62
da lesão, pode ser o parâmetro de cada estudo para a divisão entre os
grupos de maior e menor dimensão. Nossos grupos foram subdivididos de
acordo com o valor médio encontrado (0,6 cm), diferentemente de outros
estudos em que esta divisão foi em três grupos: <2 cm, de 2 a 5 cm e >5
cm
51
ou ainda de 0,2 a 1,5 cm, de 1,6 a 2,5 cm e de 2,6 a 7,7 cm
74
.
Em relação à metodologia empregada para a detecção dos
diferentes genótipos, apesar da técnica MADGE ser relatada como uma
genotipagem acurada para repetição de dinucleotídeos
77
, pela avaliação
dos nossos resultados pôde-se verificar uma divergência entre os
resultados encontrados pelo programa Phoretix e pelo seqüenciamento
genético. De acordo com o número de pares de base da região do gene
da MMP-9 estudada, os fragmentos com 18, 23 e 25 repetições deveriam
apresentar 117, 127 e 131 pb, porém, após análise dos valores
encontrados pelo programa Phoretix, os fragmentos do nosso estudo
apresentaram 119, 131 e 135 pb. Contudo, entendemos que esta
variação não interferiu na análise dos resultados, visto que o padrão da
corrida foi mantido em todo o gel e, o valor conservado entre as amostras
com mesmo alelo.
De qualquer forma, é importante ressaltar que existem várias
vantagens para a utilização do sistema MADGE. O gel utilizado
apresentou formato modificado
10,77
, permitindo a corrida das 94 amostras
simultaneamente. Desta maneira, minimizou-se a possível variação
individual dos géis quando utilizadas diversas corridas eletroforéticas. Em
adição, houve a redução do custo financeiro, visto que a análise do gel
possibilitou a detecção de três diferentes alelos, o que tornou possível o
seqüenciamento de apenas três amostras, ao invés de 94.
Visto que o protocolo básico utilizado para a detecção de
repetições de dinucleotídeos pelo sistema MADGE
77
foi seguido em nosso
estudo, acreditamos que a mensuração do tamanho dos fragmentos não
tenha sido exata neste trabalho, talvez devido à escolha dos marcadores.
Enquanto Rodrigues et al.
77
utilizaram marcadores que apresentavam