kmann & Miquelarena,

2008). Pinna (1993) também reporta o chamado “epibranquial V” como sendo

ossificado em um indivíduo de grande porte de Helogenidae [tal situação não foi

observado em nenhum exemplar nem em qualquer outro artigo científico]. O autor

também descreve que em Siluriformes, o “remanescente” do epibranquial V

[=pseudoepibranquialV]estáprimitivamentepresentecomoumapequenacartilagem

arredondada.Emalgumaslinhagensdestaordem,esteelementofoiapomorficamente

perdido,comoemalgunsLoricariidaedasubfamíliaHypostomiae,Callichthyidae,entre

outros. Estas condições foram confirmadas por Britto (2003). Em Gymnotiformes, a

presençadopseudoepibranquialVéigualmenteverdadeira(cf.Campos‐da‐Paz,1997;

Santana,2002;Triques,2005;Hiltonetal.,2007b).

Euteleostei, grupo‐irmão de Ostarioclupeomorpha (Ostariophysi +

Clupeomorpha), compreende o grupo chamado “Protacanthopterygii” (sensu

Greenwoodetal.,1966)+Neoteleostei.Os“protacantopterigianos”sãochamadosde

“euteleósteos basais” (“lower euteleosts”) (sensu Johnson & Patterson, 1996) e as

hipótesesdeinter‐relaçõesnãosão consensuais (cf.Rosen&Patterson, 1969;Rosen,

1982; Fink & Weitzman, 1982; Lauder & Liem, 1983; Johnson & Patterson, 1996;



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

150

Ishiguro et al., 2003; Diogo et al., 2008). Os chamados euteleósteos basais

compreendem as ordens Argentiniformes, Osmeriformes, Salmoniformes e 

Esociformes (sensu Nelson, 2006). O pseudoepibranquial V está presente em muitas

espéciesnestegrupo,sendodescritoemváriosartigos(cf.Greenwood&Rosen,1971;

Rosen, 1974; Roberts,  1984; Stein & Bond, 1985; Begle, 1992; Johnson & Patterson,

1996;Sanford,2000;Springer&Johnson,2004).Entretanto,Jollie(1975)estudandoo

desenvolvimento de Esox, reporta “… in actinopterygians generally there is no

epibranchial V [=pseudoepibranquial V]”. Como geralmente  acontece em outros

gruposnãoproximamenterelacionados,opseudoepibranquialVpodeestarassociado

comaúltima artériabranquial  eferente,formando umentalhe.Logo,é deseesperar

queentretodososgruposestudados,opseudoepibranquialVpossaestarfundidocom

o epibranquial IV, circundando a referida artéria. Os padrões destas fusões variam e

sãoindependentesemcadagrupo(vejaJohnson&Patterson,1996).

O clado mais derivado de Teleostei (Euteleostei), os Neoteleostei – ou

Neoteleostei+Esociformes,sensuJohnson&Patterson(1996)–foidiagnosticadopor

Rosen (1973) como um grupo monofilético, incluindo  Stomiiformes, Aulopiformes,

Myctophiformes e Acanthomorpha, em ordem filogenética sucessiva (Stomiiformes

sendoomais basal).Asinter‐relaçõesentre estescladosfoilargamenteestudada (cf.

Stiassny, 1986; Rosen, 1985; Johnson, 1992). Esta discussão foge ao âmbito deste

trabalhoeseráaceita(como geralmenteé) ahipótesede Rosen(1973)paraasinter‐

relaçõesdeNeoteleostei.

Em Stomiiformes não fica clara a presença do pseudoepibranquial V

cartilaginoso.Estudos derevisãodestaordem(Fink,1985; Harold& Weitzman,1996)

não informa nem a presença nem a ausência deste elemento. Porém, em

Aulopiformes, a presença de um pseudoepibranquial V cartilaginoso expandido é

consideradaprimitiva,sendosecundariamentereduzidoouperdidoemalguns grupos

(Baldwin&Johnson,1996).

O clado dos ctenosquamados inclui os mictofiformes + acantomorfos. Este

último sendo o “crown group” com a maior radiação dos peixes viventes (Teleostei).

Com cerca de 300 famílias e mais de 14.000 espécies, compreendem a maioria dos



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

151

teleósteos viventes (Wiley et al., 2000). O pseudoepibranquial V cartilaginoso é tido

como ausente em todos os ctenosquamados (Baldwin & Johnson, 1996). Realmente,

nenhuma estrutura similar ao pseudoepibranquial V é comentado no texto ou em

figuras por Stiassny (1996) em seu estudo  sobe os ctenosquamados. Porém,

recentemente, um artigo publicado por Hilton et al. (2010) descreve e ilustra  uma

diminuta peça cartilaginosa localizada posteriormente à extremidade distal do

epibranquial IV, a qual é identificada como sendo uma “cartilagem acessória”, em

espécies de Carangidae (Perciformes). Percebe‐se, nos arcos branquiais onde os

elementos dorsais não  foram desarticulados dos ventrais, que esta cartilagem

acessóriaestáintimamenteconectadaàextremidadedistaldoceratobranquialIV.Não

há razãoaparente paranãoreconhecer a homologia desta estruturacomochamado

pseudoepibranquial V. Os autores podem ter escolhido esta nomenclatura, uma vez

que reconhecemqueonome“epibranquial V” nãosejaapropriado–comodiscutido

nopresenteestudo.Deste modo,estefato“derruba”oquefoipostuladoporStiassny

(1996).Umarevisãode maisgruposdesteclado deveserfeita,de modo averificara

presença do pseudoepibranquial V. Mesmo se verificando que entre os

ctenosquamados apenas Carangidae possui o pseudoepibranquial V, sua morfologia,

posição e associações são exatamente iguais àquelas dos demais teleósteos, de tal

maneira que é possível que o código genético que forma esta cartilagem tenha sido

“desligado”nosctenosquamadose“religado”nosCarangidae.

AnalisandohistologicamenteosurgimentodopseudoepibranquialV,juntocom

o desenvolvimento de cartilagens (vide apêndice), temos que os epibranquiais I a IV

surgem muito próximos aos ceratobranquiais, mas mesmo assim, apresentam uma

camada de células mesenquimais separando as cartilagens primordiais umas das

outras.Cadacartilagem(i.e.ceratobranquialIVeepibranquialIV)possuisuaprópriae

independente camada de condroblastos. O pseudoepibranquial V surge intimamente

conectado ao ceratobranquial IV. Entretanto, nesse caso, este elemento não possui

suaprópriacamadadecondroblastos.Aocontrário,elecompartilhaamesmacamada

de condroblastos do ceratobranquial  IV (Fig. 52). Isto significa que não existe um

desenvolvimento completamente autógeno. Outro aspecto importante  é que o

pseudoepibranquial V surge tardiamente no desenvolvimento, não respeitando a



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

152

sequênciadesurgimentodosceratoouepibranquiais.QuandoopseudoepibranquialV

podeserdetectado,acestabranquialestáquasetotalmenteformada,atémesmocom

oprocessodeossificaçãoadiantado.

DiantedoexpostoparaopseudoepibranquialV,conclui‐sequeesteelemento

possa estar relacionado (ao menos primitivamente) ao suporte para a quinta artéria

branquial eferente, como postulado por autores previamente citados. Além disso, a

interpretaçãodaocorrênciaedesenvolvimentodopseudoepibranquialVpresenteem

Actinopterygii indica que esta seja uma nova estrutura, não relacionada (não

homóloga)aoepibranquialVdosgnatostomadosprimitivosouserialmentehomóloga

aosepibranquiaisIaIV.Duasrazõesprincipaisparaestaconclusão:odesenvolvimento

tardio do pseudoepibranquial V é consistente em todo trabalho que reportatal fato;

surgimento compartilhando a camada de condroblastos do ceratobranquial IV.

Igualmente, pode‐se levantar a hipótese de que o pseudoepibranquial V seja um

elemento“filogeneticamentedestacado”doceratobranquialIV.

Apesardadifícilcomprovação,estimoquea morfologiaapresentadaem Amia

possa representar o estágio inicialparaoaparecimentodopseudoepibranquialVem

Teleostei. Isto é baseado na presença de  uma expansão distal do ceratobranquial IV,

queemboranãodestacada,diferedamorfologiadascartilagensterminaisdosdemais

ceratobranquiais. Também, a formação tardia da expansão posterior do

ceratobranqu

ial IV de Amia, após a cesta branquial já estar formada, é um indicador

adicionalquesetratedeumelementoneomórficoehomólogoaopseudoepibranquial

V.

Com essas interpretações é mais parcimonioso assumir que o

pseudoepibranquial V cartilaginoso (autógeno ou não) seja uma sinapormorfia de

Teleostei.Adem

ais, ospadrõesdefusão com o epibranquial IV ouceratobranquialIV

permanecemosmesmos,emváriosgruposnãorelacionados.Então,secundariamente

(e independentemente), este elemento foi perdido em vários grupos, supostamente 

emquasetodaalinhagemmaisderivadadeTeleostei,osctenosquamados.

Adicionalmente, ao contrário da afirmação de Jollie’s (1975) (“… in

actinopterygians generally there is no epibranchial  V [=pseudoepibranquial V]”), o



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

153

pseudoepibranquial V deve estar presente em muitas espécies. Esta observação

“subestimada”podeserdevidoao fato destaestruturasercartilaginosae,emalguns

grupos,reduzida,oufracamentecorada,mesmoemindivíduosmaiores.

Nos gnatostomados, os elementos ossificados (ou não), articulados

dorsalmente com os epibranquiais são os faringobranquiais. Nelson (1969) faz uma

padronização dos nomes aplicados a estes elementos. Reconhece os problemas de

homologia destas estruturas e, ainda, o fato de vários autores frequentemente

confundirem e,consequentemente,chamaremasplacasdentígerasassociadas e eles

defaringobranquiais.

Os faringobranquiais de Prochilodus (Characiformes) se desenvolvem em uma

sequência própria, diferente daquela do surgimento dos ceratobranquiais e dos

epibranquiais. Os três mais posteriores surgem quase simultaneamente, sendo, o

quarto faringobranquial o mais bem corado. Mais tardiamente surge o primeiro

faringobranquial, o menor e mais delgado de todos. Esta situação é a encontrada

primitivamentenaslinhagensbasaisdeTeleostei,sendoasituaçãotambémobservada

em Cypriniformes (cf. Engeman et al., 2009). Todos estes elementos cartilaginosos

surgem articulados à extremidade medial dos respectivos epibranquiais,

proporcionando uma maior fixação da cesta branquial à base do neurocrânio. Foi

verificado que o primeiro e segundo faringobranquiais em alguns indivíduos de

Prochilodus, nos estágios mais avançados do desenvolvimento, podem sofrer uma

rotação (ou já surgem nessa posição), posicionando‐se mais anteriormente e quase

paralelamenteaosepibranquiais(e.g.Fig.14A).

O número de faringobranquiais, nos Siluriformes, varia de dois a quatro,

variação esta que pode, talvez, ser explicada por eventos de  redução. Em

Diplomystidae estão presentes, e ossificados, quatro destes elementos (cf. Nelson,

1969; Arratia, 1987). Os dois primeiros são finos ficam paralelos aos epibranquiais,

enquanto o terceiro e quarto são maiores e ficam transversais aos epibranquiais

posteriores. Quanto ao primeiro e segundo faringobranquiais dos Siluriformes, ainda

não existe consenso. O primeiro faringobranquial dos siluriformes adultos é

costumeiramente identificado como sendo uma estrutura cilíndrica, ossificada na



DiscussãoeConclusões

–

desenvolvimentodoesplancnocrânio

154

maior parte de sua extensão, usualmentedisposta paralelamente ao epibranquial I e

unidaà extremidademedialdesteossoeàfaceinternadohiomandibular(Bockmann,

1998). Arratia (1992) rejeitou a homologia deste elemento com o primeiro

faringobranquialdoscaraciformesegimnotiformes econsiderouesta estruturacomo

sendo neomórfica de bagres. Entretanto, Pinna (1993) considerou sua posição

diferenciada como sinapomorfia da ordem, não invalidando sua homologia com o

primeiro [= talvez o segundo] faringobranquial dos demais teleósteos (cf. Bockmann,

1998).

O segundo faringobranquial dos siluriformes é, na maior parte das vezes,

reconhecidocomosendoumamassacartilaginosalocalizadapróximaàsextremidades

mediaisdosepibranquiais IeII eàextremidadeanteriordo terceirofaringobranquial